河源地区妇女官颈感染人乳头瘤病毒调查分析

河源地区妇女官颈感染人乳头瘤病毒调查分析 河源地区妇女官颈感染人乳头瘤病毒调查分析 刘运华 廖悦余 吴东恩 【摘要】目的调查分析广东河源地区妇女宫颈感染HPV基因型别的分布情况，为预防HPV感染和宫颈癌防治提供实验诊断依据。采用基因芯片技术对1 037例妇女的宫颈脱落细胞标本行21种HPV基因型别检测，并对227例阳性患者中的163例进行病理活检。结果1 037例受检妇女中感染HPV 227例，感染率为2 1.89%，检出20种基因型，共314项，高危型269项，占85.67%;低危型45例，占14.33%，未检出基因亚型为42。高危型感染率排在前五位的依次是HPV52(18.47%)、HPV16(11.78%)、HPV58(11.15%)、HPV53(7.32%)、HPV18(5.1%);低危型以HPV 11、HPVCP8304与HPV6多见。单一感染171例，占75.33%，双重感染34例，占14.98%，多重感染22例，占9.69%。HPV感染率最高在30~39岁年龄组，阳性率为26.56,。163人进行病理活检，137人有宫颈组织病变，病变率达到84%。结论河源地区妇女HPV总感染率较高，HPV基因分型检测对宫颈癌的预防、早发现和早诊疗具有重要临床意义。 【关键词】人乳头瘤病毒 基因分型 宫颈癌 基因芯片技术doi:10.3969/j.issn.1671-332X.2017.11.034人乳头瘤病毒(Human Papilloma Virus, HPV)，是一种专性感染人皮和粘膜鳞状上皮的病毒，分为100多种亚型，近40种亚型与生殖道感染有关，约20种亚型与宫颈癌相关。目前，国内外已公认HPV感染是导致宫颈癌的主 ，并依据HPV型别与癌发生的危险性高低将HPV分为高危型和低危型两要病因 类。低危型主要与生殖器疣有关，高危型则与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的发生密切相关 ,1,。本文通过调查分析河源地区妇女宫颈感染HPV基因型别的分布情况，更好地为本地区宫颈癌的预防、早发现和早诊疗提供可靠的实验数据。现将相关情况报告如下。1与方法 1.1材料 1. 1.1研究对象 对2017年3月~2017年6月在我院妇科门诊检查和体检的1 037名妇女进行HPV-DNA分型检测，受检者均有性生活史1年以上，年龄16~61岁，平均34.67岁。对227例HPV阳性患者中的163例(年龄19~57岁)行阴道镜检查后，在镜下多点活检或颈管搔刮送病理。 1. 1.2试剂及仪器运用凯普HybriMax医用核酸分子快速杂交基因分型试剂盒同时进行21种亚型检测，包括15种高危型和6种低危型。Haier(HR-PCR-96G)梯度基因扩增仪，凯普医用核酸分子快速杂交仪。巴氏染色液，奥林巴斯显微镜等。 1.2方法 1.2.1HPV-DNA分型检测采用塑料颈管毛刷收集宫颈管和宫颈外口的脱落细胞，将颈管毛刷在盛有细胞保存液的小瓶中涮洗，在管口处将多余的刷柄折断，将刷头留在样本管中送检。运用凯普HybriMax医用核酸分子快速杂交基因分型试剂盒作病毒分型检测。实验步骤: ?脱落细胞中DNA的提取。 ?聚合酶链反应(PCR)扩增。 ?快速杂交。 ?观察结果: 只有Biotin对照点及内对照点(IC)点同时显色才是有效结果;如果阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点，但IC点不显色亦是有效结果，见图1~图3。探针在膜条上的排列顺序为Biotin、 6、 11、4 2、4 3、4 4、IC、 16、 18、3 1、3 3、3 5、3 9、4 5、5 1、5 2、5 3、5 6、5 8、5 9、6 6、6 8、CP830 4、空白点。 ?结果判读:只要有1种亚型阳性即为 HPV感染，2种或2种以上亚型阳性为 HPV多重感染。 1.2.2阴道镜检查及镜下多点活检或颈管搔刮送病理科，组织病理学常规制片、巴氏染色、镜检分析。诊断标准参考2017年版WHO《乳腺及女性生殖器官肿瘤病理学和遗传学》，将组织细胞病变进行分型。 1.2.3统计学处理应用卡方检验进行统计学分析，p,0.05为差异有统计学意义。2结果2.11 037例受检妇女中HPV阳性227人，感染率为2 1.89%，21种基因型中检测出20种亚型，HPV42亚型未被检出，共314项，高危型269项，占85.67%;低危型45例，占14.33%。各亚型感染分布情况见表1。2.2将1 037例受检妇女从?19岁开始到?50截止，以10岁为一个年龄段，共分为5组。感染人群以30~39岁年龄组为主，筛查人数最多，阳性率最高;组间差异存在统计学意义(X2,11.22，p 0.05),以单一感染为主，整个感染分布情况呈正态分布。多重感染22例(9.69%，22/227)，其中三重感染17例(7.48%，17/227)， 四重感染2例(0.88%，2/227)，五重感染2例(0.88%，2/227)，六重感染1例(0.44%，1/227)。见表2。2.3高危型HPV与宫颈组织病变的相关性227例HPV阳性患者中有163人进行病理活检，137人有宫颈组织病变，病变率达到84%，其中慢性宫颈炎27人;CIN?32人;CIN?/?68人;宫颈癌10人。在137例宫颈组织病变患者中，感染率排在前五位的高危型HPV分别为52(34.3%)、16(27%)、58(24.09%)、18(11.68%)、33(6.57%)。3讨论3.1HPV基因亚型感染存在地区差异河源地区筛查的1 037例妇女的HPV感染率为2 1.89%，与深圳(2 1.15%) ,2,和佛山(20.7%) ,3,、衡阳地区(20.12%) ,4,较为接近，高于辽沈地区(14.65%) ,5,，低于重庆地区(37.3%) ,6,，这可能与地区差异性有关。227例阳性样本的各亚型分布情况，高危型以HPV5 2、 16、5 8、5 3、18为主，低危型以HPV 11、CP830 4、6为主，与佛山地区妇女HPV感染的亚型前5位HPV5 2、 16、5 8、5 6、18 ,3,及衡阳地区妇女HPV感染高危型以HPV5 2、 16、58 为主，低危型以HPV 11、6 ,4,为主基本接近。3.2年龄与HPV感染的相关性有研究报道表明，HPV感染情况与年龄有一定的关系。对于年轻女性，由于性生活频繁而感染HPV的机会增多 ,7,;而对于年长女性，又处于绝经期、卵巢功能下降和机体对外界有害因素的抵抗力降低，加上宫颈因多次分娩而受损亦容易被HPV感染 ,8,。本调查分析结果表明，河源地区妇女感染高峰在30~39岁，此年龄组的阳性率最高(26.56%)，20~29岁和40~49岁年龄组，阳性率分别为20.38%和16.85%，明显下降，整个感染分布情况呈正态分布，说明性活跃妇女的HPV感染率较高。这与上述文献关于性活跃的年轻妇女HPV感染机会增多，其流行状态随年龄的增长而逐渐降低的报道较为一致。3.3HPV感染与宫颈癌的关系研究表明，HPV感染可能诱导多种肿瘤的发生，例如结膜鳞状细胞癌、头颈部肿瘤、食管癌、乳腺癌、子宫颈癌、前列腺癌、阴茎癌等 ,9,，宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌，居女性恶性肿瘤的第二位。在全世界范围内，宫颈癌的发病率和病死率均较高，我国每年宫颈癌的新发病例超过13万，占全球的1/4~1/3，给家庭和社会造成巨大的经济和社会负担 ,10,。