血常规SOP文件

全自动血细胞SOP 一，检验目的及原理 1，目的：用BC-3000 Plus 全自动血细胞分析仪，在临床和实验室定量分析血液细胞，对人体的血液中三种有形成分（红细胞，白细胞，血小板）的19项参数和3个直方图进行分析。是人体血液的基本生理病理指标之一。 白细胞计数 WBC 淋巴细胞计数 Lymph# 中间细胞计数 Mid# 中性粒细胞计数 Gran# 淋巴细胞百分比 Lymph% 中间细胞百分比 Mid% 中性粒细胞百分比 Gran% 红细胞计数 RBC 血红蛋白 HGB 平均红细胞体积 MCV 平均红细胞血红蛋白含量 MCH 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC 红细胞分布宽度变异系数 RDW-CV 红细胞分布宽度差 RDW-SD 红细胞压积 HCT 血小板计数 PLT 平均血小板体积 MPV 血小板分布宽度 PDW 血小板压积 PCT     白细胞分布直方图 WBC Histogram 红细胞分布直方图 RBC Histogram 血小板分布直方图 PLT Histogram     对患者和健康人群来讲，观察有无各种原因引起的贫血，出血和失血，目前机 体有无细菌及病毒感染，可筛查出各种血液病，如白血病，血小板减少性紫癜等。 2，原理：电阻法 测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释，用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下，分别通过各自的计数微孔，流入管道，通过两个光电传感器，在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。 用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。电极插在液体中计数微孔的两边，在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境，根据血细胞非传导性的性质，当有细胞通过计数微孔时，将引起阻抗的变化，阻抗变化的大小与细胞体积成正比。 WBC根据体积的大小，它有多种形态，由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同，WBC的体积大小会发生变化。在一定的程序控制下，显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞（嗜酸＋嗜碱＋单核）和中性粒细胞。 被稀释的血样加入溶血剂后，红细胞溶解，释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂结合形成复合物，用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强，用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较，得到血红蛋白浓度（空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态）。 二，标本 1，标本种类：末梢血为200-300微升，静脉血2毫升。 2，采集标本容器及添加剂：容器：末梢血为一次性朔料试管，静脉血为真空采血管。添加剂：不同实验使用不同的抗凝剂，不能互相代替。血常规用EDTA-k2抗凝。 3，采集：毛细血管采集或静脉穿刺采集。采集时间：患者随到随时采集。 4，标本运送：标本采集后，应及时送检。 5，标本接受：标本的编号与化验单上的编号要一致，清楚，正确及完整。 6，准备与保存：室温静置10-15分钟，充分混匀后上机检测。血液常规标本一般保存在室温24小时。 三，设备与试剂 1，设备：BC-3000 Plus 全自动血细胞分析仪。深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产。产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400522号。 2，专用试剂： ① 稀释液：M-30PD，等渗溶液，具有特定的电导值，为细胞计数提供稳定的环境。作为人体血细胞计数，体积测量以及白细胞分类计数时的稀释液使用。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，Na2SO4，缓冲剂，抗菌剂。本品2-30℃保存期2年。开瓶后，使用温度15-30℃，有效期60天。 产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400276号。 ② 冲洗液：M-30PR， 不含蛋白酶和次氯酸钠（NaCIO)等强蛋白清除剂的电解质溶液，用于仪器的进样孔，阀和管路系统的清洁和冲洗。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，KCl，Na2SO4，缓冲剂，抗菌剂和面活性剂。本品2-30℃保存期2年。开瓶后，使用温度15-30℃，有效期60天。 产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400303号。 ③ 无氰溶血剂：M-30PCFL，能溶解红细胞，与血红蛋白形成复合物。用于白细胞计数，白细胞分群和血红蛋白测定。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，KCl，Na2SO4，缓冲剂，抗菌剂和表面活性剂。本品2-30℃保存期2年。开瓶后，使用温度15-30℃，有效期60天。 产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400274号。 ④ E-Z清洗液（酶清洗液）：M-30PE，含有蛋白水解酶的电解质溶液，能有效地清除蛋白污渍，用于仪器的进样器，阀和管路系统的清洁和冲洗。本品应为透明液体，不得有沉淀，悬浮物和絮状物。主要成份，NaCl，，缓冲剂，抗菌剂，表面活性剂，蛋白水解酶。本品2-30℃保存期2年。开瓶后，使用温度15-30℃，有效期60天。 产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400303号。 ⑤ 探头清洁液：M-30PP，本品为含有次氯酸钠的电解质溶液，用于仪器的进样器，的清洁和冲洗。主要成份，NaOH，次氯酸钠（NaCIO)，表面活性剂。本品2-30℃保存期2年。开瓶后，使用温度15-30℃，有效期60天。 产品注册号：粤食药监械（准）字2005第2400303号。 四，操作步骤 1, 开机前的准备： ① 检查试剂（稀释液，冲洗液，溶血剂）是否足量，有无浑浊变质。 ② 试剂管路连接正常否，管道有无扭结。 ③ 并倒空废液瓶。 ④ 电源连接是否正常。 2，开机启动： 1 打开仪器主机后面的电源开关。 2 电源指示灯燃亮，仪器内部进行初始化，进行自检。 3 自动冲洗内部管路，自动测量本底。 4 80秒钟后进入计数界面。 3，本底检查： 出现计数界面后，仪器自动测量本底数值显示在屏幕上，本底结果要求： WBC≤0.3        RBC≤0.03        HGB≤1        PLT≤10 如果本底没有达到仪器的要求，仪器将会提示“本底异常”，请执行清洗或维护程序。 4，室内质控操作： 5，全血测量： ① 在计数界面下，按[模式]键，将模式设置为“全血”。 ② 用K2EDTA抗凝剂作抗凝血标本。  ③ 混匀抗凝血后，送到采样针下，让采样针插入抗凝血。 5 按开始键，开始对样本计数。 6 58秒后测试结果显示在屏幕上。 7 按“打印”键，结果打印出来。 6，末梢血测量： ① 在计数界面下，按[模式]键，将模式设置为“预稀释”。 ② 按“稀释液”，按开始键，用试管从采样针下取0.7ml稀释液。 ③ 将毛细血管采取的20μl末梢血标本，迅速注入盛有0.7ml的稀释液的试管中，制成稀释血样（注意针刺得要深，用不起毛的纸巾拭去第一滴血） ④ 制好的稀释血样要摇匀（注意不要剧烈震荡，否则有可能会因产生微小气泡导致计数值不准） 8 将预稀释血样放置3分钟后，再次摇匀，放于采样针下，按开始键计数。 9 58秒后测试结果显示在屏幕上。 10 按“打印”键，结果打印出来。 7，关机： 每天测试完毕一定要用E-Z清洗液执行“关机”程序，等待屏幕提示“关闭电源”后关掉主机电源。 WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、Lymph#、Lymph%、Gran#、Gran% 六，结果分析与 1，复查标准： HGB凡低于80g/L，高于170g/L者应进行复查。 WBC凡低于3*109/L或高于20*109/L者应复查。凡直方图有明显异常者，必须推片染色油镜分类。 PLT低于5×109/L或高于35×109/L应复查 2，按照仪器模式出血细胞分析检验报告。 七，参考值与临床意义： 1. 血红蛋白测定（HGB）：120-160g/L 降低：贫血、白血病、大量失血及钩虫病等。增高：慢性缺氧（肺气肿和先天性心脏病等）、严重脱水、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及真性红细胞增多症等时。 2. 红细胞计数（RBC）：4.0-5.5×1012/L 临床意义同血红蛋白，巨幼红细胞贫血时减少更为明显。 3. 红细胞压积（HCT）：0.42-0.49 增高：失水和大面积烧伤等所致的血液浓缩以及真性红细胞增多症时。降低：贫血及血液稀释时。 4. 红细胞平均容积（MCV）： 82-92fl 用于贫血分类：增大为巨红细胞性贫血，减小为小细胞性贫血（如严重缺铁性贫血）和遗传性球型红细胞增多症；正常红细胞性贫血时正常。 5. 红细胞平均血红蛋白含量（MCH）：27-31pg 用于贫血分类：增加见于大细胞性贫血，减少见于单纯小细胞性贫血和小细胞低色素贫血。 6. 红细胞平均血红蛋白浓度（MCHG）：320-360g/L 大细胞性贫血正常，单纯小细胞性贫血时正常，小细胞低色素性贫血时减小。 贫血形态分类 MCV MCH MCHC 病因 大细胞性贫血 ↑ ↑ → 巨红细胞性贫血，恶性贫血 正细胞性贫血 → → → 急性失血，急性溶血，再障，白血病 单纯小细胞性贫血 ↓ ↓ → 慢性感染，炎症，肝病，恶性肿瘤，风湿疾病 小细胞低色素性血 ↓ ↓ ↓ 缺铁性，地中海性，铁粒幼细胞性贫血           7. 红细胞分布宽度（RDW）： 11.5-14.5% 是反映血液中红细胞体积变异的参数，以测得红细胞体积大小的变异系数表示。RDW与MCV结合可将贫血分为①小细胞均一性贫血（MCV↓RDW正常，如地中海贫血），②小细胞不均一性贫血（MCV↓RDW↑，如缺铁性贫血），③正细胞均一性贫血（MCV，RDW均正常，常见急性失血和再生障碍性贫血），④正细胞不均一性贫血（MCV正常RDW↑，如早期缺铁性贫血和急性溶血性贫血），⑤大细胞均一性贫血（MCV↑ RDW正常，如慢性再障）。⑥大细胞不均一性贫血（MCV 和RDW均↑，如巨幼细胞性贫血和恶性贫血）。 8. 白细胞计数（WBC）： 4.0-10.0×109/L 增多：细菌性感染、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病和应激状态（急性出血和大手术）等增多（妊娠后期、月经期、饭后、剧烈运动后可有生理性增加）。            减少：病毒感染、伤害及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血、极严重感染、放射性辐照、肿瘤化疗后和非白血性白血病等。