孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程[1]

孕妇母体IgG抗体效价操作   【原理】 新生儿溶血病HDN发生的主要原因在于母子血型不合，血型系统最主要的类型为ABO血型系统，本实验采用微柱凝胶检测孕妇血清中的抗A（B）IgG抗体效价。 【试剂】 6%牛血清白蛋白；生理盐水；凝胶卡 【标本采集】 孕妇静脉血3毫升，肝素钠抗凝，孕妇爱人静脉血3毫升，肝素钠抗凝。将孕妇标本制作成血清标本，孕妇爱人标本制成0.5%红细胞标本（用生理盐水洗涤后配制）。  【操作步骤】 1． 取孕妇血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白，37度水浴温育30～60分钟； 2． 将血清倍比稀释成9管，依次为1：4、8、16、32、64、128、512、1024、2048管； 3． 将卡作好标记，在所有孔中加入经处理好的孕妇血清标本50ul； 4． 然后在所有孔中加入50ul的孕妇爱人0.5%红细胞标本； 5． 37度孵育15分钟（专用孵育箱）； 6． 专用离心机离心5分钟；900rpm2分钟，1500rpm3分钟； 7． 取出判定结果； 【结果判定】 阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶面或凝胶中； 阴性结果：红细胞完全沉降到胶底部，在凝胶管底部形成红细胞扣。 【结果】 产生1+阳性凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。 【注意事项】 1． 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应，尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本试验。 2． 血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。 3． 如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所臻溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。 4． 本凝胶卡价格不菲，成本较高，请您节约使用。 【临床意义】 有人观察1632例孕妇血清中IgG抗A（B）≥1：64者249例；ABO-HDN发生率随IgG抗A（B）效价升高而上升；HDN与妊娠史的频率有关，随着年龄上升，孕妇个体IgG抗A（B）抗体效价也随之上升。夫妇间ABO血型不合者应及时检查产前血型抗体水平，用于预防不良妊娠的发生；IgG抗A（B）效价的高低与HDN的发病率成正比；孕妇血清IgG抗A（B）效价≥1：64需定期检测抗体效价水平及时用药降低抗体效价，以预防新生儿溶血病的发生。