【doc】 薄层扫描法测定气滞胃痛颗粒中延胡索乙素含量

【doc】 薄层扫描法测定气滞胃痛颗粒中延胡索乙素含量 薄层扫描法测定气滞胃痛颗粒中延胡索乙 素含量 辽宁中医杂志2005年第32卷第11期 薄层扫描法测定气滞胃痛颗粒中延胡索乙素含量 王绍忠 (沈阳市沈河区人民医院,辽宁沈阳110011) ‘ 1191? 摘要:目的:用薄层扫描法测定气滞胃痛颗粒剂延胡索乙素的含量.方法:样品经硅胶G吸附后,用甲醇等溶剂提 取处理,展开后,于M=430nm,=550nm处扫描.结果:本法结果稳定,准确,重现性好.平均回收率为99.16%,RSD为 1.43%.结论:可为延胡索乙素的含量测定提供参考. 关键词:薄层扫描;延胡索乙素;气滞胃痛 中图分类号:R284,1文献标识码:BR~:lOOO一1719(2005)11—1191—02 气滞胃痛颗粒为治疗胃痛病非处方药,由柴胡,延胡索,枳 壳,香附,白芍,甘草等六味中药组成.临床用于治疗肝郁气滞, 胸痞胀满,胃脘疼痛.其中延胡索中所含延胡索乙素,用薄层扫 描法测定含量已有报道111.参考文献方法,经反复实验,确定了在 气滞胃痛颗粒中用双波长反射法锯齿扫描延胡索乙素的含量. 操作简单易行,测定结果准确,可靠,可用于该制剂的质量控制. 1仪器与材料 cs一93O薄层扫描仪(日本岛津);定量毛细管(U.S.A. QrummondScientificCo.)硅胶G(青岛海洋化工厂).延胡索乙 素对照品(批号07260605,中国药品生物制品检定所提供.供 含量测定用,使用前减压干燥至恒重),气滞胃痛颗粒(批号 021211,辽宁华源本溪三药有限公司提供),试药均为分析纯. 2方法与结果 2.1薄层色谱条件硅胶G薄层板,厚度O.2.3mm;展开剂: 正己烷一氯仿一甲醇(1O:6:1)需进行予饱和;显色剂:以碘蒸气熏 至斑点显色清晰,放置30min在空气中挥尽层板上吸附的碘, 扫描测定. 2.2薄层扫描条件取延胡索乙素对照品溶液,点样展开,在 390,-q00nm波长范围内扫描,根据吸收曲线选择测定波长s= 430nm,参比波长Xr=550nm,反射法锯齿扫描,狭缝1.2× 1.2mm,S)(=3. 2.3供试品溶液及对照品溶液的制备取气滞胃痛颗粒研成 细粉,精密称取10g,加-乙醇50mL,超声处理30min,滤过,滤渣 及滤器用乙醇洗涤2次(每次1OraL),滤过,合并滤液,蒸干,残 渣加水lOmL溶解,加浓氨试液调pH10”~11,加乙醚提取3次 (2Oral,2Oral,lOmL),合并乙醚提取液,蒸干,残渣加适量乙醇 使溶解,定量转移至5mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,作为供试 品溶液;精密称取延胡索乙素对照品,用乙醇配制成lmL含 O.2mg的溶液(经标定为O.1942mg/mL),作为对照品溶液. 2.4标准曲线的绘制精密吸取延胡索乙素对照品溶液 (0.1942mg/mL1,23,4,5,分别点于同一硅胶G薄层板上, 按上述条件展开,显色,遮光晾干,照薄层色谱法日(《中国药典》 2000年版一部附录?13)进行扫描,波长=430rim.= 550nm,测量各斑点的峰面积,以峰面积积分值为纵坐标.延胡 索乙素的浓度(g)为横坐标计算,绘制标准曲线.进行线性回 归,得回归方程A=2610.608—80510.07C(r=O.9991).延胡索乙 素点样量在0.1942”0.9710g范围内线性关系良好. 2.5空白对照试验按处方比例及,制备缺延胡索的空白 对照颗粒,按”2.3”供试品溶液制备项下方法制备空白对照溶 液,依上述条件展开,显色,扫描.结果明,空白对照溶液在延 收稿1~:2005—06—15 作者简介:王绍忠(1951一),男,辽宁沈阳人,副主任中药师,主要从事中 药制剂,中药调剂工作. 胡索乙素位置上无吸收,处方中其他组分对本测定无干扰. 2.6稳定性试验取供试品溶液5IxL点于薄层板依上述条件 展开,显色,每隔1h扫描1次,斑点显色后在5h内稳定.