不同相对离心力条件下红细胞压积测定结果相关性的研究

不同相对离心力条件下红细胞压积测定结果相关性的研究 不同相对离心力条件下红细胞压积测定结 果相关性的研究 中国输血杂志2005年旦箜鲞箜塑』旦!望!!!垒2111:!: 不同相对离心力条件下红细胞压积测定结果相关性的研究 李晓霞张兰刘进(四川I大学华西医院麻醉科,四JII成都610041) ? 121? 摘要:目的探讨不同相对离心力条件下红细胞压积(hematocrit,Hct)测定值的关系.寻找能基本准确测定 Hct的较低的相对离心力,为临床应用提供实验依据.方法采用不同相对离心力离心5min,测定配制红细胞 32种浓度(15,4O,45,50,55,60,65及7O%)血液的Hct.结果相对离心力为1502和845g时所 测定Hct与相对离心力13600g时所测定Hct有显着正相关(相关系数分别为0.99和0.95,P<0.01),前者所获 得的结果与13600g具有较好的一致性.结论临床麻醉中测定Hct可以采用较低的相对离心力(1502g)替代现行 的较高的相对离心力(13600g). 关键词:相对离心力红细胞压积相关性 中图分类号:R446.1lR331.141文献标识码:A文章编号:1004—549X(2005)02—0121—03 血液经过一定离心速度和离心时间处理,红细胞与血浆 或血清分离,红细胞容积与全血之比即红细胞压积(hemato— crit,Hct).目前测定Hct的常用方法有离心法和仪器法, 前者包括文氏法和毛细管微量高速离心法,后者包括电阻抗 法和电极法.微量离心法是国际血液学标准化委员会(IC— SH)推荐的常规测定Hct首选方法[,即相对离心力(rela— tirecentrifugalforce,RCF)以i0000,15O00g,离心5min为 宜.降低RCF能否达到与ICSH条件相同或相似的结 果?笔者通过对较低RCF与ICSH规定的较高RCF测定的 HCt的相关性研究,寻求一种适用于临床的较低RCF测定 HCt的方法,报道如下. 1材料与方法 1.1实验器材TGL-12B型毛细管高速离心机(12000r/ mn,RCF13600g);800B型离心机(上海安亭科学仪器厂); 红细胞压积读数盘(成都梅兰电子有限公司);毛细玻管(长 67ram,内径0.8mm,四川大学华西医学中心玻璃仪器加工 厂提供);玻璃试管(3m1);库血200ml;真空采血管(批号: 041224,其内抗凝剂为EDTA—K,即乙二胺四乙酸二钾,四 川大学华西医院检验科提供,为专用的血常规送检试管,符 合ICSH对抗凝剂的要求). 1.2不同Hct血液的配制将库血分装到玻璃试管中,置 入800B型离心机中,4000r/min,5min部分分离血浆,提取 血浆,用毛细玻管取少量余下的浓缩血液,以12000r/min, 5min离心,取出毛细玻管,置人红细胞压积读数盘读取 Hct,一般为(60,7O).将已知Hct的浓缩血液分别移至 若干试管中,按不同比例加入血浆,配制标准Hct分别为 15,4O%及45%,5O,55,6O,65,7O的32种浓 度的血液;充分混匀后分别用毛细玻管取少量血液,均采用 毛细管高速离心机离心,同一浓度的标本同时用毛细管吸取 2O份,同一RCF同时测定其中的任意4支毛细管,RCF分 别为93g(1000r/min),375g(2000r/min),845g(3000r/ min),1502g(4000r/min),13600g(12000r/min),离心时间 5min.对每1毛细管重复测量2次,取其均值并记录测定结 果.要求4支毛细玻管的读数误差不能超过0.1,否则重 新测定.所有测定在室温25?下进行,由1人操作. 1.3临床验证随机选取择期手术患者13名,ASA?级, 手术室后建立静脉通路时采取静脉血2ml,储存于真空采血 管供验证用.对于同1份血样,用毛细管同时吸取9份,均 采用TGL一12B型离心机离心,同一RCF下同时测定其中的 任意3支毛细管,RCF分别为845g(3000r/min),1502g (4000r/min),13600g(12000r/min),离心时间5min.读数和 测定条件同前. 2结果 2.1同一离心机不同RCF与ICSH规定RCF测定Hct的 相关性RCF为93g(1000r/min)和375g(2000r/min)时,不 能有效地分离血浆和红细胞,Hct读数困难.RCF为845g (3000r/min)和1502g(4000r/min)时可明显地分离血浆和红 细胞.与RCF13600g(12000r/min)的测定结果均有良好的 相关性(图1).应用Ahman-Bland分析嘲发现,RCF为 1502g(4000r/min)与13600g(12000r/min)的测定结果还具 有较好的一致性:Hct的偏差平均为0.1802,其95的可 4l,其 信区间为(1.4007,2.2403),偏差的上限为4. 