氢溴酸右美沙芬片人体药代动力学及生物等效性研究 (1)

氢溴酸右美沙芬片人体药代动力学及生物等效性研究 (1) 氢溴酸右美沙芬片人体药代动力学及生物等效性研究 (1) #1282# 四川医学2009年8月第30卷(第8期) SichuanMedicalJournal,2009,Vol.30,No.8论著 氢溴酸右美沙芬片人体药代动力学及生物等效性研究 杨晓燕,田晓娟,刘泽源112 (1.北京市药品审评中心,北京100053;2.军事医学科学院附属307医院,北京100000) =摘要> 目的 在中国健康成年男性志愿者中研究氢溴酸右美沙芬片受试制剂与参比制剂的生物等效性和相对生物利用度。 本试验采用双周期自身随机交叉试验设计。20名受试者分两组,先后口服受试和参比制剂60mg,两次用药间隔1周。采用HPLC-MS-MS测定。结果 受试制剂及参比制剂右美沙芬Cmax为(5132?4131)Lg/L和(5110?3193)Lg/L;Tmax为(1190?0164)h和(2135?0184)h;t1/2(ke)为(5127?1123)h和(6130?1191)h;AUC0-tn为(4116624?4511097)Lg#h/L和(4312911?4817679)Lg#h/L,AUC0-]为(4417446?5013424)Lg#h/L和(4617772?5315734)Lg#h/L;相对生物利用度F0-tn、F0-]分别为(98100?17131)%、(96120?17169)%。对药动学参数AUC、Cmax、Tmax进行单因素方差分析及双单侧t检验,结果明两制剂在处方与周期间差异无统计学意义;整个试验过程中,各项检查未见异常,无不良事件发生。结论 受试制剂和参比制剂具有生物等效性,且在试验剂量下——————————————————————————————————————————————— 具有良好的安全性。 =关键词> 氢溴酸右美沙芬片;生物等效性研究;HPLC-MS-MS =中图分类号> R96911 =文献标识码> A =文章编号> 1004-0501(2009)08-1282-03 StudyonthepharmacokineticsandbioequivalenceofdextromethorphantabletinChinesehealthyvolunteers.YANGXiao-yan1,TIANXiao-juan1,LIUZe-yuan2.1.BeijingDrugAdministrationCenterforDrugEvaluation,Beijing100053;2.Affilia-ted307Hospital,AcademyofMilitaryMedicalSciences,Beijing100000,China =Abstract> Objective StudyonthepharmacokineticsandbioequivalenceofdextromethorphaninChinesehealthyvo-lunteers.Methods Inarandomizedtwoperiodcrossoverstudy,20healthymalevolunteersreceivedsingle60mgdoseoftestorreferencedextromethorphantablet.TheserumconcentrationsweredetectedbyHPLC-MS-MSassaymethod.Results Themainpharmacokineticparamtersofthetwopreparationswere:Cmax(5132?4131)orand(5110?3193)Lg/L;Tmax(1190?0164)hand(2135?0184)h;t1/2(ke)(5127?1123)hand(6130?1191)h;AUC0-tn(4116624?4511097)Lg#h/Land(4312911?4817679)Lg#h/L,AUC0-](4417446?5013424)Lg#h/Land(4617772?5315734)Lg#h/L;F0-tn(98100?17131)%、 F0-](96120?17169)%.Datadisposedby3p97softwaredemonstratedthatthe——————————————————————————————————————————————— rearenosignificantdifferencesbetweentwopreparations.Allthelabexamina tionbeforeandafterdrugadministrationisnorma.lConclusion Thetwopreparationsarebio-equivalent;thetestdextromethorphanissafefo rpeopleatdoseof60mg. =Keywords> dextromethorphantablet;pharmacokineticsandbioequivalence;HPLC-MS- MS 氢溴酸右美沙芬,又称右甲吗喃,为中枢性镇咳 药,镇咳作用强度与可待因相等或稍强,无镇痛和催眠 作用,长期服用无耐药性和成瘾性,适用于因感冒、哮喘和肺结核 等引起的咳嗽。本试验旨在研究氢溴酸右美沙芬片受试与参比制剂的 生物等效性和相对生物利用度,为临床安全、合理用药提供理论依据。 教育和健康教育,通过政府行为和多种渠道,最大限度 的普及群众性的院前急救知识和急救技术,才能最大 限度的降低院前病死率和致残率。 