峰面 积的RSD=0.99%. 2.7精密度试验精密吸取同一对照品溶液5点于同一硅 胶G板上展开,测定峰面积积分值,RSD=I.70%.再精密吸取 对照品溶液5,5份分别点于五块硅胶G板上,依上述条件 展开,依次测得峰面值,峰面积积分值RSD=0.75%. 2.8重复性试验取同一批样品(021211)5份,按”2.3”项下方 法制备供试品溶液,依上述条件展开,显色,扫描测定,结果 RSD=I.62%,本法重现性尚可. 2.9回收率试验取已知含量的样品5份,分别加入延胡索乙 素对照品适量,依法制备供试品溶液并依”2.10样品含量测定” 项下方法测定含量,计算回收率,结果平均回收率为97.6%, RSD=I.4%(n=5). 2.10样品含量测定采用外标两点法,精密吸取不同批号的 供试品溶液4与6IxL,对照品溶液4IxL与6IxL,分别交叉点 于同一硅胶G薄层板上,按上述薄层扫描条件测定,外标两点 法计算延胡索乙素的含量,测定6批样品结果,见表1. 表1样品的含量测定结果 3讨论 本制剂为复方制剂,成分较多,需经乙醇提取后再用乙醚 纯化,减小干扰,测定结果可靠. ,延胡索乙素与碘反应生成一种稳定 的化合物,与以往碘蒸气显色不同,为一种不可逆的化合反应,这 种化合物在碘挥尽后仍然稳定存在,对其在可见光区与紫外光区 的光谱扫描结果均有吸收,但紫外光区有杂质干扰,不能得到正确 的峰值,为消除干扰,选择了可见光区扫描测定,效果满意. 参考文献: [1]宋敏.元胡生物碱的高效薄层层析定量研究[J].药物分析, 1985,13(5):139 [2]王义海,周长征.氧化铝薄层扫描法对胃特灵片中延胡索乙素的 含量测定.药物分析杂志,1990,10(4):239 DetermlnafionofTetrahydropalmatinein QizhiweitongGranulesbyTLCScanning WANGShao—zhong (ShenyangPeople’sHospitalofShenheDistrict.Shenyang ? 1192?辽宁中医杂志2005年第32卷第11期 双波长薄层扫描法测定伤湿止痛片中蛇床子素含量 王浩.陈翠英 (辽宁中医学院,辽宁沈阳110032) 摘要:应用双波长薄层扫描法测定伤湿止痛片中蛇床子素含量,平均回收率98.2%,R.SD为1,70%.结果:方法重现 性良好,结果准确可靠. 关键词:伤湿止痛片;蛇床子素;薄层扫描法 , 中图分类号:P,.284.1文献标识码:B文章编号:1000—1719(2005)11—1192—01 本制剂由独活,红花,牛膝等药味经提取加工制成,具有疏 风活络,消肿止痛之功效.为控制其质量,本制剂采用双波长扫 描法测定独活中蛇床子素含量,经方法学考察,方法的专属性, 精密度,稳定性,重复性,回收率试验均符合有关规定,为该制 剂分析,提供了可行的控制方法. 1仪器与试剂 仪器:岛津cs-一930薄层扫描仪.试剂:硅胶G蚰由青岛海 洋化工集团生产,所用试剂均为分析纯. 蛇床子素对照品购自中国药品生物制品检定所,样品市售. 2扫描条件 薄层板为硅胶G板,厚0.Smm,自然晾干,在105?烘约 40min.展开剂为苯一醋酸乙酯(15:2),紫外灯(365nm)定位. 扫描条件:s=322nm,R=370nm,SX=3,反射式锯齿扫描,灵敏 度中度,AY=0.2mm. 3试验方法与结果 3.1线性范围考察精密称取蛇床子素对照品10.3ling,.置 50mL量瓶中,制成每lmL含0.2062mg的对照品溶液,分别吸取 2,0,4.0,6.0,8.0,A0.0L,点样于同一硅胶G薄层板E,按前述色谱条 件,展开,扫描,测定,测定结果回归处理.回归方程为: Y=10024.1X+1023r=0.997,对照品点样量在0.4,2.1g范围内,线 性关系良好. 3.2供试品溶液制备方法考察根据蛇床子素的化学性质,本 试验经参考有关文献,采用乙醇为提取溶剂,对不同提取方法 加以考察.