高效液相色谱法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量_141595

高效液相色谱法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量_141595 高效液相色谱法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量 [标签:来源] 作者:王举涛，陈明， 叶杰胜， 许凤清 【摘要】 目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量。方法HPLC 法，Zobax-ODS柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)0.1 mol/L 酸(28?72?0.3)，检测波长:250 nm，流速:1.0 ml?min-1。结果甘草酸在44.84,224.20 μg/ml范围内有良好的线性关系，r=0.999 9(n=5)，平均回收率为97.56%。结论 该方法分 离度高，重现性好，简便，准确，可用于胃康灵胶囊的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱; 胃康灵胶囊; 甘草酸 Abstract:ObjectiveTo determine glycyrrhizic acid in Weikangling Capsule by HPLC.Methods HPLC was used in the quantitative analysis of glycyrrhizic acid in the sample.The separation was performed on ZobaxODS C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)column with a mixture of acetonitrile:0.1mol/L ammonium acetate:acetic acid(28?72? 0.3)as mobile phase.The detection wavelengh was set at 250 nm and the flow rate was 1.0ml?min-1. ResultsThe standard curve was linear in the range of 44.84,224.20 μg?ml-1for glycyrrhizic acid (r=0.999 9,n=5).The average recovery was 97.56%.ConclusionThe method is simple,reliable,and it can be used for determination of Glycyrrhizic acid. Key words:HPLC; Weikangling capsule; Glycyrrhizic acid 胃康灵胶囊选用多种名贵中药材，运用传统的炮制方法和现代的制剂手段精制而成，属 纯中药制剂。经药效学实验及临床验证结果证实，本品具有柔肝和胃，散淤止血，缓急止痛， 去腐生新的作用，并且具有镇痛、止血、抗炎、保护胃黏膜等作用,1,。方中白芍、甘草用 量较大，为其主要成分，其主要活性成分分别为芍药苷、甘草酸等,2,4,。由于芍药苷的测 定已有文献报道，且已有薄层鉴别，所以参照有关文献用甘草酸作为含量测定指标具有一定 的实际意义。本实验用高效液相色谱法测定甘草酸含量，方法可靠，灵敏，快速。可用于胃 康灵胶囊的质量控制。 1 仪器与试药 日本岛津LC10AT液相色谱仪、浙江大学N2000色谱工作站、JL180超声波清洗器(功率300 W，频率50 kHz，上海杰理科技有限公司)、RE52CS型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。甘草酸单铵盐对照品(中国药品生物制品检定所，批号:731200205)，乙腈为色谱纯，其余试剂、试药均为纯，水为重蒸去离子水。 2 方法与结果 2.1 系统适用性 色谱柱:Zobax ODS柱(4.6 mm×250 mm，5 μm); 柱温:25?;流动相:乙腈-0.1 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(28?72?0.3)，检测波长:250 nm;流速:1.0 ml/min。理论板数以甘草酸计不低于2 000，分离度:R=1.69(R,1.5)。按照处方组成，取除甘草外的其余药味，按制备工艺要求制成不含甘草的胃康灵胶囊，按供试品溶液制备项下方法制备阴性对照溶液。阴性对照溶液在与甘草酸对照品相同保留时间处无干扰峰出现，所以处方中其它味药对测定结果无影响。参见图1。 2.2 供试品溶液的制备 取本品内容物约1.0 g，精密称定，置50 ml量瓶中，加流动相约45 ml，超声处理30 min，放冷，加流动相稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。 2.3 对照品溶液的制备 称取甘草酸单铵盐对照品约1.0 mg(折合甘草酸为0.979 5 mg)，精密称定，置10 ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升中约含甘草酸100 μg)。 2.4 线性关系的考察 精密称取甘草酸单铵盐对照品2.289 mg(折合甘草酸2.242 mg)置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取0.2，0.4，0.5，0.6，0.8，1.0 ml，分别置于6个1 ml的量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为不同浓度的对照品溶液，分别吸取20μl进样，记录色谱峰面积，以峰面积(A)为纵坐标(Y)，甘草酸浓度(μg/ml)为横坐标(X)，绘制标准曲线，得回归方程,相关系数及线性范围分别为:Y=13 038X-2 425，r=0.999 9(n=5)，44.84,224.20 μg/ml。 2.5 精密度实验 精密吸取甘草酸对照品溶液20 μl，重复进样5次，测定甘草酸峰面积值，RSD为0.70%(n=5)。 2.6 稳定性实验 精密吸取供试品溶液20 μl，每间隔1 h测定一次，结果显示5 h内，溶液中甘草酸峰面积稳定，RSD为1.65%(n=5)，稳定性较好。 2.7 重现性实验 精密称取样品(批号20060218)内容物适量5份，按供试品溶液制备项下方法处理，按上述色谱条件分析测定，甘草酸平均含量为1.719 mg/粒，RSD为1.31%(n=5)，重现性较好。 2.8 回收率实验 精密称取已知含量(1.719 mg/粒)的同一批号的样品(批号20060218)内容物约0.5 g共5份，再分别加入一定量的甘草酸单铵盐对照品溶液，混合均匀，微热蒸干。按含量测定项下供试品溶液的制备方法配制供试品溶液。按含量测定项下方法测定，结果平均回收率为97.56%，RSD为0.64% (n=5)。结果见1。表1 加样回收率实验结果(略) 2.9 样品的测定 取不同批次的样品，按照供试液制备项下方法操作，得供试品溶液，按上述色谱条件分析测定，结果见表2。表2 样品含量测定结果(略) 3 讨论 3.1 超声时间的考察 对超声处理制备供试品溶液进行了考察。结果显示，超声处理20 min和30 min时，甘草酸的提取率相近。为保证提取完全，确定超声提取时间为30 min。 3.2 流动相的选择 50.1 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(28?72?0.3)为流动相时，甘草酸的分离度和峰形最好。 本法测定胃康灵胶囊中甘草酸的含量，样品前处理简单，实验结果表明分离度好、干扰少、前处理简便，可推广应用。 【参考文献】 ,1,张新春，王书杰，王丽萍. 胃康灵胶囊治疗胃溃疡临床疗效观察,J,.时珍国医国药, 2004, 15(10) : 676. ,2,国家药典委员会.中国药典?部,S,.北京:化学工业出版社, 2005:210. ,3,程锦国.胃康灵治疗慢性胃炎352例的临床观察,J,.中国中医药科技，1997，4(4):243. ,4,王铁武，刘爱琴.胃康灵治疗胃炎和消化性溃疡的疗效观察,J,.宁夏医学杂志，1997，19(6):376. ,5,罗玉川.胃康灵胶囊质量标准研究,J,.广东药学，2004:15.