迷迭香提取物促进毛发生长的研究

迷迭香提取物促进毛发生长的研究 08049 迷迭香提取物促进毛发生长的研究 随着生活水平的提高，美容美发成为日常生活中不可或缺的一部分，染发、烫发给人们带来美丽同时，那些含有化学成分的烫发剂、染发剂、洁发剂也是造成脱发的隐患。 迷迭香(Rosmrlinus officinalis L.)别名艾菊，属唇形科亚灌木或多年生草本植物，原产地中海沿岸，曹魏时引入我国，是一种常见的园林观赏植 [1-4]物，叶带有茶香，味辛辣、微苦，常用于提取香料及药用。据资料记载，迷迭香可刺激毛发生长，常用可改善秃头、掉发现象。经文献检索，未见相关研究报道，因此，本课题将通过动物实验对迷迭香的生发功效进行验证，并进一步探讨其生发机理。 1 材料与方法 1.1材料 1.1.1实验动物:近交系C57BL/6小鼠，雌性，6,8周龄，体重15,20g，共50只。由中科院上海实验动物种子供应中心提供。选择皮色粉红、毛发处于休止期的小鼠。 1.1.2迷迭香:购于花鸟市场。 1.2方法 1.2.1迷迭香有效成分的提取:取迷迭香叶200g，以75%乙醇浸提3天，用旋转蒸发仪浓缩成浸膏，蒸发出的乙醇再次对迷迭香进行浸提并浓缩成浸膏，等量混合，用75%乙醇稀释成相应浓度溶液，4?储存备用。 1.2.2动物模型的建立:拔毛法诱导生长期毛囊。将松香、石蜡按1:1混合加 [5]热熔化后涂于小鼠背部，凝固变硬后揭去，拔除毛发。 0只小鼠随机分为5组，每组10只，分别为: 1.2.3动物分组:5 ?75%乙醇阴性对照组; ?10g/L组; ?40g/L组; ?80g/L组; 1 ?生发汀阳性对照组。 1.2.4给药:脱毛后即刻开始用药，直接涂抹给药，每天涂抹1次，每次给药0.2ml，共14d。 1.2.5观察指标: ?小鼠皮肤及毛发变化:每天观察记录每只小鼠背部去毛区皮肤颜色从涂药到开始变黑、毛发长出皮肤表面的时间，并定期拍照。以皮肤从用药到开始变黑作为毛发从休止期进入生长期的时间，从开始变黑到毛发长出皮肤表面的时间作为毛发从进入生长期到长出皮表的时间。 [6]?毛发长度评分及测量: 造模施药后第十天，开始对每只小鼠脱毛区新毛生长状况评分1次，连续观察14d。评分标准:无毛生长，0分;浅毛生长满脱毛区，1分;新生毛长度及密度为未脱毛区的一半，2分;新毛生长与未脱毛区无差别，3分。施药后第14d，用游标卡尺量测量各组小鼠新生毛发长度。 ?于用药开始第3天，第14天，从各组小鼠背部相同部位取材，10%甲醛固定、脱水、石蜡包埋、切片、苏木精—伊红染色，光镜下观察小鼠皮肤毛囊的组织学变化。 2 结果 2.1小鼠皮肤及毛发变化 2.1.1小鼠背部去毛区皮肤颜色开始变黑的时间 刚刚对小鼠背部进行脱毛后，脱毛区的皮肤光滑，呈粉红色。10g/L实验组小鼠背部去毛区皮肤颜色最早由粉红色变为黑色，需要4.78天，说明10g/L实验组小鼠的毛发最先从休止期进入生长期。各实验组小鼠背部去毛区皮肤颜色变黑的具体时间见表1。 表1 小鼠背部去毛区皮肤变黑的时间(d) 分组 75%乙醇 10g/L 40g/L 80g/L 生发酊 5 3 3 4 3 1 5 3 3 6 3 2 5 4 3 6 3 3 2 5 4 6 6 6 4 5 5 6 6 6 5 5 5 6 6 6 6 5 5 6 6 6 7 7 7 6 6 7 8 7 7 7 6 7 9 5.44?0.88 4.78?1.48 5.11?1.62 5.78?0.67 5.22?1.71 均值x?s 根据表1制作图表1，将各个实验组按照小鼠去毛区皮肤颜色变黑所需时间进行排序:10g/L(4.78d)<40g/L(5.11d)<生发酊(5.22d) < 75%乙醇(5.44d)< 80g/L(5.78d)。