广州市场活鸡盐酸克仑特罗残留调查

广州市场活鸡盐酸克仑特罗残留调查 ※分析检验2003,Vo1.24,No.8117 广州市场活鸡盐酸克仑特罗残留调查 李志勇1,王菊芳2,易敏英1,胡科峰1 (1.广州出入境检验检疫局,广州510623) (2.华南理工大学,广州510640) 摘要:建立并运用酶联免疫法直接测定家禽组织盐酸克仑特罗含量,调查了广州市场6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐 酸克仑特罗含量.结果表明:6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量为 155.27?81.17~322.O0?127.56ng/kg,符 合残留低限,平均回收率为94.30%,酶联免疫法可快速,准确测定家禽组织中盐酸克仑特罗含量. 关键词:酶联免疫法;盐酸克仑特罗;鸡肉;鸡肝 Abstract:TheELISAmethodfordirectdetermh~tionofremainedclenbuterolinpoultrytissuewasestabl ished.Furthermore, remainedclenbuterolconce~txafionin6kindsofchickenliverandchickenmeatpurchasedfromGuangz houmarketwasinvestigated. TheresultsshowedthatremainedclenbutemlconcentrationWO.A~155.27?81.17~322.O0?127.56n g/kg.bellowedthena- tionallimitedstandard.Theaveragerecoveryrateofremainedclenbuterolwas94.30%.TheELISAmeth odWasarapid,accu眦 methodfordeterminationofremainedclenbuterolinpoultrytissue. Keywords:ELISA;clenbuterolchickenmeat;chickenliver 中图分类号:TS201.6文献标识码:A文章编号:1002.6630(2003)o8.0ll7.o3 盐酸克仑特罗(Clenbutero1)属于B类兴奋剂,在临床上 主要用于防治人,畜支气管哮喘和痉挛,主要副作用为心 悸,头晕,手颤.若将该药品作为饲料添加剂,则有促进 生长,降低家禽脂肪,提高瘦肉率的效果,但由于其使用 剂量通常为治疗剂量的5,10倍,因此极有可能残留在动物 体内,给消费者带来严重危害[tl.1998年,香港报道有人 食用含盐酸克仑特罗的猪内脏发病死亡,另有市民食用含盐 酸克仑特罗的猪肺汤后出现中毒症状.目前,不少国家已 禁止使用盐酸克仑特罗作为饲料添加剂,在我国也列为禁用 药.我国香港特区政府已将输港肉品盐酸克仑特罗残留作为 必检项目. HPLC或GC.MS一直用于盐酸克仑特罗的检测,但其前 处理繁琐,费用昂贵,因此国内对动物盐酸克仑特罗残留检 测取样多采用动物尿样【2】,经HPLC或GC.MS测定后间接估 推出动物肉及肝脏的盐酸克仑特罗残留. 酶联免疫分析技术是基于抗原抗体特异性识别和结合反应 为基础的分析方法,具有特异性强,灵敏度高,分析容量大 及检测费用低,方便快速等优点,在食品残留监控上发挥 日益重要的作用.本研究采用酶联免疫法快速直接检测肉品及 肝脏中盐酸克仑特罗含量,调查测定了广州市售活鸡中盐酸克 仑特罗残留水平. 1材料与方法 1.1材料 从广州市场选取有代表性的6种活鸡:江西鸡,清远鸡, 本地鸡,信宜鸡,家鸡,竹丝鸡各6只,宰杀后分别取胸 肉,肝脏作为分析样品. 1.2酶联免疫测试试剂盒 采用德车R-Biopharm公司生产的RidascreenClenbuterol Fast试剂盒. 1.3样品前处理 5g粉碎的样品加入25ml50mmol/LHC1,混合振荡1.5h, 称取6g混合物,10~15?,4000g离心15min.取上清液加 入300lImol/LNaOH混合15rain,加入4ml500mmol/LpH3.0 KH2PO4缓冲液,简单混合后在4?保持至少1.5h或过夜.混 合液经10,15?,4000g离心15rain后用RIDACts层析柱纯 化,取20l进行酶联免疫分析. 