HPLC法测定扑感片中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度

HPLC法测定扑感片中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度 HPLC法测定扑感片中马来酸氯苯那敏的 含量及含量均匀度 第23卷第5期 2007年10月 广东药学院 JOURNALOFGUANGD0NGCOLLEGEOFPHARMACY Vo1.23No.5 0ct.2007 HPLC法测定扑感片中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度 罗丽娟,黄诺嘉(汕头市药品检验所,广东汕头515041) 摘要:目的建立用HPLC法测定扑感片中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度的方法.方法采用DIKMADiamonsilC柱,以乙 腈?水?三乙胺(体积比150:850:15)(用磷酸调节pH值至2.84-0.1)为流动相,检测波长为265rim.结果马来酸氯苯那敏在 2.8,14.0I-tg?mL范围内呈良好线性关系(r=0.9999,n=8),平均加样回收率为100.39%,RSD=1.45%.结论本法简 便,准确,为扑感片的质量控制提高了. 关键词:扑感片;马来酸氯苯那敏;含量均匀度 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1006—8783(2007)05—0531—02 扑感片是由地胆草,苍耳草,山葡萄,紫苏油,对 乙酰氨基酚及马来酸氯苯那敏制成的抗感冒复方制 剂.其质量标准收载于卫生部药品标准中药成方制 剂第20册,该标准采用滴定法测定对乙酰氨基酚含 量及薄层扫描法测定马来酸氯苯那敏含量,两种方 法的供试品溶液的前处理繁琐且易产生误差.为了 更好地保证药品质量且控制片剂间的含量变异程 度,本文采用HPLC法对该制剂中的马来酸氯苯那 敏的含量及含量均匀度进行测定.结果表明本文方 法简便,准确. 1仪器与试药 安捷伦1100全自动高效液相色谱仪;UV.2201 岛津可见紫外分光光度计;超声波清洗器 (KUDOS).马来酸氯苯那敏对照品(中国药品生物 0100 {80 60 磊40 20 辱0 制品检定所,质量分数:99.3%,批号:100047— 200305);对乙酰氨基酚对照品(中国药品生物制品 检定所,含量测定用,批号:100018—200408);扑感 片及缺马来酸氯苯那敏,对乙酰氨基酚的阴性对照 样品(广东万年青制药有限公司);乙腈为色谱纯; 其他试剂均为纯. 2色谱条件与系统适用性试验 色谱柱:DIKMADiamonsilC18(250mm×4.6 mm,5Ixm);流动相:乙腈一水.三乙胺(体积比150: 850:15),用磷酸调节pH值至2.8?0.1;检测波长: 265nm;柱温:35?;流速:1.0mL?min,,进样量: 20L.理论塔板数按马来酸氯苯那敏峰计算为11 640,分离度为28.04,见图1. 02040600204060 t/mint/min A.对照品B供试样品C.阴性样品 1.对乙酰氨基酚2.马来酸氯苯那敏 图1高效液相色谱 Fig.1HPLCchromatogram 3方法与结果 3.1对照品溶液的制备 精密称取105?干燥3h的马来酸氯苯那敏对 作者简介:罗丽娟,女,副主任药师,主要从事药品检验工作 和质量标准的研究. 照品约17.5mg,置50mL量瓶中,加流动相溶解并 稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液(1);精密称取 对乙酰氨基酚对照品400mg,置100mL量瓶中,精 密加入上述对照品溶液(1)20mL,加流动相适量使 溶解,并用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮 备液.精密量取对照品贮备液10.0mL置100mL 531 广东药学院,2007,23(5) 量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得. 3.2供试品溶液的制备 取本品10片,除去糖衣,精密称定,研细,取适 量(约相当于本品1片),精密称定,置lO0mL量瓶 中,加流动相约80mL,超声处理(功率300W,频率 33kHz)30rain,放冷,加流动相至刻度,摇匀,滤过, 0.45m微孔滤膜滤过,取续滤液即得. 3.3阴性对照溶液的制备 按处方比例及制备方法,制备缺马来酸氯苯那 敏和对乙酰氨基酚的阴性样品溶液.按上述色谱条 件进行检测.结果在对照品出峰位置未见其它杂质 干扰峰(见图1),说明处方中其它成分对对乙酰氨 基酚和马来酸氯苯那敏的测定无干扰. 3.4线性范围的考察 精密吸取上述对照品贮备液2.0,3.0,4.0,5.0, 6.0,7.0,8.0,9.0,10.0mL,分别置50mL量瓶中, 用流动相稀释至刻度,摇匀,依次进样,按上述色谱 条件测定峰面积.对照品浓度作为横坐标,峰面积 作为纵坐标,得线性回归方程:Y=一2.1248+ 21.7129X,r:0.9999.表明马来酸氯苯那敏在2.8 , 14.0I*g?mL范围内具有良好线性关系. 