HPLC法测定调经促孕微丸中淫羊藿苷的含量

HPLC法测定调经促孕微丸中淫羊藿苷的含量 HPLC法测定调经促孕微丸中淫羊藿苷的 含量 ? 1794?光明中医2011年9月第26卷第9期CJGMCMSeptember2011.Vol26.9 一 步发展,更多药物调脂的功效将会被揭示.关于活 血化瘀药降脂的机制尚未达成共识,其降脂的机制可 能由于脂蛋白与纤溶酶原同源,有互相竞争作用,血脂 和纤溶酶之间通过脂蛋白互相制约.所以推测与溶 血,抗凝作用有关的中药在一定程度上具有调脂作用. 同时相关研究发现,在糖尿病肾病进展过程中,脂质异 常是不可忽视的作用机制之一.Wang等学者报道 了基因型2型糖尿病FVBdb/db小鼠肾脏的SREBP.1 和SREBP一2的蛋白含量显着增加,与其靶基因ACC, FAS,以及HMG.CoA还原酶和LDL受体的mRNA 达增加并行,导致肾脏TG和Tc沉积;肾组织TGF—B, PAI.1和VEGF亦高表达.FVBdb/db小鼠出现肾小 球硬化,肾小管间质纤维化和蛋白尿.血清中脂质代 谢紊乱的表现,是否与肾脏SREBP一1和SREBP-2的蛋 白含量增加具有相关性,还需要进一步研究. 5结论 综上所述,糖末宁合剂具有调节糖尿病肾病大鼠 血脂的作用.临床在治疗糖尿病肾病的时候可以适当 的应用糖末宁合剂,通过其对血脂的调节作用延缓肾 病的发展,改善患者的预后,节约患者的开支. 参考文献 [1]VanDijkC,BerlT.Pathogenesisofdiabeticnephropathy[J].Rev EndocrMetabDisord,2004,5(3):237-248. [2]毛红,李娜.血脂与糖尿病肾病相关性的临床研究[J].华中医学 杂志,2005,29(4):235. [3]JolesJA,KunterU,JanssenU,eta1.Earlymechanismsofrenal injuryinhyperchole8temlemicorhypertfiglyceridemicrats[J].J AmSocNephrol,2000,11:339. [4]AttmanPO,KnightGibsonC,TavellaM,eta1.Thecompositional abnormalitiesoflipoproteinsindiabeticrenalfailure[J].Nephrol DialTransplant.1998,13:2833. [5] [6] [7] [8] [9] [10] [12] [13] [14] [15] [16] [17] [18] 廖泷,秦岗.2型糖尿病患者糖尿病肾病与血脂相关性分析[J]. 遵义医学院学报,2007,30(1):76. 邢淑丽,郑君芙,黄文政.单侧肾切除STZ诱导糖尿病肾病大鼠 动物模型研究[J].中国中医急症,2006,15(6):643-644. 刘志红,黎磊石.糖尿病肾病发病机理[J].中华肾脏病杂志, 1999,15(2):1364. 阮颖新,李淑英.2型糖尿病肾病与2型糖尿病血脂变化的比较 [J].哈尔滨医科大学学报,2004,38(1):94-97. 叶勇,梅国强,刘松林,等.化痰活血方对高脂血症大鼠血脂代谢 的影响及其抗氧化作用[J].时珍国医国药,2005,16(10):968. 969. 叶勇,赵春霞,汪道文,等.化痰活血方调脂及保护内皮细胞的作 用[J].中国临床康复,2006,10(19):74-77. 叶勇,梅国强,刘松林,等.化痰活血方对高脂血症大鼠血液流变 学的影响[J].湖北中医学院学报,2005,7(3):11.13. 刘炜.血府逐瘀胶囊治疗高脂血症43例临床研究[J].北京中 医,2003,22(5):63-64. 焦亚斌,李冀,肖洪彬.活血化瘀法对实验性高脂血症大鼠调血 脂作用的研究[J].中医药信息,2002,19(6):55-56. 杨庆,梁Ft欣,叶锦霞,等.红花提取物对高脂血症模型大鼠降血 脂作用和安全性实验研究[J].中国实验方剂学志,2007,13 (11):30-33. 丁虹,彭仁秀,汪晖当,等.当归对去势雄性大鼠血钙,血脂,抗氧 化功能及脏器指数的影响[J].中国药科大学学报. 张益嘉,吴铁,崔燎,等.丹参水溶性有效部位群与丹酚酸B对去 卵巢大鼠血脂的调节作用[J].辽宁中医药大学学报,2008,10 (7):146—148. 胡俊,沈中晨,沈芸,等.三七毛根皂苷对动脉粥样硬化大鼠血脂 及血管细胞黏附分子表达影响[J].上海大学学报(自然科学 版),2009,15(3):320-325. WangZ,JiangT,LiJ,eta1.Regulationofrenallipidmetabolism, lipidaccumulation,andglomeruloselerosisinFVBdb/dbmieewith type2diabetes[J].Diabetes,2005,54:2328. (本文校对:庞春渝收稿13期:2011—01—10) HPLC法测定调经促孕微丸中淫羊藿苷的含量 郭洁黄伟 摘要:目的建立高效液相(HPLC)法测定调经促孕微丸中淫羊藿苷的含量的方法.方法用十八 烷基硅烷键合硅胶为填充 剂;0.075moL/L磷酸(用三乙胺调节PH值至4.5)一乙腈(72:28)为流动相,流速为1ml/min;柱 温为室温.结果淫羊藿苷含量在 16ng一100ng线性范围内,r=0.9998,平均加样回收率为100.31%,RSD=2.02%(n=6).结论实验 表明,该方法方便快捷,准确, 灵敏度高,重现性好,可用于本制剂的质量控制. 