考察结果见表1. 表1不同提取方法考察结果 测定结果提示:超声处理20min,供试品中蛇床子素已基本 提取完全,根据本制剂为复方制剂,干扰组分较多的特点,采用 萃取法,拟用方法为:取本品10片,研细,取粉末2.5g,精密称 定,加乙醇40mL,超声处理20min,滤过,蒸干,残渣加水10mL 溶解加乙醚30mL萃取2次,乙醚液挥干,残渣加无水乙醇溶 解,定容至10mL量瓶中,作为供试品溶液.另取蛇床子素对照 品,加无水乙醇制成每lmL含0.2mg的溶液.分别吸取供试液 5L,对照品溶液3L,6L,按薄层色谱法(中国药典2000年 版一部附录?B)试验,点样于同一硅胶G薄层板上,以苯一醋 酸乙酯(15:2)为展开剂,展开,取出,晾干,紫外灯(365nm)下 定位,置薄层扫描仪上,在s=322nm,n=370nm下测定色谱 峰面积,计算. 3,3精密度试验考察精密吸取供试液各5L,分别点样于 同一硅胶G薄层板上,以前述色谱条件展开,取出,晾干,紫外 灯(365nm)下定位,置薄层扫描仪上,在s=265nm,R=370nm 下测定色谱峰面积,测定结果为:24789,24205,24007,24960, 24488,RSD为1.72%,符合有关规定. 3.4稳定性试验考察精密吸取供试品溶液5L,点样于硅胶 G板上,以前述色谱条件,展开,取出,晾干,定位,在薄层扫描仪上, 间隔0,0.5,1.0,1.5,2.Oh测定色谱峰面积,测定结果为 24277,24134,24327,24002,24665,RSD为1.87%.稳定性测定结 果提示,供试液制备后2h内点样,测定,蛇床子素化学性质稳定. 3,5重复性试验考察取同一批号样品各2.5g,精密称定,按已 确立的方法测定,测定结果(n=5)为:平均每片含蛇床子素为 0.37mg. 3.6回收率试验考察取已知准确含量的样品1.2g,精密称 定,精密加入蛇床子素对照品溶液(0.35mg/mL)5.0mL,按已拟 定的方法测定,测定结果为:平均回收率98.2%(n=5),符合有关 规定. 3.7样品含量测定结果取不同批号的样品2.5g,按已确立的 方法测定,测定结果,见表2. 表2样品含量测定结果 批-__一 1 2 3 O.39 l 0.36 O.46 4讨论 根据本制剂为复方制剂,干扰组分较多的特点,采用萃取法 净化,去除了干扰组分,供试品色谱中薄层斑点清晰,薄层背景 较小. 本试验先后采用正己烷一醋酸乙酯(2:1),苯一醋酸乙酯 (15:2)为展开剂,试验结果提示,在第二种展开剂下,供试液 中蛇床子素斑点圆整,与相邻组分分离度良好,故确立采用系 统II为展开剂. 110011,Liaoning,China) Abstract:Objective:ThecontentofQizhiweitonggranules wasdeterminedbyTLCScanning.Methods~Thesaplewas absorbedbKieselguhrandextractedwithethanolandtheother 收稿日期:2005—07—14 作者简介:王浩(1961一),男,河北唐山人,实验师,主要从事中药质量 分 析研究. solventSOon,Thespotswasscannedatks=430nm,R=550nm. Results:Thismethodisreliable,theresultsarestablewithod reproducibility.Theaveragerecoverywas99.16%andRSDwas 1.43%.Conclua瑚:ThdsmelthLodcanprovidereliableindicesfor thecontentdeterminationofTetrahydropalmatinepreparations. Keywords:TLCscanning;Tetrahydropalmafine;Qizhiweit- ong