苏丹Ⅳ染色论文肪栓栓塞论文：苏丹Ⅳ脂肪染色法的应用及体会

苏丹Ⅳ染色肪栓栓塞论文：苏丹Ⅳ脂肪染色法的应用及体会 苏丹?染色论文肪栓栓塞论文:苏丹?脂肪染色法的应用及 体会 【摘要】脂肪栓塞综合征(fat embolism syndrome,fes)是指创伤或骨折后脂肪栓子进入血流阻塞小血管，尤其是阻塞肺内毛细血管，使其发生一系列的病理改变和临床现。肺是脂肪栓子最先到达的部位，栓子堵塞肺的小动脉及毛细血管，造成肺的血液灌流障碍。于是，肺的气体交换障碍，导致缺氧。由于脂肪栓子分解出的游离脂肪酸的刺激，肺血浆渗出增加，形成肺水肿，进一步阻碍肺的气体弥散功能，加重低氧血症。 【关键词】苏丹?染色 肪栓栓塞 1 染色过程 1.1 溶液的配制与方法:(1)试剂配制:苏丹?(上海试剂厂)2g,丙酮50ml.，70%乙醇50ml,先将70%乙醇和丙酮混合,再加入苏丹?,摇动多次使之尽量溶解至饱和,过滤后用小口砂塞瓶密闭保存备用。(2)防脱玻片:apec(北京中杉金桥)与丙酮1:30稀释。 1.2 染色方法:(1)冰冻切片厚8-10um,,防脱玻片贴片，蒸馏水稍洗。(2)harris苏木素液淡染胞核1min,水洗返蓝。(3)蒸馏水洗后70%乙醇浸洗2秒, 苏丹?染液浸染15-20min,70%乙醇迅速分化3秒钟。(4)用滤纸将切片周围的水分吸去，甘油明胶(已加热溶解)封片。 2 结果 脂类物质呈橘红色,细胞核呈蓝色。 3 应用 2010年9月3日，陈某(女，18岁，泉州泉港人)在一起交通事故致左侧股骨骨折，第二天在医院内死亡。解剖见左肺重500g，右肺重550g，双肺密度增加，表面光滑未见絮状物附着，切面未见明显实变病灶，挤压见较多的粘性液体溢出。he染色见肺重度呈淤血、水肿，灶性肺气肿，灶性出血，血管腔内可见大小不等边缘光滑的空泡，在空泡周围有中性粒细胞反应(见附照1)，高度怀疑系肺脂肪栓子，遂取部分固定后的肺组织经按照本方法进行染色，镜下见肺小动脉、肺泡壁毛细血管内见多量的染成橘红色的脂滴,肺动脉毛细血管内脂滴栓塞，使血管扩张(见附照2)。 4 讨论 (1)脂肪组织易溶于酒精,二甲苯等有机溶剂中,不易溶于水，因此选择固定液时应避免使用有机溶剂, 目前推荐使用中性福尔马林。 (2)取轻压时有粘性液体溢出的肺组织进行固定，用吸水纸将组织块的固定液充分吸干，避免冰晶的形成。由于肺组织属于疏松结缔组织，含有大量肺泡，冰冻切片难度大，笔者通过不同的温度多次反复切片得出:进行此类组织切片时使用的shandon冷冻切片机的工作室温度为-45?，包埋冷冻头温度为-40?，切出的片子结构比较完整， 肺组织血管中的脂肪滴形态良好。(3)防脱玻片粘附切片时，尽量压低玻片与切片的接触面，匀速粘片，可以减少气泡的产生。apec与丙酮1:30稀释较合适，浓度高时染料易形成背景沉淀，浓度太低易脱片。(4)染色过程中切片一定要保持湿润状态,因切片干燥后脂滴容易收缩,破裂,也可使染色试剂不易渗透,染色不均,影响结果观察。(5)苏木素液染细胞核,染后须在显微镜下观察，太深可用0.5%hcl分化，更要避免苏木素沉淀附着切片中。(6)用作配制苏丹染料的脂溶剂具有挥发性,配好后的染色剂必须使用紧密器皿,需用时吸出少量进行染色,否则染夜中的丙酮挥发很容易发生沉淀。(7)用甘油明胶封片,甘油明胶多滴一些,盖玻片尽量放低轻触甘油明胶使之慢慢溢开覆盖片子,不能用吸水纸吸液或用镊子压迫盖片赶气泡,因为此法会使脂滴移位.如有气泡可用温水浸掉玻片重新封固。 几乎所有骨折或畸形矫正术的病人都会发生脂肪栓塞，脂肪栓塞通常是无症状的，只有少数病人会发展成脂肪栓塞综合症---多个器官，特别是肺、脑和皮肤的功能紊乱。其发病机制仍然存在争议，但无论如何，fes导致的器官功能失调是组织中脂肪滴进入血流导致的，这个观点是被认可的,3,。尤其是在法医病理学鉴定时对创伤、骨、关节手术后死亡的案例，如果没有明显的死亡原因或是无法解释的脑部或肺部症状时，特别是在尸体解剖时可见到皮肤、心外膜或 肺浆膜下出血点，应高度怀疑fes致死的可能性，肺是脂肪 栓子最先到达的部位，对肺组织行苏丹?染色，找到脂肪栓 子是鉴定脂肪栓塞的最可靠的根据。 参考文献 ,1, carlson, dorothy s; pfadt, ellen ; fat embolism syndrome,j,;nursing;april 2011;41(4):72 ,2, 王泊云，病理学技术，北京:人民卫生出版社， 2000:208