关键词:淫羊藿苷含量测定;调经促孕微丸;高效液相法 doi:10.3969/j.issn.1003.8914.2011.09.028文章编号:1003-8914(2011)-09—1794—02 调经促孕微丸是由鹿茸(去毛),淫羊藿(炙),黄 作者单位:1.陕西中医学院(咸阳712046); 2.陕西国际商贸学院(咸阳712046) 芪,茯苓,山药,仙茅,续断,桑寄生,菟丝子,枸杞子,覆 盆子,鸡血藤等l8味药材加工制成的中药复方制剂, 由水蜜丸改剂型而成.具有补肾健脾,养血调经的 光明中医2011年9月第26卷第9期CJGMCMSeptember2011.Vol26.9?1795? 功效.用于脾肾阳虚引起的经血不调,经期不准,月经 过少,久不受孕,或继发性闭经,黄体功能欠佳,不孕症 等属脾肾阳虚证候者.方中淫羊藿为君药,现代研究 表明淫羊藿苷对肾,心血管系统和神经系统具有广泛 的药理功效,常常把其作为质量控制的指标.为此采 用高效液相色谱法对制剂中所含的淫羊藿苷进行了定 量控制,该测定快捷,准确,可靠’. 1仪器和试药 仪器:岛津高效液相色谱仪:ShimadzuLC-10ATVP 输液泵;ShimadzuSPD—M10AVP检测器;Class—vp工作 站;塞多利斯BP211D电子天平. 试剂:磷酸为色谱纯,乙腈为分析纯,水为二次蒸 馏水; 试药:淫羊藿苷对照品,批号:737.200111(供含量 测定用),中国药品生物制品检定所提供. 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂;0.075mol/L磷酸(用三乙胺调节 pH值至4.5)一乙腈(72:28)为流动相;检测波长 270nm.理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000. 流速1.0mlfmin,进样量101M.在此色谱条件下,淫羊 藿苷峰与其它成分峰均能达到基线分离,且基线平稳. 2.2测定方法 对照品溶液的制备:精密称取淫羊藿苷对照品适 量,加甲醇制成每1ml含4g的溶液,即得. 供试品溶液的制备:取供试品适量,研细,取0.2g, 精密称定,置索氏提取器中,加乙醚适量,加热回流提取 至无色,冷至室温,弃去乙醚液.药渣挥去乙醚,置索氏 提取器中加甲醇适量,加热提取至无色,取甲醇提取液, 蒸干,残渣加流动相使溶解,转移至20ml量瓶中,加流 动相稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得. 测定法:精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液 各10I,注入高效液相色谱仪,测定,即得. 2.3空白干扰试验按处方比例称取除淫羊藿外的 各药材,按质量标准正文中制法制成阴性样品,按供试 品溶液制备方法制成阴性对照溶液,并按照上述色谱 条件测试.结果阴性样品HPLC图谱中在与淫羊藿苷 对照品HPLC图谱中相同保留时间处未出现色谱峰, 说明按本法的试验条件测定,缺样空白无干扰. 2.4线性关系考察精密称取淫羊藿苷对照品适量, 加甲醇制成每1ml含4g的溶液,精密吸取4,6,8, 10,15,201xl,注入高效液相色谱仪,按上述色谱条件测 定,以淫羊藿苷峰面积值为Y,进样量为x(ng),进行 线性回归,得线性方程:Y=3354.9x一3944.3,R= 0.99985.结果表明,在16ng一100ng范围内,淫羊藿 苷进样量与峰面积值呈良好的线性关系. 2.5精密度试验取淫羊藿苷对照品适量,用甲醇制 成每1ml含4g的溶液,作为对照品溶液.另取供试 品样品一批(批号100317),按供试品溶液的制备方法 制备供试品液.各精密量取101,注入高效液相色谱 仪,记录色谱图,共测定6次.对照品色谱峰积分平均 值130615,RSD%=2.456%;供试品色谱峰积分平均 值164729,RSD%=1.078%.结果表明本测定方法精 密度良好. 2.6溶液的稳定性试验取精密度试验的对照品溶液 作为对照品溶液.另取供试品样品一批(批号 100317),按供试品溶液的制备方法制备供试品液.每 间隔一定时间,各精密吸取10td,注入高效液相色谱仪 测定,共测定6次,对照品RSD%=2.01%,供试品 RSD%=1.4%.结果表明两种溶液在8h内基本稳定. 2.7重现性试验取同一批号样品6份(批号 100317),按以上色谱条件及测定法测定,计算每份样 品中淫羊藿苷的含量.结果,6次测定结果RSD%= 1.07%,表明该方法重复性良好. 2.8回收率试验取已知含量的样品(批号 100317),研细,精密称取6份(每份约0.1g),分别精 密称定,置于10ml量瓶中,再精密量取适量淫羊藿苷 对照品27g/m1溶液1ml,分别加入样品中,按供试品 溶液制备方法制备,并按质量标准中色谱条件测试,计 算回收率.结果表明,平均回收率为100.31%,RSD 为2.02%(n=6),符合定量测定要求. 2.9样品测定取三批样品,分别按供试品溶液制 备方法制备,用上述方法分别测定淫羊藿苷的含量,结 果见下表. 表1含量测定结果mg/袋 3结论 采用高效液相色谱法测定调经促孕微丸中淫羊藿 苷的含量,方法可靠,简便,准确,灵敏,重现性好,回收 率等均符合要求,可作为该制剂的质量控制方法. 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[s].2000年版一部.北 京:化学工业出版社,230. [2]苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[J].北京:人民卫生 出版社,2000. [3]谢秀琼.中药新制剂开发与应用[J].北京:人民卫生出版社. (本文校对:郭惠玲收稿日期:2011—02—26)