绞股蓝总甙对实验性脑缺血损伤的保护作用

绞股蓝总甙对实验性脑缺血损伤的保护作用 绞股蓝总甙对实验性脑缺血损伤的保护作 用 20中药药理与临床2005;21(1) 11.90%.日间精密度,RSD=21.055%. 方法回收率:血药浓度为0.166,27.300,109. 200mg/L方法回收率分别为92%,104.6%,102. 15%. 2.3药代动力学研究结果利用DAS软件计算得到 结果如1,图1,2. 表1药代动力学研究结果 望型!垒::! 滴丸剂241667?2O83673754432036663136243282935804757{)3642057 ? 片剂441667?489302231957J314472464042J15869J8210212262352 药一时曲线 滴丸片剂 2.4生物利用度研究滴丸剂的相对生物利用度F =1.4706(147.06%) 3讨论 本文实验结果表明,磷酸川芎嗪滴丸制剂Tmax, Cmax显着提高,生物利用度显着提高,说明其滴丸制 剂良好的速释效果.在临床应用方面,剂量的减少直 接关系到患者服用药物的毒副作用反应.磷酸川芎嗪 滴丸制剂生物利用度的提高,也表明此种制剂必然会 在减少临床风险,提高药效方面起到积极意义.此外, 对生产厂家而言,减少原料的配比而能达到与目前市 售制剂相同或者更加显着的效果,对减少生产成本同 样具有重要意义.最终给广大患者带来更大的福音. 然而,因为其生物利用度提高后,还需要对其不同剂量 世行波动系数检验才可进一步验证其良好的作用以便 更好的进行其生物等效性实验. 参考文献 l楼雅卿,张宏.曹霞,等.磷酸川芎嗪在狗和大鼠体内的药代动力学 和体内命运药学,1986;21(7):481--487 2丁广斌,徐惠南,沈藤.磷酸川I芎嗪缓释片的研制及兔体内生物利用 度测定上海医科大学,2000;27(5):178,180 3黄志力,桂常青,孙瑞元.盐酸川芎嗪在大鼠体内的分布中国药理 学通报,1994;10(4):297,299 4黄志力,周聘,孙瑞元,等盐酸川芎嗪注射液的药物动力学研究中 国药理学通报,1989;5(4):240,242 5孙寒静.吴伟.陈宏圭等川芎嗪的药代动力学研究状况中药新药 与临床药理.2002;13(1):61,63 高勇川芎嗪体内药物代谢动力学研究.辽宁中医杂志,2003; 6于勇, 30(8):670,671 7郭军,孟华,王骊丽,等.川芎嗪的药动一药效学研究近况南京中医 药夫学(自然科学版).2002:18(5):318,320 绞股蓝总甙对实验性脑缺血损伤的保护作用 韦登明,饶广勋,扬文辉 (宁波大学医学院,宁波315211;华中科技大学同济医学院,武汉430030) 摘要目的:观察绞股蓝总甙对大鼠局灶性缺血再灌注脂质过氧化脑损伤的影响.方法:采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模 型,应用绞股蓝总甙(200--400mg,/kg,iI))后,观察大脑中动脉闭塞侧脑梗死面积,脑组织超氧化物歧化酶(S()D),脂质过氧化物丙二 醛(MDA)水平及脑功能的变化.结果:与损伤模型组比较,绞股蓝治疗组大脑中动脉闭塞侧脑梗死面积明显缩小;脑组织SOD水 平显着升高,MDA水平显着下降;脑功能受损程度明显改善.结论:绞股蓝总甙对大 鼠缺血再灌注脂质过氧化脑损伤有一定的保 护作用. 关键词绞股蓝总甙;脑缺血再灌注损伤 绞股蓝总甙(Gypenosides,GP)具有显着的抗氧 化,降血脂,调节免疫作用,本研究观察绞股蓝总甙 对缺血再灌脂质过氧化脑损伤的保护作用. 1材料与方法 1.1试验药物绞股蓝总甙由昆明医学科学院植化 所提供,用蒸馏水配制,200目滤膜过滤除菌后备用. 1.2试剂四氮唑(TTC)购于Sigma公司.超氧化 物歧化酶(S0D),丙二醛(MDA)检测试剂盒均购于南 京聚力生物医学工程研究所. 1.3动物SD大鼠40只,由华中科技大学同济医学 院实验动物中心提供,雌雄不限,体重200--250g. 1.4方法大鼠随机分成4组,每组10只.参照 Longa方法l1J并予改良制备.10%水合氯醛0.3mV 中药药理与临床2005;21(1)2l 100g腹腔麻醉大鼠,分离,结扎并切断右侧颈外动脉, 由颈外动脉残端沿颈总和颈内动脉缓慢插人4-0单尼 龙栓线约1,8cm,阻塞大脑中动脉人口造成缺血.于 缺血1h后拔除栓线进行24h再灌注;假手术组栓线只 插人1.0cm,其余步骤同模型组.动物苏醒后出现手 术同侧Homer征和对侧体运动障碍即为模型成功. 缺血再灌注造模前后分别给治疗组大鼠腹腔注射GP 200mg/kg,400mg/kg各一次;对照组大鼠腹腔注射等 容积蒸馏水各一次.于再灌注24h时,进行5分制神 经功能评分:0分,无神经功能缺损症状;1分,不能完 全伸展对侧前爪;2分向外侧(右)转圈;3分,向对侧倾 倒;4分,不能自行行走,意识丧失.缺血1h再灌注 24h时,断头处死所有动物,迅速提取动物大脑. 脑梗死面积测定取脑后自额极后5mm作等距 离A,B,C,D,E5个冠状切片,取最大缺血断面C片入 2%TTC染液中,37?