1.4酶联免疫分析程序 从试剂盒中取出足够数量的分析条,加入100l抗体,室 温孵育15min.倒去孔中液体,用蒸馏水洗板3次,加入20l 的或处理好的样品,继续加入100l酶标记物,室温孵 育30min,倒去孔中液体,再用蒸馏水洗板3次.加入50l 基质和50l显色剂,混合并在室温暗处孵育15min.加入100 l终止液,混匀后在450nm处测定OD4so. 1.5标准曲线的制作及样品浓度的计算 所获得的标准和样品的OD4so平均值除以第一个标准(0标 准)的OD,so再乘以100即为该标准或样品的吸光度值(%).以 收稿日期:2002—12—31 作者简介:李志勇(1972一),男,工程师,博士,研究方向:食品微生物安全检测. 1182003,Vo1.24,No.8※分析检验 标准样品浓度的对数值(1ogl0)为横坐标,标准样品的吸光度值 为纵坐标制作标准曲线.样品中盐酸克仑特罗含量的计算以样 品的吸光度植在标准曲线中查找浓度的对数值,再换算成浓 度,乘以2.5,得到待测样品的盐酸克仑特罗浓度. 1.6数据统计分析 采用SAS软件进行统计分析. 2结果与分析 2.1酶联免疫检测盐酸克仑特罗标准曲线 盐酸克仑特罗浓度(ng,kg) 图1盐酸克仑特罗标准曲线 盐酸克仑特罗标准曲线见图1,其回归方程式为:Y(吸光 度值%)=一17.2LOG(盐酸克仑特罗浓度ng/kg)+84.28,其中 r2=0.9426,显示出良好的相关性. 2.2广州市场6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量调查结果 测定了广州市场售6种活鸡:江西鸡,清远鸡,本地鸡, 信宜鸡,家鸡,竹丝鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量水 平,结果见表1. 表1广州市场6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量(ng/kg) 从表1可见,广州市场市售的6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸 克仑特罗含量水平为155.27?81.17~322.00?127.56ng/kg, 含量较低,符合残留标准(<50~g/kg),消费者食用后不会引 起盐酸克仑特罗残留危害. 对6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量结果进行差异 显着性分析,结果见表2. 结果表明,6种活鸡鸡肉盐酸克仑特罗含量差异不显着, 而6种活鸡鸡肝中盐酸克仑特罗含量差异较显着,其中竹丝鸡 鸡肝中盐酸克仑特罗含量显着高于信宜鸡. 2.3回收率试验 表2鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗含量差异显着性分析 6种活鸡各取10g粉碎好的鸡肉及鸡肝样品,每种样品均 分为二份,一份直接前处理后经酶联免疫法测定,确定样品 中盐酸克仑特罗含量;另一份样品添加适量试剂盒提供的盐酸 克仑特罗标准品再继续进行前处理,经酶联免疫法测定回收 率,结果如表3所示. 表3酶联免疫法测定盐酸克仑特罗回收率结果 从表3可知,采用酶联免疫法测定6种鸡肉及鸡肝中盐酸 克仑特罗含量平均回收率为94.10%,变异系数为1.38%,表 明鸡肉,鸡肝及不同种类的活鸡之间回收率差异不大. 3结语 在我国,盐酸克仑特罗俗称”瘦肉精”,添加在饲料中喂 养动物后易残留在动物肌肉,内脏器官,是目前频频引致食物 中毒的元凶之一,不仅严重影响消费者身体健康,同时也影响 外贸出口,加强对动物食品中盐酸克仑特罗残留监控势在必行. 近年来,国内有运用酶联免疫法通过检测动物尿液估算 动物产品中盐酸克仑特罗的报道,估算结果波动较大14I5】.本 研究采用酶联免疫法直接测定家禽内脏中盐酸克仑特罗含量, 检测容量大,成本低,检测结果准确可靠,检测低限为40ng/ kg,完全可作为一种快速初筛手段,配合精密仪器使用,满 足日常大批量检测工作的要求. 对广州市场6种活鸡鸡肉及鸡肝中盐酸克仑特罗水平调查 ????加mO? 一%) ※俺品叠学2003,”Co1.24,No.8119 结果表明,残留含量符合卫生标准, 仑特罗残留危害. 参考文献: 食用后不会引起盐酸克【2]2 【3】 【4】 【l辉?供港澳活猪盐酸克仑特罗残留的调查【J】.