医药学论文-二对半e抗原假阳性原因分析

医药学论文-二对半e抗原假阳性原因分析 作者：蒋银香 【摘要】 目的：探讨导致二对半e抗原假阳性的原因。：用ELISA法测定45份离心与不离心抗凝标本的HBeAg。结果：不离心标本的HBeAg单独阳性很高，离心标本基本无此情 况。结论：假阳性与不离心有关，全血中有许多与HBeAg有共同抗原颗粒物质，在酶免过程 中出现非特异性结合，而造成假阳性，洗板不清，可能也是造成假阳性的原因之一。故要求 对单HBeAg阳性标本进行离心，以提高测定结果的准确性。 【关键词】 HBeAg；ELISA;假阳性 【ABSTRACT】 Objective:To investigate the reason of causing e-antigen false positive.Methods:Use ELISA method to measure HBeAg of 45 centrifuge and centrifugeless uncoagulate samples .Results :The percentage of the single positive for HBeAg is high in the centrifugeless samples.But the result is quite different for centrifuge samples.Conclusion:The false positve has something to do with centrifugelessness.In the blood,there are lots of particular matters that have common antigen function with HBeAg.During the enzymatic method there are unspecial combinations,which causes the false positive. Maybe untidiness is one of the reasons which causes the false positive.So centrifuge is needed for HBeAg single positive sample to improve the accuracy of measuring results. 【KEY WORDS】 HBeAg；ELISA；the false positive HBV的血清学方法有很多，目前,ELISA操作最简单，易于推广。近几年来，我们 在工作中遇到几例单HBeAg阳性或HBeAg、抗—HBe同时阳性的特殊模式，将标本作如下处理 后：重新离心，冰箱保存，复查，发现结果均为阴性。另外也有研究者报道HBeAg、抗—HBe同时阳性的特殊模式[1]，以及溶血及脂浊样品对ELISA检测的影响[2]，基于上述这些现象，我们进行如下探讨。 1 材料和方法 1.1 实验仪器 BIORAD Model 550酶标仪,BIORAD Model 1575洗板机，北京医用离心机厂LDZ5—2型离心机,美国PE公司PE480 DNA扩增仪。 1.2 标本 枸橼酸抗凝标本。 1.3 试剂 科华公司和华美公司HBeAg试剂盒，新创HDVIgM试剂盒,HBVDNA试剂盒。 1.4 方法 严格按照试剂盒说明书操作。 1.4.1 枸橼酸抗凝标本45份混匀不离心和3000离心5min、10min，分别用科华和华美试剂同时进行检测。 1.4.2 结果判断样品OD值/阴性对照，OD值＞2.1为阳性，否则为阴性。 1.4.3 45例标本作HDVIgM检测，同时作HBVDNA检测。 作者：蒋银香 2 结果 1 45份枸橼酸抗凝标本两种试剂离心与不离心检测结果 2.1 对45例标本作HDVIgM检测，结果为阴性。 2.2 对45例标本作HBVDNA检测，结果为阴性。 3 讨论 3.1 HDV是缺陷病毒，当HDV和HBV重叠感染,HBV为HDV复制提供HBsAg[3],故能表现HBsAg阴性而HBeAg阳性的情况。通过对HDVIgM测定结果表明，单独HBeAg阳性与HDV重叠感染无关。 3.2 HBeAg存在于乙肝病毒Danna颗粒的核心部分，HBeAg存在表明HBV处于增殖和复制状态，具有强烈的传染性。通过对HBVDNA的检测结果为阴性，表明体内并无HBVDNA[4]， 故我们认为出现的HBeAg为假阳性。 3.3 HBeAg是前C区基因区表达，同时HBcAg在C区基因区表达[5]，HBeAg的纯化是产生纯抗-HBe的前提，故在包被过程所用抗—HBe不纯可能是造成假阳性的原因之一。 3.4 全血中有许多HBeAg的共同抗原类的颗粒物质，在不离心的情况下悬浮在血浆中， 故在酶免过程中出现非特异性结合而造成假阳性［6］；另外可能血中存在许多SOD酶，在洗涤过程中不清而在显色过程中出现非特异性反应造成假阳性，同行也有类似报道[7]。 3.5 HBeAg阳性是反应HBV增殖、有传染性的一种有意义的指标之一，在排除HBsAg勾带反应，HDVIgM阳性，HBVDNA阳性情况下，单独出现这样的结果需慎重。 3.6 血清中的细胞成分中含有过氧化酶成分，产生辣根过氧化物酶样作用，当离心不充 分的血清、血浆标本加养于反应板孔时，细胞成分粘附于酶标板而不能洗去，会产生酶促反 应而呈现阳性显色，导致出现一些假阳性［8］。 【参考文献】 1 王火生，韩红星，徐六妹，等.HBV e 系统双阳模式复核结果的分析\[J\].临床检验杂志，2001，19（6）：3812 单桂秋,苏建婷.溶血及脂浊样品对ELISA检测HBsAg的影响\[J\].临床检验杂志，1999，17（2）:1023 李梦东主编.实用传染病学\[M\].北京：人民卫生出版社，1998.1364 李梦东主编.实用传染病学\[M\].北京：人民卫生出版社， 1998.1375 俞树荣主编.微生物和微生物学检验\[M\].北京:人民卫生出版社，1997.3806 许斌,韩光宇,程梅,等.血液HBsAg、抗—HCV复检中应采用不同试剂和设置低限灰区\[J\].临床检验杂志，1998，16（6）：3417 杨志成.16例抗—HIV国产试剂检测假阳性报告\[J\].中国输血杂志，2000，13（3）：2068 常立俊.HBeAg酶试剂假阳性原因探讨\[J\].华美通讯，1999，1(2)：21