【doc】口服猪脾转移因子对正常,化疗,荷瘤小鼠DNCB皮肤DTH的影响

【doc】口服猪脾转移因子对正常,化疗,荷瘤小鼠DNCB皮肤DTH的影响 口服猪脾转移因子对正常,化疗,荷瘤小鼠 DNCB皮肤DTH的影响 ) 』一 目矗口日目j口日 日基础免疫 !口四日目凹日 口服猪脾转移因子对正常,化疗,荷瘤 小鼠DNCB皮肤DTH的影响 罗/y————一-—_—,——一,, 解放军军事科学院医院北京100091 厂寸摘要本实验结果表明+二硝基氯苯(DNCB)能致敏正常小鼠产生皮肤迟发型超敏反应 (DTH)+而化疗,荷瘤小鼠皮肤DTH受到明显抑制(P<O.OOJ)'当D'NCB致敏的正常,化疗,荷瘤小 鼠同时口服与嶷注猪脾转移因子(I~-TF)一定剂量后,对正常小鼠皮肤DTI-I无明显影响(P> 0.05);对化疗,荷瘤小鼠皮肤DTH有明显增强作用(<O.05,0.001).表明.PS,-TF对化疗和肿瘤所 致的细胞免疫功髂下降有明显作用,且口服与嶷注作用相同,为PS-TF.特别是IZl服剂的临床应用 提供了依据. 关键词口崩睹脾转移周子荷癌f/,鼠r,一 DNCB是一种半抗原.涂抹皮肤后,与皮 肤蛋白结合成完全抗原,由此激括T淋巴细 胞,使其转化并增殖成致敏淋巴细胞,当再次 涂抹DNCB攻击时,可产生皮肤DTH,其反 应水平与机体的细胞免疫功能相关.转移因 子(TF)是细胞介导免疫反应的重要因子,具 有放大和复苏受体免疫反应的能力[】],并能 将供俸的某种特定细胞免疫功能转移给受 体.这种效应并无严格的种属特异性脚.本试 验采用DNCB致敏小鼠的方法,分别观察了 口服Ps—TF对正常化疗,荷瘤小鼠DNCB皮 肤DT'H的影响,从而进一步了解口服PS~TF 的作用.为口服Ps—TF在临床用于化疗,肿 瘤患者的辅助治疗提供实验依据,现如 下. 材料与方法 一 ,材料 1.动物:昆明种小鼠(军事医学科学院动 化疗小鼠!罂皮BEs匹乒三;巍 物饲养币心提供),S180荷瘤小鼠(中科院药 物所提供). 2药品:PS-ZF(自制,批号:921130),环 磷酰胺(上海第十二制药厂制造.批号: 910914),DNCB(中国医药公司北京分公司经 销,化学纯.批号:890619)丙酮溶液(北京酒 精厂制造,分析纯,批号:890610),10硫化 钠(自制). 二,方法 r 1.DNCB致敬小鼠的方法:实验选用平 均体重202k1g的雌性小白鼠,预先在小鼠颈 背部脱毛,24小时后,用微量注射器取5O DNCB丙酮液2l漓于脱毛皮肤处致敏动物. 并于第七天照上法攻击一次,致敏后第n 天,用2DNCB丙酮溶液10L,滴在小鼠腹 部预先脱毛皮肤处进行攻击,攻击后48,72 小时观察皮肤反应,反应强度判断按徐 淑云主编《药理实验方法学》进行踟.将每只 小鼠两次皮肤反应强度之和,作为该动物超 !型坚萋鲞蔓塑 敏反应水平的一个试验数据.最后将各组数 据进行统计处理. 2.PS—TF对正常小鼠皮肤DTH的影响: 试验采用初次致敏的动物.随机分为口服(腹 注)PSTF1,2,4(0.5,1,2)mg/kg三个剂量 组,同时设对照组.各组小鼠于DNCB首次致 敏第二天开始.口服或腹注Ps—TF.对照组同 时口服或腹注生理盐水,隔日一次.共给7 次. 3,PS-TF对化疗小鼠皮肤DTH的影响: 实验采用初次致敏的动物.同时一次睃注环 磷酰胺300mg/kg,然后随机分为口服(腹注) PS—TF1,2,4(0-5,1,2)mg/kg三个剂量组,同 时设对照组和正常小鼠组.各组小鼠于 DNCB首次致敏第二天开始口服或腹注Ps— TF.对照和正常组小鼠同时口服或腹注生理 盐水.隔日一次.共给7次 4.PS-TF对荷瘤小鼠皮肤DTH的影响: 实验采用初次致敏的动物.同时接种$180瘤 液(2xl0/m1)0.2ml于小鼠右前腋部皮下.然 后随机分为口服(腹注)PS-TF1,2,4(0.5,l, 2)mg/kg三个剂量组.