水浴染色3()分钟(避光进行). 正常组织染成红色,缺血脑组织染成白色.染色后放 人10%甲醛固定,避光4E保存.C片梗死面积结果 按梗死面积占C片梗死侧大脑总面积的百分数表示. 用KW58型图像分析仪扫描计算C片梗死区面积和 非梗死区面积.为消除梗死侧大脑半球因脑水肿造成 误差,按Swanson方法2进行校正后计算C片梗死面 积的百分比(IS%).计算公式:IS%=(Sl—Sr)/S1× 100%(S1:左半球C片总面积;Sr右侧半球C片非梗 死区面积). 大脑皮质SOD测定断头取脑后,在冰盘上于大 鼠脑视交叉前2mm迅速剥离缺血侧脑皮质组织,称湿 重,按脑湿重:PBS=100rag:lml的比例加入0.01mol/ LPBS(pH7.4)匀浆,3000rpm离心30rain,取上清,严 格按照)D检测试剂盒说明书进行操作,S()『)活性单 位用U/g(湿重)表示. 大脑皮质MDA测定在鼠脑视交叉前2r彻1处 提取缺血侧脑皮质组织,用0.01tool/LPBS(pH7.4) 溶液制成10%脑组织匀浆,3000rpm离心15rain,取上 清,用硫代巴比妥显色(TBA法)按试剂盒说明书要求 测定MDA含量.MDA含量用rmaol/g(湿重)表示. 2结果 2.1GP对大鼠神经功能缺失评分的影响假手术组 动物神经功能缺失评分为0,模型对照组动物神经功 能缺失评分为2.41?0.15.GP两组动物神经功能缺 失程度明显减轻,200mg/kg,400mg/kg组神经功能缺 失评分分别为1.89?0.10和1,78?0.13,与模型组 比较P<0.05和P<0,01. 2.2GP对大鼠脑梗死面积的影响假手术组动物未 见梗死灶形成,梗死面积为0.模型组动物均出现梗 死灶,梗死面积百分比为36,15?1.13.GP两组动物 也存在梗死灶,但梗死面积明显缩小,其梗死面积百分 比分另U为200rag/kg25.71?1,02,400mg/kg18,35? 1.21,与模型组比较差异有显着性(P<0.05和P<0. 01). 2.3GP对大脑皮质SOD和MDA含量变化的影响 见表1. TablEffectsofGPonthecx)ncentrationofS()DandMDAinCerc bmlCortex Com1)aredwithGroupB*P<0.05.**P<0.01 3讨论 随着脑血栓病溶栓治疗的开展,血液循环重建后 的再灌注损伤日益受到重视,已有越来越多的证据表 明[3--6J氧自由基参与缺血再灌注损伤.在缺血再灌注 脑损伤动物模型中应用氧自由基清除剂能明显减轻脑 损伤[7,. 绞股蓝总甙具有较强的抗氧化作用,它能诱导机 体增加SOD合成,清除多种自由基.本文结果表明, 缺血1h再灌注24h后,损伤模型组缺血侧脑组织SOD 水平明显下降,MDA水平明显升高,缺血再灌注模型 缺血前后200,400mg/kg绞股蓝总甙腹腔注射后,大 鼠缺血侧脑组织SOD水平明显升高,MDA水平明显 下降,提示绞股蓝总甙在大鼠缺血再灌注脑损伤中具 有清除自由基,抗脂质过氧化作用.结果还显示,GP 可明显缩小脑组织梗死面积,改善神经功能受损程度. 表明绞股蓝总甙对大鼠局灶性缺血再灌注脑损伤有保 护作用. 参考文献 1LongaEZ,WeinsteinPR,CarlsonS,el*a1.Reversiblemiddlecere1)ral artery:occlusionwithoutcranietomyinrats.stroke,1989:20:84,86 2Swan.~mRA,ASemiautomatedmetlxxlformeasuringbraininfarctvol— Urne.JCevebBIc~JFlowMetab,1990;10:293,295 3Chan.PH.Roleofoxidantsini~hemicbraindarna~ge. Stroke.1996; 27:?24,1129 4AsanoT,KoideT,G0hO,eta1.Theroleoffreeradicalsande- ico~noidsinpatl~geneticmechanismunderlyingischemicbrainedema. MolChemNeuropathoI'1989;10:101,133 5M0riT,AsanoT,MatSuiT,etalIntraluminalincrea.~ofsuperoxide anionfollowingtransientfocalcerebralimhemiainratsBrainRes,1999; 22中药药理与临床2005;21(1) 816:35O,357 6Bran~ntC,KirinoT,RungbyJ,eta1.Increa'~.1lipidpemxidationin vulnerablebminregionsaftertrarmientforebrainischemiainrats.Stroke, 1989;20(7):918,920 7ChanPH,KinouchiH,EpsteinCJ,etalRoleofsuperoxidedimmtase inischemicbraininjury:reductionofedemaandinfarctionintrarksgenic micefollowingfocalcerebralischemia.BrainRes,1993;96:97,104 8YangG,ChanPH,ChenE,eta1.Humancopper-zincsuperoxidedis- mutasetran.