【doc】维生素B6注射液的细菌内毒素检查
维生素B6注射液的细菌内毒素检查
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948?HeraldofMedicineVo1.24No.10October2005
维生素B6注射液的细菌内毒素检查
陈晓昱
(浙江省温州市食品药品监督管理局,325000)
[摘要]目的建立维生索B注射液细菌内毒素检查的方法.方法按《中华人民共和国药典))2ooo年版二部
附录细菌内毒索检查法和《细菌内毒索检查法应用指导原则》进行试验.结果维生素B注射液浓度?0.625
mg?mL时无干扰作用,=0.4EU,mg,.结论细茵内毒素检查法可用于维生素B注射液中细茵内毒索的检查.
[关键词]维生素B注射液;细菌内毒素检查法;干扰实验
[中图分类号]11977.22;11927.12[文献标识码]A[文章编号]1004-0781(2005)10-0948-02
维生素B注射液主要用于防治异烟肼中毒,也可用于妊
娠,放射病及抗癌药所致的呕吐,脂溢性皮炎等.《中华人民共
和国药典)2000年版对该药未设热原或细菌内毒素检查项,而
《美国药典(USP)}25版对该药设有细菌内毒素检查项.由于
该药在使用上常用于静脉注射给药,应对其内毒素的含量加以
控制.为此,笔者参照《中华人民共和国药典))2000年版细菌内
毒素检查法…及《细菌内毒素检查法应用指导原则》,对该药的
细菌内毒素检查方法进行了探讨和可行性研究,现报道如下.
1实验材料
鲎试剂(湛江安度斯生物有限公司,批号:0202212;厦门鲎
试剂厂.批号:0209075;规格:每支0.1mL,=0.25EU?mL).
细菌内毒素工作标准品(中国药品生物制品检定所,批号:2000—
9,规格:每支50EU).细菌内毒素检查用水(湛江安度斯生物
有限公司,批号:0112050,规格:每支2mL,内毒素含量<0.003
EU?mL).维生素B注射液(山东省方明药业有限公司,批
号:0203081,0203082,0205l92;浙江瑞新药业股份有限公司,
批号:20020320,20020530,20021018;规格:2mL:100mg).
旋涡混合器,恒温水浴箱.
2方法与结果
2.1灵敏度复核所用鲎试剂按《中华人民共和国药典》规定
方法进行灵敏度复核试验,结果均符合规定.
2.2初筛试验
EU?mg.根据人的最大注射剂量计算,由=K/M,式中K=5
EU?kg,?h,.|】If是人每1.0kg体重1h的最大剂量.由于本
品在临床上成人一次最大用量为200mg,因此确定|】If=200
mg/(60kg?h),计算得供试品的=1.5EU?mg,.按照从严
要求的原则,取0.4EU?mg为最终内毒素限值.
2.2.2有效稀释浓度的计算目前市售的鲎试剂灵敏度
()在0.03,1.00EU?mL’.,据C=A儿,计算得供试品有效稀
释浓度范围为2.500,0.075mg?mL,.以最大有效稀释浓度
2.500mg?mL为样品的基准稀释浓度,用细菌内毒素检查用
水以基准稀释浓度为起点,将样品往下倍比稀释,得样品的浓
度系列溶液,即2.500,1.250,0.625,0.300,0.150,0.075
mg?mL’.,记此系列溶液为供试品(NPC)系列.供试品阳性对
照(PPC)系列:将样品稀释成与上述NPC系列相同浓度系列,
但每一浓度都含有2内毒素.采用=0.25EU?mL的鲎试
剂分别与NPC和PPC2个系列的样品反应(37?,60rain).结
果表明:浓度较大时样品存在干扰,但浓度?0.625mg?mL.
时,不干扰实验进行.
2.3干扰实验分别用样品浓度为0.625mg?mL溶液(t)和
细菌内毒素检查用水(s)作溶剂,将细菌内毒素工作标准品稀
释成2.00,1.00,0.50,0.25的稀释液,与=0.25EU?mL
的鲎试剂反应.结果见表1.结果表明:0.50h<<2.00h,
符合《中华人民共和国药典~2ooo年版对细菌内毒素检查有效
2.2.1细菌内毒素限值()的确定《美国药典》规定=0.4性的规定.
表1细菌内毒素干扰实验结果
注:”++++”表示4管均阳性.’.一一一一”表示4管均阴性;”++一一”表示2管阳性2管阴性...+一一一”表示】管阳性3管阴性
医药导报2005年10月第24卷第10期?949?
2.4供试品细菌内毒素检查维生素注射液的,值为每1
mg维生素中含内毒素的量应<0.4EU.取供试品,按《中华
人民共和国药典))2000年版附录细菌内毒素检查法检查.结果
表明,6批样品均符合规定.