同时设对照组和正常 小鼠组各组小鼠DNCB首次致敏第二天开 始口服或腹注PS-TF,对照和正常组小鼠同 时口服或腹注生理盐水,隔日一次.共给7 次. 结果 1.正常组小鼠口服(腹注)PS—TF皮肤 DTH的结果(见表1)表明.DNCB致敏小鼠. 具有明显皮肤DTH,口服,腹注Ps—TF各剂 量组小鼠.其皮肤DTH与对照组比均无明显 差异(P>0.05). 裹1正常小?口睢(膜注)PS-IT皮肤DTH强度(XiS) *番组皮肤DTH分别与对照组比较均无显着差异(P>0.0S) 2一环磷酰胺小鼠Elll~(腹注)PS-TF对皮高于对照组(P<0.05,0.001),且口服组与 肤DTH的结果表明(见表2).所有接受环磷腹注组之间无显着差异(P>0.05),各剂量 酰胺小鼠皮肤DTH受到明显抑制,对照组最组问皮肤DTH强度差异也不显着(P> 为明显(P之0.001);结果还显示,口服或腹0.05). 注Ps—TF的环磷酰胺小鼠,皮肤DTH都明显 裹2环碡酰胺,l,lltDm(11.~)vs-rv皮肤DTH强度(x土s) 2 **对照组皮肤砌明显低于正常组,差异显着(P<0.001). …皮肤DTH明显高于对照组,有极显着蔗异(P<0.001) 3.S180小鼠口服(腹注)PS—TF'对皮肤 DTH的结果(见表3)表明.接种S180实俸瘤 小鼠.DNCB皮肤DTH甚微,对照组极明显 (P<0.001);但口服或腹注PS-TF的荷瘤小 生垦塞壁l邕鏖鱼堡掌壁查 鼠.其皮肤DTH强度除I=I服小剂量组外?都 明显高于对照~jl(P<0.O5,O.001).口服组 与腹注组间无明显差异(P>0.05). 表3S189小鼠口置(睦注)PS-T~皮肤DTH强度(x土s) *皮肤DTH高于对照组(P<0.05). ?与对照组比较皮肤D?i无显着差异(P>0.05). **对照组皮肤DTH明显低于正常组,差异显着(P<0.OO1). ***皮肤DTH明显高于对照组,有彀显着差异(P<0.001). 讨论 来源于人或动物的TF,国内外在临床上 都有应用],特别是八十年代以来,我国在 动物TF的研究与应用方面进展活跃1.引 起了临床免疫界的重示.肿瘤的发生与机体 的免疫状杏有密切的关系肿瘤病人往往伴 有细胞免疫功能的减退.而化疗可直接抑制 机体的细胞免疫功能.因此,提高机体免疫功 能,将是当今肿瘤,化疗患者临床免疫治疗的 重要课题. TF是一种细胞介导免疫反应的重要因 子,它能够致敏受体的淋巴细胞,诱生多种免 疫调节活性因子[.从而调节改善机体的免 疫功能.口服PS-TF的应用已显示出初步疗 效[,本研究进一步表明,口服(腹注)Ps—TFl , 4(0.5,2)mg/kg能够明显增强化疗,荷瘤 小鼠皮肤DTH的强度(P<0.05,0.001).且 口服与腹注Ps—TF的作用相同. 上述结果表明,Ps—TF用于化疗,肿瘤患 者的辅助治疗,特别是口服PS-TF的应用, 将为开拓临床免疫治疗提供更安全,更广阔 的前景. 参考文献 1.TokehikoFujisaws.毗a1.RecentAduance*inTFand DLE-l'akyo:MaruaenCoLtdPress,1991:160,165 2,江虹,等.第四军医大学1984;5(3):176 3?徐淑云?主编.药理实验方法学.人民卫生出版社 出版,1985;954 4.1"akehikoFujisawa.eta1.RecentAdvancesinTFand DLE.Tokyo:ua衄CoLtdp?.1991:360~365 5.MeierCR.etaJ.WorldJsorg1977}I:617 6.朱显征,等.第四军医大学1984;5(3);172 7.舞保来.主编.转移因子及DLE的研究与临床应 用.学苑出版杜,1989:157,162 8.EmodG,etaJ.Lancet1973{I1382 9,T~bikoFIljisawa,亡t&1.R踟lcAdvancesin"iFand DLE.Tokyo?MaXazenCoLtdPre蹲,1991:175,l82