95的可信区间为(3.6838%,5.1378),偏差的下限为一 0.7698,其95的可信区间为(一1.4969,一0.0428%) (图2). 2.2临床验证结果同时分别用RCF为845g(3000r/min) 1502g(4000r/min)与13600g(12000r/min)离心测定l3名择 期手术患者血液Hct(采用同一离心机),三者的测定结果具 有较好的相关性,并且后两者的结果还具有较好的一致性 (图3). ? 122-中国输血杂志2005年4月第18卷第2—~ChinJBloodTransfusio— n,April,2005,Vo1.18,No.2 图1—2 图1同一离心机不同转速Hct测定结果的相关性 - ?.?月 一 ???? 一 ??.?? ' ? ? ?.???..? - ? 05101520253035404550 lIet(9')均值 图2RCF为1502与,13600g测定Hot一致性分析 图3RCF为1502g,13600g测定Hot相关性临床验证结果 3讨论 Hot是直接反映贫血或血液浓缩的重要指标,与Hb一 样可作为判断术中输血的指征.测定Hot的方法较多,但目 前我国大部分医院通过血细胞自动计数仪或血气分析仪获 得Hot,虽操作简便,但仪器价格昂贵,测试费用高.因此限 于条件及经费的原因,术中是否输血及输血量的多少常凭麻 醉医师和外科医师的经验,常带有盲目性,不仅导致血资源 的浪费,而且增加了血液传播疾病的危险. 最准确的Hot方法是放射性核素测定法.但该法不易 推广.常规应用较多的是Wintrobe法和微量离心法',前 者操作复杂,时间长(30min),夹杂的血浆量大,不利于术中 及时观察;后者操作简单,时间短(5min),用血量少,夹杂的 血浆量少,其测定结果比前者平均低0.01,0.02.应用微 量离心法有利于及时了解术中变化,可指导术中输血,且价 格便宜,便于临床推广使用.但现有国产微量离心机在高速 运转(>10000r/min)时噪音较大,一定程度上干扰了手术室 工作人员(手术医师,麻醉医师及手术护士)的正常工作,同 时由于噪音的增加,长期使用也影响工作人员的健康.随着 RCF的增加,对离心机内电动机性能要求也相应增高,因此 现有的高速离心机费用较高.如果降低RCF又基本不影响 Hct测定结果,既可消除手术室内的噪音,又能降低成本,有 利于基层医院推广使用. 本实验在离心时间不变的情况下.将RCF降低到4个 级别,结果发现RCF为93,375g时血浆分离不全,因此测定 Hct时读数困难.RCF为845和1502g时血浆与红细胞完 全分离,且测定的Hot值与RCF为13600g比较具有良好的 正相关;统计学检验也证明1502与13600g的测定结果具有 提示采用较低的RCF(1502g)测定Hot是可 较好的一致性, 行的,也是可信的,即采用相对离心力为1502g时,能基本达 到ICSH规定的RCF(i0000,15000g)的测定结果.如果离 心半径相同,则较低的RCF需要较低的转速,甚至可以通过 同时缩短离心半径和降低转速来获得较低的RCF.临床患 者血液标本同时采用较高和较低RCF测定Hct的结果进一 步验证了上述实验结果,再次证明RCF为1502和13600g 时,HCt测定结果具有较好的相关性和一致性. 本研究提示,临床麻醉中可采用较低的RCF替代较高 的RCF测定Hot,其结果可信,方法可行;如果根据本实验 结果能开发出一种廉价的测定Hot的低速毛细管离心机, 我国大多数医院均能购买并用于手术,可指导术中输血,避 免盲目输血,有利于促进我国血液保护工作的进一步开展. 参考文献 Gudelinesfortheevaluationofbloodcellanalysersincluding theseusedfordifferentialleucocyteandreticulocytecountingand cellmaherapplications.InternationalCouncilforStandardizatin inHaematology:preparedbytheICSHExpertPanelonCytome一 6543202 喇一邑I{ 如蚰加:2m0 (u一巨/Je0一曲o0n_u邑一邑I{ 中国输血杂志2005年4月第18卷箍塑』旦!!!!!!垒!:!:!!: try.ClinlabHaemat,1994,16(2):157 2张时民,崔巍,李德高,红细胞及血红蛋白测定.见:张之南,李 蓉生主编.