参考文献: [1] 田育红,李奇林,黄力.73875例院前急救病例特点的分析[J].世 界急危重病医学,2006,3(4):1368~1369 [2] 邹强.呼吸心脏骤停1683例院前急救死亡分析[J].四川医学, 2004,25(3):307~308[3] 陈云兵.高原地区院前急救的流行病学研 究[J].四川医学,2009,30(1):32~34[4] 梁实,江捍平,贾清旺,等.深圳市 2002年度院前死亡1122例分析[J].中华急诊医学杂 ——————————————————————————————————————————————— 志,2004,13(11):733~736[5] 蒋键,陈尔真.652例急诊抢救室死亡患者分析[J].中国急救医学,2001,4(21):230~231[6] 瞿惠春.874例院外猝死临床分析与急救干预[J].中国急救医学,2001,1(21):14~16[7] 刘德红.53例心源性猝死的临床分析[J].世界急危重病医 学,2005,2(4):787~790:-05) 四川医学2009年8月第30卷(第8期) SichuanMedicalJournal,2009,Vol.30,No.8 #1283# 1 资料与方法 111 试验对象:试验前7d内,志愿者接受全面体检,心电图、胸透、血、尿常规、血生化、HBsAg、HIV检查合格者入选。最终确定男性健康受试者20名。试验后主要临床检验指标亦正常。由于该药可致眼压升高,故特别将青光眼列入排除。 112 试验设计:本试验采用双周期随机自身交叉试验设计。将20名受试者随机分两组,每组每周期分别服用受试或参比制剂。受试者于禁食不禁水10h后空腹口服受试或参比制剂60mg,2h后可自由饮水,4h后进统一标准餐。两次用药净化期为1周。 受试者分别于给药前及给药后015、1、115、215、3、4、6、8、10、12、16、24h采集上肢静脉血4m,l肝素抗凝。3000r/min离心10min,分离血浆,-20e保存备用。 113 试验药物及剂量:试验制剂与参比制剂均为氢溴酸右美沙芬片剂,规格15mg/片。据国内外临床研究资料及,成人用量为——————————————————————————————————————————————— 15mg/次,3~4次/d。本试验采用一次性空腹口服60mg。114 生物样本的测定 [1,2] 芬和曲马多的DP电压为55和29V;碰撞气(N2)压力:中等;用于右美沙芬和内标曲马多定量分析的离子反应为m/z27213y17111、m/z26411y5810。11413 分析方法确证 1141311 特异性:专属性试验色谱图,见图1。结果表明血浆内源性物质不干扰测定。 图1 血浆中右美沙芬和内标曲马多的典型MRM色谱图A:空白血浆(?右美沙芬,ò内标曲马多);B:空白血浆+右美沙芬+内标;C:受试者810h血样 11411 仪器、试剂:QTRAPTM四极杆线性离子阱质谱仪,配有离子喷雾离子化源及Analyst1132数据处理软件,美国AppliedBiosystem公司;Agilent1100高效液相色谱系统;色谱柱ZorbaxExtend-C18柱,5Lm粒径,150@416mmID,美国Agilent公司。氢溴酸右美沙芬对照品、曲马多对照品(批号:0201-9901、171242-200302),购自中国药品生物制品检定所。甲醇为色谱纯;其它试剂为分析纯。 11412 血浆样品分析方法:1血浆样品的处理:取200Ll血浆,加50Ll内标溶液,100Ll甲醇、100Ll112M碳酸钠溶液,摇匀,加3ml提取试剂(正己烷B二氯甲烷B异丙醇=300B150B15,v/v/v),涡流1min,振荡10min,3500r/min离心5min,取上清液于40e下氮气吹干,残余物加150L流动相溶解,吸取20Ll进行LC/MS/MS分析。o色谱条件:流动相:——————————————————————————————————————————————— 甲醇:10mM醋酸铵溶液(含015%甲酸)=85B15,v/v;流速016ml/min;柱温40e。?质谱条件:离子喷雾离子化源;离子喷射电压1500V,温度400e;源内气体1(GS1,N2)压力65p.s.,i源内气体2(GS2,N2)压力65p.s.;i气帘气体(N2)压力20p.s.;i正离子方式检 测)1141312 线型:取空白血浆200L,l加右美沙芬标准系列溶液100L,l配成相当于0105、011、0125、1、215、5和10Lg/L的血浆样品,每点为三样本,按/血浆样品的处理0项下操作,取20Ll进行LC/MS/MS分析;以待测物浓度为横坐标,待测物与内标物的峰面积比值为纵坐标,用加权(W=1/x)最小二乘法进行回归运算,求得直线回归方程Y=0148X+0100452,r=019995。线性范围0105~10Lg/L,定量下限0105Lg/L。 1141313 精密度与准确度:按/工作曲线的制备0项下操作,制备低、中、高3个浓度(011、1、8Lg/L)的质量控制样品,一浓度6样本,连测3d,根据当日标准曲线计算浓度及准确度、精密度。日内、日间变异为(1~7)%<15%,符合测定。 1141314 提取回收率:取空白血浆200L,l按/标准曲线0项下操作,制备低、中、高三浓度样品,每一浓度4样本,同时另取空白血浆200L,l按/血浆样品的分析方法0项下操作,上清液加入相应浓度的标准溶液 100Ll和内标溶液50L,l涡流混合,于40e下氮气吹lLl2 #1284# 四川医学2009年8月第30卷(第8期) SichuanMedicalJournal,2009,Vol.30,No.8 ——————————————————————————————————————————————— 进样的峰面积与未经提取直接进样的峰面积之比为提取回收率。