由此可见10g/L迷迭香实验组毛发从休止期进入生长期的时间，较生发酊阳性对照组和75%乙醇阴性对照组分别提前0.44d和0.66d，效果较为显著。不同浓度的迷迭香实验组以低浓度组10g/L效果最好，其次是40g/L中浓度组，80g/L高浓度组效果最差。 8 7 6 55.78 5.44 45.11 5.22 4.78 时间 3 2 1 0 75%乙醇组 分组 10g/L75%乙醇组10g/L40g/L80g/L生发酊 40g/L 图表1:小鼠背部去毛区皮肤变黑的时间 80g/L 生发酊 3 2.1.2小鼠背部去毛区毛发长出皮表的时间 各实验组小鼠背部去毛区毛发长出皮肤表面的时间详见表2，根据表2制作图表2。将各个实验组按照毛发长出皮肤表面的时间进行排序:10g/L(8.5d)<生发酊(9.25d)<40g/L (9.88d)< 80g/L(10.25d)<75%乙醇(10.5d)，对比发现，10g/L迷迭香实验组毛发最先长出皮肤表面，较生发酊阳性对照组和75%乙醇阴性对照组分别提前0.75d和2d。不同浓度的迷迭香实验组以低浓度组10g/L效果最好，其次是40g/L中浓度组，80g/L高浓度组效果最差。 表2毛发长出皮表的时间(d) 分组n 75%乙醇 10g/L 40g/L 80g/L 生发酊 10 6 8 8 7 1 10 8 8 10 8 2 10 8 9 10 9 3 10 8 10 10 9 4 11 9 11 10 9 5 11 9 11 11 9 6 11 10 11 11 11 7 11 10 11 12 12 8 均值x?s 10.50?0.53 8.50?1.30 9.88?1.36 10.25?1.16 9.25?1.58 12 10 8 6时间 4 2 0 75%乙醇组 分组 10g/L75%乙醇组10g/L40g/L80g/L生发酊 40g/L 图表2:毛发长出皮肤表面的时间 80g/L 4 生发酊 2.2毛发长度评分及测量 2.2.1毛发长度评分 造模施药后第十天，开始对每只小鼠脱毛区新毛生长状况进行评分，分别测量旧毛长度和新生毛发长度，参照评分标准，具体评分如表3所示，根据表3制作图表3，观察可知:10g/L实验组小鼠评分整体最高，其次是10g/L实验组，且各组评分随时间增加而增长。 表3小鼠脱毛区新毛生长状况评分 造模后时间 75%乙醇 10g/L 40g/L 80g/L 生发酊 10天 0 4 3 0 0 11天 0 7 5 3 3 12天 6 10 7 5 6 13天 6 13 9 6 6 14天 9 17 13 9 9 造模后毛发评分 20 15 10评分 5 0 10天11天12天13天14天 时间(d) 75%乙醇组10g/L40g/L80g/L生发酊 图表3:各组小鼠脱毛区新毛生长状况评分 5 2.2.2毛发长度测量 造模施药后第14d，用游标卡尺量测量各组小鼠新生毛发长度和旧毛长度，如表4所示。根据表4制作图表4，可以发现，小鼠旧毛的平均长度为7.44mm，小鼠新生毛发以10g/L迷迭香实验组最长，均长为6.88mm，达旧毛长度的92.47%，说明10g/L迷迭香促进毛发生长效果显著;其次是40g/L迷迭香实验组，均长4.25mm，是旧毛长度的57.12%;75%乙醇的效果最差，为3.5mm，仅为旧毛长度的47.71%。 