3讨论
实验结果证实,维生素注射液在进行细菌内毒素检查时
【收稿日期]2005-03.16
[作者简历]陈晓宝(1975一),女,浙江温州人,药师,学士,主要
从事药学工作.电话:0577—88259112,E—mail:Cxb2004@126.corn.
存在干扰因素的影响,但浓度?0.625mg?mL.时没有影响,可
用细菌内毒素检查法检查内毒素的限量.维生素注射液的
细菌内毒素量应为每1mg维生素含内毒素的量应<0.4
EU.
[参考文献]
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[Z].北京:化学工
业出版社,2000.附录86—87.
[2]汪承松,聂俊军,张松,等.替硝唑氯化钠注射液中细菌内毒素
的测定[J].医药导报,2004,23(7):504.
高效液相色谱法测定
依诺沙星制剂中依诺沙星的含量
王珊,王雨来,涂岱云,沈佳特
(1.湖北省卫生学校药剂科,黄石435000;2.湖北省黄石市中心医院药剂科,435000;3.湖北省
药品检验所,武汉430064)
【摘要]目的建立依诺沙星制剂中依诺沙星含量的测定方法.方法采用高效液相色谱法(HPLC)法,
KromasilCI8色谱柱(200mm×4.6mill,7m);流动相:0.025mol?L磷酸(用三乙胺调节pH值至3.0)一甲醇一乙腈
(80:10:10),流速:1.0mL?min一;检测波长:269nm;进样量:20L.结果依诺沙星主峰与各杂质及降解产物峰
能有效分离,在2,20g?mL范围内线性关系良好(r=0.9998).依诺沙星片平均回收率100.0%,RSD=0.8%;依诺
沙星胶囊平均回收率98.5%,RSD=1.2%;依诺沙星滴眼液平均回收率99.1%,RSD=0.7%;依诺沙星软膏平均回收率
98.9%,RSD=0.9%.结论该方法专属性强,结果准确可靠,可用于各种依诺沙星制剂的含量测定.
[关键词]依诺沙星;高效液相色谱法;含量测定
[中图分类号]R978;R927.2[文献标识码]
依诺沙星抗菌谱广,血中和组织内浓度高,代谢稳定,体内
抗菌活性为诺氟沙星的2,9倍.《中华人民共和国药典))2000
年版…收载:原料的含量测定采用非水滴定法,有关物质采用
薄层色谱法;制剂的含量测定采用分光光度法(有吸收系数法,
对照品比较法),所用溶剂,检测波长也有不同.上述方法经
典,实用,但专属性较差.笔者采用高效液相色谱(HPLC)法测
定依诺沙星制剂中依诺沙星的含量,报道如下.
1仪器与试药
日本岛津高效液相色谱仪(LC-2010C).依诺沙星对照品
(中国药品生物制品检定所提供,批号:0453-9901,含量为
91.1%);依诺沙星(批号:030654,30703,030706);依诺沙星片
(0.1g,批号:02120101,03010103;0.2g,批号:03010101);依诺
沙星胶囊(0.2g,批号:020901,030601,030701);依诺沙星滴眼
液(批号:020102,020103,020104).上述样品均为武汉制药有
限公司提供.依诺沙星软膏(武汉马应龙药业集团股份有限公
司提供,批号:030401,030402,030403);甲醇,乙腈为色谱纯;磷
酸,三乙胺为
纯.
[收稿日期】2004-12-03
[作者简介]王珊(1964
从事药剂学教学工作.
[收稿日期]2005-0l一10
),女,湖北宜昌人,主管药师,学士
A[文章编号]11904-0781(2005)10-0949-02
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱Kromasilc(200mill×4.6mrn,7
m);柱温:室温;流动相.-0.025mol?L磷酸(用三乙胺调节
pH值至3.0)一甲醇一乙腈(80:10:10);流速:1.0
mL?min一;检测波长:269nm;进样量:20.按外标法计算.
2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备精密称取依诺沙星对照品25mg,
置lO0mL容量瓶中,加0.1mol?L盐酸溶液约20mL使溶解,
用流动相稀释至刻度,摇匀;精密量取2mL,置50mL容量瓶
中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得.
2.2.2依诺沙星溶液的制备方法同对照品溶液的制备.
2.2.3供试品溶液(依诺沙星片)的制备取10片,精密称
定,研细,精密称取适量(约相当于依诺沙星25mg),置100mL
容量瓶中,加0.1mol?L盐酸溶液约20mL使溶解,并用流动
相稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2mL,置50mL容
量瓶中,用流动相稀释至刻度,即得.
22.4供试品溶液(依诺沙星胶囊)的制备取装量差异项下
的内容物,混匀,研细,照依诺沙星片溶液的方法制备.
2.2.5供试品溶液(依诺沙星滴眼液)的制备精密量取依诺
沙星滴眼液适量,加流动相稀释成每1mL中约含依诺沙星10