3个浓度的提取回收率分别为79116%, 85123%和87192%。符合测定要求。1141315 溶液稳定性:QC样品经以下试验后测定浓度:反复3次-20e、冷冻、室温溶解;冰冻放置2个月;室温放置12h。结果显示测定值与添加值的相对偏差(RE%)均<15%,表明长期冷冻、反复冻融及室温放置12h不影响样品测定。2 结 果 211 血药浓度-时间曲线,见图2。 212 药代动力学参数:药代动力学参数的计算:以梯形面积法计算AUC0-tn,根据血药浓度-时间曲线末端 直线部分,以1nC对t进行回归,求得消除速率常数 ke;T1/2ke=01693/ke;Cmax、Tmax为实测 值,AUC0-]=AUC0-tn+Ctn/ke;CL/F=D/AUC0-](D:给药剂量);Vd/F=(CL/F/Ke)。见表1 。 图2 受试者口服受试制剂和参比制剂后血浆中 右美沙芬平均血药浓度-时间曲线 表1 受试者口服受试制剂或参比制剂后的平均药代动力学参数 Cmax(g/L) T meanSDRSD%R meanSDRSD% ——————————————————————————————————————————————— 513234130580186511013193277109 Tmax(h)11900164331722135018435194 Ke(1/h)0113840103362413201117501027523139 t1/2(ke)(h)51271123231256130119130127 AUC0-1(Lg#h/L)4116624451109710812743129114817679112165 AUC0-](Lg#h/L)4417446501342411215146177725315734114153 Vd/F(L)2717218291875110717733139574118182125122 CL/F(L/h)317933413184113184317805513348141111 注:T受试制剂,R参比制剂 213 生物利用度:F=试制剂后F0-17169)%。 t AUCT@DR @100%,单次口服受 AUCR@DT (98100?17131)%、F0-](96120? 综上所述,用3P97软件对两种制剂进行方差分析及双单侧t检验, 以及Tmax进行非参数检验,结果表明受试制剂与参比制剂生物等效。 3 讨 论 考虑到氢溴酸右美沙芬可致眼压升高,特别在试验设计时将青光 眼作为受试者入组排除标准之一,以减少不良反应的发生。此外,单因 素方差分析结果表明两制剂的药动学参数在处方与周期间差异无统 计学意义(P>0105);但个体差异较大,建议临床给药个体化。 ——————————————————————————————————————————————— 参考文献 [1] ThomasHEichhold,MikeQuijano,WilliamL,etal.Highlysensitive high-performanceliquidchromatographic-tandemmassspectrometricmethodfortheanalysisofdextromethorphaninhumanplasma[J].JournalofChromatographyB,1997,698(1):147~154 [2] ReneeDBolden,StevenHHokeII,ThomasHEichhold,etal.Sem-i automatedliquid-liquidback-extractionina96-wellformattodecreasesamplepreparationtimeforthedeteminationofdextromethorphananddextrorphaninhumanplasma[J].2002,772(1):1~10 (收稿日期:2009-03-15)JournalofChromatographyB, 214 生物等效性评价:两制剂的AUC0-t、AUC0-]及 Cmax经对数转换后进行方差分析,结果表明制剂间、周期间的差 异无统计学意义(P>0105),表明两制剂生物等效。但个体间差异显著。 受试制剂和参比制剂的AUC0-t、AUC0-]及Cmax经对数转换后进 行双向单侧t检验:AUC0-:tT1=417866、 T2=615438>T0105(18)=11734,90%置信区间在参比制剂的 90122%~103143%,在80%~125%范围内;AUC0-]:T1=411828、 T2=618513>T0105(18),90%置信区间88133%~101163%,在80%~125% 范围内;Cmax:T1=510543、T2=419298>T0105(18),90%的置信区间 88177%~113177%,在70%~143%范围内;Tmax:U计算 ——————————————————————————————————————————————— =114122<U(0105)=1196<U(0101)=2158。综上所述二者生物等效。215 不良事件:给药前后受试者血压、体温、呼吸、脉搏,及血生化、血、尿常规检查未见异常,表明试验药物 ———————————————————————————————————————————————