高危型HPV与宫颈癌密切相关，其中HPV16是宫颈癌中最常见亚型，其次是HPV5 2、5 8、53和HPV18。低危型HPV 11、CP830 4、6亚型极少出现在宫颈恶性病变中，主要引起外生殖器尖锐湿疣和宫颈良性病变。在本调查中，1 037例检测样本有227例HPV阳性，感染率为2 1.89%(227/1 037)，其中高危型占85.67%。病变宫颈组织中，高危型HPV的检出率随宫颈病变‎‎程度递增进一步证实了高危型HPV是宫颈癌的重要诱因，这提示我们需密切关注河源地区妇女HPV的感染情况，定期对高危人群进行随访;建立包括健康体检、生活指导、行为干预、定期举办健康讲座等健康管理模式 ,11,;对普通人群做好HPV感染相关知识的宣传及性卫生教育，这对降低人群HPV感染率，减少宫颈癌的发生有积极意义。3.4HPV的多重感染河源地区妇女感染HPV，主要为单一基因型感染，占感染人数的75.33%(171/227)，其余为混合感染56例，占感染人数的24.67%，感染基因型最多的为六重感染0.44% );混合感染的类型以双重感染为主，14.98%(34/227)，且主要是高危(1/227 亚型间的混合感染，占69.64%(39/56);其余为低危亚型和高危亚型的混合感染，占30.36%(17/56);未发现仅有低危亚型间的混合感染。HPV52是混合感染中最常见的感染亚型，占4 1.07%(23/56);其次是HPV16，占30.36%(17/56)。HPV感染是性传播疾病之一，患者和(或)对方性伙伴越多，多重感染的概率可能就越大。大多数人感染后会自行消退，这与个人的年龄和免疫功能有关，只有持续的高危型的HPV 感染才会发生癌前病变或宫颈癌,12,。自身清除病毒，单一感染者可能比多重感染者容易，其中HPV16是最难清除掉的基因型。妇女感染高危型HPV后，在随后的几年中发展成CIN?级病变的风险比未感染者大得多。目前国外研究用来预防宫颈癌的HPV疫苗，主要针对HPV16和HPV18的两价疫苗，但是对混合感染中除HPV16和HPV18外其他高危亚型的感染没有预防能力，因而不完全能够达到理想的预防效果。因此了解各地区的HPV感染类型及各自比例，对研究制定针对性的基因疫苗也有积极意义。综上所述，河源地区妇女HPV感染率较高，高危型组感染率高于低危型型组，以单一感染为主，感染的基因型别主要以高危型HPV5 2、 16、5 8、5 3、18和低危型HPV 11、CP830 4、6多见。HPV基因分型检测对宫颈癌的预防、早发现和早诊疗具有重要临床意义。参考文献 ,1,张青,杨真,袁小林,等.大连地区2 755 例不同年龄组HPV 亚型感染状况分析,J,.现代预防医学,2017,41 (2):345-348. ,2,任晓慧,耿建祥,李海,等.深圳市2 109例女性宫颈细胞中HPV基因型别的研究,J,.国际检验医学杂志,2017, 33 (13):1542-1544. ,3,雷金菊.佛山市1 638例女性HPV基因分型状况分析,J,.国际检验医学杂志,2017,34 (3); 370-37 1. ,4,陈友军,唐双阳,李乐.衡阳地区2 749例女性宫颈人乳头瘤病毒感染情况分析,J,.中国现代医药杂志,2017,15 (1):7-10. ,5,谢成耀,安舒,韩阳,等.辽沈地区23 760例妇科就诊患者HPV感染状况分析,J,.中国卫生统计,2017,31 (2):268-269. ,6,杨赟平,杨双双,张莉萍.重庆地区妇女高危型HPV感染现状及年龄的分层分布,J,.重庆医学,2017,42 (3):249-250. 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