3.5精密度试验 取同一份供试品溶液(批号为050801),重复进 样6次,测定峰面积值,得RSD%为0.53%,表明精 密度良好. 3.6稳定性试验 取同一份供试品溶液(批号为050801),分别于 配制后0,1,2,3,4,6,8,12,16,24h进样,测定峰面 积,得RSD%为0.34%(n=10),表明供试品溶液在 24h内稳定. 3.7重复性试验 取同一批号供试品(批号为050801),分别平行 称取6份,照样品含量测定项下测定,测得马来酸氯 苯那敏标示量为115.50%,RSD为1.15%,表明重 复性良好. 3.8回收率试验 采用加样回收法,精密称取同一批已知含量的 样品(批号为050801)15份,每份约相当于0.13g, 每5份1组,分别于各组分中精密加人马来酸氯苯 那敏对照品贮备液4.0,5.0,6.0mL,即80%, 100%,120%的马来酸氯苯那敏对照品溶液(0.0695 mg?mL),按上述色谱条件测定,计算回收率,结 果平均回收率为100.39%,RSD为1.45%.可见本 法具有良好的回收率,见表1. 532 表1马来酸氯苯那敏加样回收率试验 Tab.1Recoverytestofchlophenaminemaleate 3.9样品测定 按上述测定方法对5批样品进行测定,计算含 量,5批样品测定结果见表2. 3.10样品含量均匀度测定 取本品1片,除去糖衣,研细,置100mL量瓶 中,其余同供试品溶液制备项,以上述色谱条件 按中国药典2005年版二部附录xE含量均匀度检 查法测定,结果见表3. 表2样品中马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度测定结果 Tab.2Contentanduniformityofsamples 4讨论 4.1检测波长的选择 经过对马来酸氯苯那敏,对乙酰氨基酚对照品 溶液的紫外吸收光谱测定及参考有关文献],考虑 到扑感片处方中对乙酰氨基酚和马来酸氯苯那敏 (0.7mg?片)的含量相差悬殊,为提高马来酸氯 苯那敏定量的准确性,故把检测波长定为265nm. 在此波长下,马来酸氯苯那敏有较大的响应值,重现 性好. (下转第535页) 第5期李玮玲,等.HPLC法测定复方水杨酸甲酯搽剂的含量 表3壬酸香蓝酰胺回收率实验结果 Tab.3Recoveryofpelargonicaddvanillylamide 表4样品测定结果 Tab.4Contentsofsample标示量/% 3讨论 3.1本品为复方制剂,主要成分较多,马来酸氯苯 那敏和壬酸香蓝酰胺的含量相对较少,标示量较大 的水杨酸甲酯等成分对测定有干扰,所以选择的色 谱条件为梯度洗脱. 3.2由于马来酸氯苯那敏和壬酸香蓝酰胺对流动 相较敏感,略微调整,对保留时间影响很大,但考虑 到整体测定,只能采用变动较小的梯度洗脱条件,这 样可以缩短分析时间,使样品中马来酸氯苯那敏保 留时间大于3min,壬酸香蓝酰胺的保留时间小于 20min. 3.3实验过程中,采用Watersparker—style(250mm ×4.6mm,5Ixm)和迪马(200mm×4.6mm,5txm) 两种不同品牌的色谱柱测定,结果发现色谱.Waters 柱分离效果较好,可以使被测主分与其他杂质分离 良好,而迪马柱却不能达到. 3.4马来酸氯苯那敏的最大吸收在268nm,壬酸 香蓝酰胺最大吸收在280nm,但由于马来酸氯苯那 敏的标示含量比壬酸香蓝酰胺大10倍,所以选择 280nm作为测定波长. 参考文献: [1]郭丙炎,王岚,刘彩君.酸性染料比色法测定复方岩白菜 素片中马来酸氯苯那敏的含量[J].中国医院药学杂志, 2000,20(12):725. [2]陆伟,赵新静.HPLC法测定感冒通片中马来酸氯苯那 敏的含量及含量均匀度[J].中国药事,2004,18(1):41. (收稿日期:2007—07—26;修回日期:2007—09—14) (上接第532页) 4.2流动相pH值的选择 pH值对马来酸氯苯那敏的出峰时间及峰形影 响较大.当pH值为3.0,3.5时,扑感片中的马来 酸氯苯那敏和对乙酰氨基酚两个主成分色谱峰与阴 性样品峰不能很好分离,且马来酸氯苯那敏的峰变 宽,保留时间变长.当pH值为2.8?0.1,色谱峰得 到较好的分离,峰形比较理想,马来酸氯苯那敏与其 相邻色谱峰的分离度均大于1.5附录.流动相中 使用三乙胺可有效改善前沿峰现象,经反复摸索,最 终以乙一腈水一三乙胺(体积比150:850:15)(用磷酸 调节pH值至2.8?0.1)为本法的流动相. 4.3实验中分别对提取溶剂,提取时间进行考察: 以无水乙醇,甲醇,流动相,水为提取溶剂,均超声 30min,经比较,以流动相作为提取溶剂为佳;再以 流动相为提取溶剂,对同一批号样品的超声时间进 行考察,选择超声15,30,45,60min后处理的样品 溶液分别进行分析,结果各样品含量基本接近,故选 择超声时间30min处理样品. 4.4实验考察了5批扑感片中马来酸氯苯那敏的 含量及含量均匀度,结果1批样品的A+1.80S大 于15.0,A+s亦大于15.0.根据中国药典含量均 匀度检查法规定附录x,可直接判该批样品不符合规 定.分析其原因可能是扑感片为中西药复方制剂,其 中药浸膏与化学药的质量比约为5:1,而化学药马来 酸氯苯那敏(0.7mg?片)和对乙酰氨基酚的质量 比约为1:57倍,再加上中药浸膏粘度较大,使马来酸 氯苯那敏不易混匀.因此,建议厂家在生产此类中西 药复方制剂时,适当添加些流动性较好的辅料并加强 生产管理,以保证本品含量均匀度检查合格. 参考文献: [1]张红贞,曹文冰,冉大强,等.HPLC法测定复方氨酚那 敏颗粒中两种组分的含量[J].齐鲁药事,2005,24(3): 145. [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典:2005年版二部 [S].北京:化学工业出版社,2005. (收稿日期:2007—06—11;修回日期:2007—08—28) 535