~enicmicearekg?yresistanttorelxerfusion-mjuryafterfocal cerebralischemia.Stroke,1994;25:165,170 TheprotectiveeffectsofGypenosidesoncerebralinjuryafterfocalischemicreperfusioninrat s WeiDengrnin,RaoGuangxin,YangWenhui (MedicalSchoolofNingboUniversity,Ningbo315211, I'ongiiMedicalCollege,Hu~LzhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030) Objective:ToinvestigatetheprotectofGypenosides(GP,atdose200--400mg/kg,ip)onlipid peroxidationinducecerebralinjureaf- terfocalischemicreperfusioninrat.Methods:Thefocalcerebralischemic— reperfusionmodelwasestablishedwiththreadembolismofmid- diecerebralartery.TheGPWaSinjectedbyperitoneumatdase200, 400mg/kg.T'hesquareofmiddlecerebralafterinfarctionwereob— Sen,ed.ThelevelofS0DandMDAincerebralti~ueweretestedThedamagedegreeofcerebralfunctionwasexamined.Results:Com- paredwiththemodelgroup.itrevealedthatinGP.treatedratstheYquareofmiddlecerebralafte rinfarctionwasremarkablyreduced,level ofMDAincerebralti~uewasmarkedlyreduced,theactivitiesofS(_)nincerebraltissueWaSs ignificantlyelevatedandthecerebralfunction wimproved.Conlusions:I'heresultssuggestedthatGPhadaIx)tentneuroprotectiveeffectin cerebrali~hemicalandreperfusioninrats. KeywordsGypenmides;ischemic.reperrusionmodel 冬虫夏草醇提取液对实验性急性病毒性心肌炎的影响 朱照静,李峰,饶邦复 (重庆医科大学药学系,重庆医科大学附属第一?医院,重庆400016) 摘要目的:探讨冬虫夏草醇提取物对急性病毒性心肌炎的干预作用.方法:采用柯 萨奇B组3型病毒复制病毒性心肌炎 小鼠模型,免疫组化染色观察心肌iNOS表达,同时观察光镜下心肌组织学变化.结 果:与模型组比较,虫草醇提取物干预组心肌炎 症坏死半定量分析显着减轻,心肌iNOS面密度值均显着升高.结论:虫草醇提取物 对急性病毒性心肌炎有明显保护作用,其保护 机制与诱导心肌iNOS表达,增加NO产生等有关. 关键词冬虫夏草,病毒性心肌炎,iNOS 病毒性心肌炎(VMC)是指嗜心肌性病毒感染引 起心肌局限性或弥漫性的急性或慢性炎症病变,病毒 直接介导的心肌损害,自由基损伤等【卜J多种机制参 与??C的发病. 冬虫夏草具有调节免疫功能,清除自由基,抗心律 失常及直接抑制病毒复制【J等作用,但虫草是否能 减轻病毒性心肌炎的炎症反应,目前未见报道,本文采 用病毒性心肌炎小鼠模型对此进行r研究. 1材料与方法 1.1试验药物冬虫夏草四川德钦产,由重庆市中药 tt-国家自然科学基金项目39870955 研究院提供并鉴定.以虫草5倍量70%乙醇分三次 微沸提取,收集提取液,过滤,蒸去乙醇,制成浸膏后加 蒸馏水配成20%醇提液供用. 1.2动物4,6周龄雄性BALB/C小鼠,体重16, 20g,由第三军医大学动物中心提供. 1.3方法每只小鼠腹腔接种TCLD5010—8CVB30. 1ml建立VMC模型【_8J.小鼠100只随机分5组:正 常对照组(CG),感染组1(IG1),感染组2(IG2),虫草 1(CIG1)和组2(CIG2).CG组腹腔注射不含CVB3 的MEMEagles液0.1ml.CIG组于接种CVB32h后 开始给予20%虫草液lml灌胃,1次/日.IGl组,