表4造模后14天小鼠新旧毛发的长度(mm) 新毛发长度 n 旧毛长度 75%乙醇 10g/L 40g/L 80g/L 生发酊 3.00 7.50 3.50 2.50 3.00 7.00 1 3.00 7.50 3.50 3.00 3.50 7.50 2 3.00 6.50 4.00 3.50 4.00 7.00 3 3.50 6.00 4.50 3.50 4.00 7.50 4 3.50 6.00 4.50 4.00 4.00 7.50 5 4.00 7.00 4.50 4.00 5.00 8.00 6 4.00 7.00 4.50 4.00 4.50 7.00 7 4.00 7.50 5.00 4.50 4.50 8.00 8 3.50 ?0.46 6.88 ?0.64 4.25?0.53 3.63 ?0.64 4.06 ?0.62 7.44 ?0.42 均值x?s 造模后14天小鼠新旧毛发的长度比较 7.44 旧毛长度 4.06 生发酊 3.63 80g/L 4.25 40g/L实验分组 10g/L6.88 3.50 75%乙醇 0.002.004.006.008.0010.00 毛发长度(mm) 75%乙醇10g/L40g/L80g/L生发酊旧毛长度 图表4:造模后14天小鼠新旧毛发长度比较 6 2.3组织切片结果 75,乙醇对照组 (左10X,右20X) 10g/l迷迭香组 (左10X,右20X) 组织切片结果显示:10g/l迷迭香组小鼠毛囊黑色素较对照组增多，提示其对小鼠毛囊黑色素的合成有促进作用。 3 讨论 3.1 10g/L迷迭香实验组小鼠背部去毛区皮肤颜色最早由粉红色变为黑色，说明其毛发最先从休止期进入生长期; 3.2 10g/L迷迭香实验组小鼠背部去毛区皮肤最先长出毛发; 3.3 对各实验组小鼠脱毛区新毛生长状况进行评分，10g/L实验组小鼠评分整体最高; 3.4 造模施药后第14d，10g/L迷迭香实验组新生毛发最长，均长为6.88mm，达 7 旧毛长度(均长为7.44mm)的92.47%，促进毛发生长效果显著; 3.5 对比分析高、中、低迷迭香浓度组的实验结果，可以发现10g/L低浓度组最先进入生长期并最先长出毛发，且新生毛发评分和长度有明显优势，其次是40g/L中浓度组，80g/L低浓度组效果最差。查阅资料发现，高浓度迷迭香对皮肤有刺激作用。这可能在一定程度上影响了毛发生长。 3.6 切片结果分析:组织切片结果显示:10g/l迷迭香组小鼠毛囊黑色素较对照 组增多，提示其对小鼠毛囊黑色素的合成有促进作用。 参考文献: [1]杜刚，杨建国，安正云. 迷迭香的栽培及开发利用[J].特种经济植物.2002，(10)，29~30. [2]刘士德、余玉雯、张建华等. 迷迭香抗氧化提取物的应用研究[J].2003，24(2)，95~99. [3]毕良武、赵振东、李冬梅等. 迷迭香抗氧化剂和精油综合提取技术研究(III)[J].2007，27(6)，8~12. [4]黄海英、黄绍华、沈玲霞. 天然抗氧化剂——迷迭香的研究现状与展望[J].2004，(5)，56~62. [5]赵玉磊，范卫新.中药黄芪、女贞子、人参促毛发生长的在体研究[J].临床皮肤科杂志，2003，32(6):321~322. [6]文献:陈勤.中药美容保健品的研究与开发[M].北京:中国医药科技出版社, 1991. 205-206. 8