实验三神经干动作电位的引导

实验三神经干动作电位的引导 实验七 神经干动作电位的引导 1、实验目的 观察神经干复合动作电位，进一步加深对刺激、兴奋和传导等基本概念以及动作电位的理解。 2、实验原理 神经纤维的兴奋现为动作电位(AP)的产生与传导。当用电生理学方法引导出的AP传导到第1记录电极(R1)时，该处(纤维表面)表现为负电位，而第2记录电极(R2)处为正电位，示波器显示向上的电位曲线;当AP传导到R2时，R2处也变为负电位，此时R1R2无电位差，故电位曲线回到零电位水平;当R1处复极为正电位时，示波器上电位曲线向下;当R2处也复极为正电位时，R1R2又无电位差，电位曲线又回到零电位水平。所以神经干表面(细胞外)记录到传导中的AP呈双相。若于R1与R2之间将神经干夹伤，AP只能传导到R1处，只能记录到一个向上的单相曲线。一条神经干含若干条粗细不同的神经纤维，所以记录到的AP是复合波。 3、实验用品 蟾蜍或蛙;蛙类解剖器械、神经屏蔽盒、RM6240多道信号采集系统、(生物电输入电缆一根、接地线一根、刺激输出电缆一根)、棉球、棉线。滤纸、普鲁卡因、任氏液等。 4、方法与步骤 (1)打开外置仪器电源，启动计算机，在Windows环境用鼠标双击系统软件图标进入系统环境。 (2)制备坐骨神经标本。制备方法与实验一直被坐骨神经腓肠肌标本的方法基本相同，只是将坐骨神经分离至腘窝处剪断即可。放入装有任氏液的培养皿中备用。 (3)连接实验装置。将神经屏蔽盒内的所有电极用浸有任氏液的棉球擦拭，将神经标本置于神经屏蔽盒内，将脊椎附近的主干靠刺激电极，各点击应靠近些，以获得较强的信号。然后按黑板中图连接各仪器。 (4)实验观察 ?用鼠标点开显示屏上端的“实验”菜单，然后用鼠标单击“肌肉神经”栏目中的“神经干动作电位”项，系统自动设置好实验参数、弹出刺激对话框，并处于示波状态。用鼠标在刺激器对话框中选择同步触发，然后点击“开始刺激”键稍等片刻屏幕上即出现一屏“动作电位”波形，以后每点击开始刺激键一次，波形即刷新一次。根据波形幅度可调节位于屏幕上显示通道右侧的灵敏度键，必要时缓可调节刺激强度。参数调节后，应在此点击“开始刺激”键，以刷新波形。若需保存波形，用鼠标点击刺激器对话框内的“记录当前波形”键即可，每刺激一次，均可按此方法将当前波形保存起来。若保存了多幅波形，每幅波形作为一个子文件存在，以后可用“PgDp”与“PgDn”翻页查找。记录当前波形键记录 的是临时文件，若需长期保存，在退出系统前应正视保存文件。 ?单向动作电位的观察用镊子将两个记录电极(R1R2)之间的神经夹伤，动作电位的波形由双向变为单向。 ?传导阻滞的观察在刺激电极与记录电极之间的神经干上放置一小块浸有普鲁卡因的棉花，每分钟观察动作电位一次，有何变化, 注意事项 (1)标本尽量长些，分离干净又不伤神经主干。制作过程不时地滴加任氏液湿润神经。 (2)放置电极上的神经干要拉直，不可与神经槽壁接触。 (3)尽量减少干扰源，注意屏蔽、接地。 (4)刺激伪迹不能不要，但不宜过大。为此，标本应新鲜，屏蔽盒内尽量少附带任氏液，刺激波宽调窄些，波幅以刚达到最适刺激为宜，不可太强。