45X-46XY,Yqh-嵌合体伴Y染色体AZFbc区缺失1例.doc

45X-46XY,Yqh-嵌合体伴Y染色体AZFbc区缺失1例.doc 45X/46XY,Yqh-嵌合体伴Y染色体AZFbc区缺失1例 作者:郑毅春 张畅斌 王游声 周庆葵 【关键词】 45X/46XY Yqh-嵌合体 Y染色体 AZFbc区缺失 临床资料 患者，男，28岁，因婚后未避孕未育3年而就诊，查体:第二性征正常，身高173 cm，生殖器官发育正常，睾丸大小形态正常，附睾头、体、尾未及明显增粗增厚，精索静脉未见曲张;3次精液常规及沉渣图片镜检均未见精子及生精细胞，内分泌6项(泌乳素、促卵泡生成素、促黄体生成素、孕酮、雌二醇和睾酮)检查结果均正常。患者父母非近亲结婚，育2子1女，患者在兄弟中排行第二，其兄及妹妹均已婚已育，小孩均健康。 方法 1.细胞遗传学和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)检测:按常规技术行外周血淋巴细胞染色体G 显带和C 显带分析，G 显带分析100个淋巴细胞, C 显带分析10个淋巴细胞。用X染色体和Y染色体着丝粒探针(CEP X with spectrum green, CEP Y with spectrum orange,vysis,downers grove,IL;item no.32 111051)进行FISH检测，分析10个中期分裂相和50个间期细胞。Olympus BX 51荧光显微镜采集信号，Cytovision 3.0(applied imaging)软件分析图像。 2.PCR STSs检测AZF区域的缺失:从外周血中提取基因组DNA，用多重PCR检测Yq11.2上的无精子因子(azoospermia factor,AZF),选择6个STS位点，分别是位于AZFa的sY86和sY84，位于AZFb的sY127和sY134，位于AZFc的sY254和sY255。SRY和ZFX/ZFY作为试验的内对照同时进行扩增。除ZFX/ZFY引物外，其他引物和扩增条件按照EAA/EMQN试验指南进行[1]。ZFX/ZFY引物为正向: 5′ ACTGCCCGCCTGTCACTGC 3,反向: 5′ ACGTCGGTAGTCAGAGGAT 3,PCR产物为690 bp。 结果 患者外周血淋巴细胞染色体核型为45,X/46,XY,Yqh ，比例为40?60。C 显带示Y染色体长臂的异染色质部分丢失。多重PCR显示AZFa区域的sY86和sY84位点存在，但AZFb和AZFc区域的位点sY127、sY134、sY254和sY255均丢失。 讨论 精子发生(sperm alogenesis)是指生精上皮的干细胞发生到成熟精子的一系列变化过程，其中任何一个环节异常均可导致男性不 育。近年来越来越多的证据明，男性不育尤其是无精症或少精症的发生与遗传因素有关，与染色体异常有关。在男性不育患者中染色体异常发生率为2 %,5 %，在无精症中更高达15 %[2]。 图1 染色体核型46，XY图2 染色体核型45，X图3 多重PCR分析Y染色体缺失的区域近年来的研究表明，控制精子生成的基因主要位于Y染色体的q11上，称为AZF,AZF由4个互不重叠的AZFa、AZFb、AZFc和AZFd区域组成[3]。大约15 %无精症患者和5 %,10 %少精症患者有Y染色体的微缺失[4]。目前认为AZF4个功能区在男性生殖细胞发育的不同时期起着重要作用，不同区域的缺失可有不同的临床表现[5]，其中AZFa区缺失，可导致青春期精子发生阻滞，与严重少精有关;若AZFb区缺失，减数分裂前的生精上皮细胞正常，而减数分裂后细胞缺乏，与无精子、严重少精相关。AZFc区域缺失，睾丸组织学表现为多样化，有与“唯支持综合征”相似的表现，也可以有精子发生停滞于不同阶段生精上皮细胞的表现，出现无精子症和少精子症的不同临床表现。 本例患者染色核型为45，X/46，XY，为嵌合体，虽然性染色体嵌合比例不同，也可能产生不同数量的精子,但本例患者还有Y染色体AZFb、c区域微缺失，最终导致无精子症，造成不育。因此，对于男性不育的诊断，除了进行常规的临床检查、实验室检查及细胞遗传学检查外，还需要进行Y染色体的微缺失检查，以进一步明确诊断。 【