湖南畜牧【5】 19991兽医.,:23.24. 徐友宣,王杉,申利等_,J,鼠尿中克仑特罗及其代谢物的GC/ MS分析【J】.质谱学报,1994,15(2):38-41. 付颖.食品中农药残留的分析【J].农药,2001,40(6):5.7. 陈琼,连玉华,戴亚东等.某肉联厂屠宰猪”瘦肉精”残留 的检测【J】.畜牧与兽医,2000,32(4):31. 孔繁德,万三元,周斌华等.用竞争性酶联免疫技术检测活猪 盐酸克仑特罗残留【J】.福建畜牧兽医,1999,21(4):6.7. 流动注射化学发光法测定食品营养添加剂中铅 朱粉霞1,杨德玉1,张小燕z-3,范晓东2,张勤3 (1.西北大学化学系,西安710069) (2.西北工业大学化学工程系,西安710069) (3.西北大学食品科学与工程系,西安710069) 摘要:研究了表面活性剂对痕量Pb(II)催化H202氧化鲁米诺一邻菲哕啉化学发光反应的影响.以吐温一20为增 敏剂,建立了增敏反应化学发光测定痕量铅的新体系.本方法线性范围(1×10,1×10”~g/nd)宽,检出限(2.5× 10mg/m1)低,pH范围拓宽由原来的3改变成3,8.可用于食品营养添加剂——丙酸钙,乳酸钙,醋酸钙和卵黄 高磷蛋白中铅的测定,结果良好. 关键词:流动注射化学发光;表面活性剂;铅食品营养添加剂 Abstract:Theeffectofsurfactantonthechemiluminescence(CL)thatPb(?)catalysesluminal?1,10-ph en-H202isstudied. BasedonTween-20.anewCLmethodfordeterminingtracePbOI)isproposed.吐屺leisalinearrelationshipbe煳theintensity ofCLandconcenlrationofPb(IDintherangeof1×10.6,1×ltrmg~;thedetec0nlimitofmethodis2.5×10”Tmg/mlfor Pb0I);theRSDis1.9%.ThemethodhasbeenappliedtothedeterminationofleadinCalciumpropionatew ithsa~factoryresults. Keywords:flowinjectionchemiluminescence:surfactant;lead:calciumpropionate 中图分类号:0657.39文献标识码:A文章编号:1002.6630(20O3)O8-0119-03 铅是产生环境污染引起人体中毒的主要元素之一[1】,特别 对于食品营养添加剂中铅的含量有着严格的控制指标[2】,食品 添加剂丙酸钙,乳酸钙和醋酸钙已广泛用于食品中,卵黄高 磷蛋白促钙吸收剂也有了研究新进展.因此,为其建立新方 法并建立一种简便,快速和高灵敏度测定食品营养补钙添加剂 中痕量铅的分析方法意义重大. 有关食品原料,食品营养添加剂和食品中痕量铅的测定 方法一般采用原子吸收法[3】和双硫腙比色法[4】.前者直接测定 铅的灵敏度不高,后者需使用剧毒试剂氰化钾,污染环境. 化学发光测定金属离子具有灵敏度高,仪器简单,分析速度 快等优点.已有化学发光法应用于铅的测定.本文研究并 建立了增敏反应化学发光测定食品营养添加剂中痕量铅的新体 系.本方法的线性范围宽,将测定的pH范围拓宽至3,8, 易于测定,避免了因调pH而带进相应离子. 1实验部分 1.1仪器与试剂 IFFM.D型流动注射化学发光仪西安瑞迈电子科技有限 公司;铅(II)标准储备液100m;鲁米诺(Lumino1)储备 液1×10.mol/L;邻菲哕啉储备液1×10.Stool/L(乙醇溶 解);吐温.20,吐温.40,吐温.80,OP液态表面活性剂用 无水乙醇配成10%的储备液;十二烷基磺酸钠(SDS),溴代十 六烷基吡啶,十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)固体表面活性 剂配成1×10.~mol/L的储备液.所用水为二次蒸馏水,试剂 除液态表面活性剂为化学纯外均为分析纯. 1.2实验方法 按图1流路,将鲁米诺和邻菲哕啉配的混合分析液与双氧 水和表面活性剂的混合分析液经三通阀混合于盘管L-中,反 收稿日期:2003—06—31 作者简介:朱粉霞(1979一),女,硕士研究生,从事鸡蛋中营养素分析方法的研究与建立.