红细胞疾病基础与临床,北京:科学出版社,2000,328 , 330 3B1andJM,AltmanDG.Statisticalmethodsforassessingagree— mentbetweentwomethodsofclinicalmeasurement.Lancet 1986,8(1):307,310 ? 123? 4王庸晋.红细胞比积测定.见:王庸晋,段满乐,魏武,等主 编.现代临床检验学.北京.人民军医出版社,2000,17 5刘泽民,李开国,谢慕英.医学检验仪器学.重庆出版社,1991, 29,33 (2004-07-27收稿,2005—03—14修回) 本文编辑:蔡辉 血标本存放温度和时间对ALT检测结果的影响 刘正敏高新谱.李健(1.济南市中心血站,山东济南250001;2.山东省立医院) 摘要:目的探讨血标本存放温度,时间对丙氨酸氨基转移酶检测结果的影响.方法采集血标本存放于不同 温度,于不同时间测定葡萄糖(Glu),pH值,丙酮酸(PYR),丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量,比较其含量的变化.结 果16?以下温度存放时间低于4h的血标本转存4?冰箱后72h内对ALT活性单位变化的影响不大,但随着存放 时间的延长,温度的升高,对ALT检测结果的影响越显着.结论ALT检测的活性单位与血标本存放的温度高低, 时间的长短有密切的关系. 关键词:血标本/存放温度时间糖酵解丙酮酸ALT 中图分类号:R446.112文献标识码:A文章编号:1004—549X(2005)O2一O123一O3 笔者对丙氨酸氨基转移酶(ALT)异常率增加原因进行 分析时,发现夏季血液ALT的异常率最高.为此,笔者通过 测定血标本在不同温度及不同时间条件下,葡萄糖(Glu), pH值,丙酮酸(PYR),ALT含量的变化,探讨了血标本存放 不同温度及不同时间对ALT检测结果的影响,报告如下. 1材料与方法 1.1标本采集及分组随机选择经过健康询问,自述无继 往病史,ALT快速检测合格的健康献血者2O人,分别采集 50ml血样标本(无明显溶血,脂血),每人份血样标本均匀分 装于13个无抗凝剂的封闭试管中即分成13组,每组2O份 (包含每个人的血样),1组存放于4?冰箱,于存放1,3,8, 12,24,48,72h时间段分别测定Glu,PH值,PYR,ALT的含 量,其余12组按每4组为一个温度环境分别存放于16?室 温(空调),25?室温(暖气),34?孵箱温度环境中,且每种温 度环境中4组按1,4,8,12h时间段分配存放,取出直接测定 Glu,pH值,PYR,ALT的含量后,再转放到4?冰箱中,存 放至12,24,48,72h时间测定各项指标的含量. 1.2仪器及方法应用Ht2酶标仪和ALT赖氏法测定试 剂盒(t-海荣盛)测定ALT;采用电极法应用pHS-3TC数显 酸度计测定pH值;应用全自动生化分析仪(0LYMPUsAU 400)检测Glu,PYR. 1.3统计学分析计量资料均以?S示;应用SPSS11.0 进行数据处理;组间均值的差异采用t检验;组内均值的差 异采用单因素方差分析. 2结果 2.1Glu和pH见表1.血标本存放温度越高,放置的时 间越长,血糖测定值的差异越显着(P<0.05),说明糖酵解 速度越快;34?存放的血标本从存放4h组起其Glu的含量 下降尤为显着(t一4.35P<O.001),后转存4?温度各时 间段测定结果仍有显着变化;始终存放4?温度的血标本其 值变化不显着. 对于pH值,随血标本存放温度升高及保存时间的延 长,pH值下降速度越快(P<O.05),说明因温度升高糖酵 解过程中产生的丙酮酸也相应增多. 2.2PYR和ALT见表2血标本存放4?组PYR测定 值72h内无显着性变化(P>0.05);16.C和25?条件下存 放8h,12h组其PYR值变化显着(Pd0.05);34?温度条件 保存4h,8h,12h组其值变化尤为显着(Pd0.001). ALT测定值在4?组各时间段无明显变化;16.C,25'C 温度环境存放12h组ALT变化明显;34?温度条件保存 4h,8h,12h组其值发生显着性变化(Pd0.001). 3讨论 放置的时间及温度对血液代谢的动态变化影响较大,对 化学检测的结果会产生影响.随着分离血清时间的延长,由 于细胞对葡萄糖的酵解作用,致使血葡萄糖浓度降低[,标 本存放温度的升高,细胞内酶加速释放,酶的活性增强,血葡 萄糖酵解速度加剧;血葡萄糖酵解过程中,不断的产生丙酮 酸],丙酮酸作为ALT检测反应中的中间产物l_{],无论使用 速率法还是赖氏法,其值的高低直接影响着ALT的结果,因 为两种方法中均需要通过丙酮酸与相应的物质反应产生的 结果来判断ALT的活性单位;pH值可直接反映糖酵解过 程中丙酮酸的水平,故通过测定葡萄糖,pH值,丙酮酸, ALT含量的变化,观察采集血标本存放不同温度及不同时