T01总胆红素

T01总胆红素 总胆红素(T-BIL)测定 钒酸盐氧化法 1. 原理 血清中的直接和间接胆红素在一定条件下被钒酸盐氧化成胆绿素，监测反应前后450nm处(胆红素吸 收峰)的吸光度下降可求出总胆红素的浓度。 2. 标本采集: 2.1 标本采集前病人准备:受检者空腹。 2.2 标本种类:血清、肝素或EDTA 血浆。 2.3 标本要求:除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静 脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。标本置37?水浴箱30min, 45min后离心分离血清，上机测试。 3. 标本储存:标本收集后应立即测定，注意避光，否则需冷冻保存，且不可反复冻融。 4. 标本拒收:细菌污染、溶血、脂血标本不能作测定。 5. 试剂 5.1 试剂名称:总胆红素测定试剂盒。 5.2 试剂生产厂家:上海科华东菱诊断用品有限公司。 5.3 包装规格:R1 96ml×2支， R2 48ml×1支。 5.4 试剂盒组成: 组 成 初 始 浓 度 R1:柠檬酸缓冲液 100mmol/L 表面活性剂? 适量 R2:磷酸盐缓冲液 10mmol/L 偏钒酸钠 4mmol/L 5.5 试剂储存条件及有效期:2,8?避光保存，有效期一年。 6. 仪器设备: TOSHIBA 120FR全自动生化分析仪。 7. 操作步骤: 反应类型:终点法 主波长:450nm 次波长:546nm Sample:5ul R1:140ul R2:35ul S，R1:5分钟 ，R2:5分钟 试剂参数详见说明书。 定标操作以及样本检测常规操作，见《生化分析仪操作》。 8. 结果计算: ?A测定 c, ×C O ?A 标准 式中:c—— 测定血清T-BIL浓度，umol/L; —— 标本管吸光度; A测定 A—— 标准管吸光度; 标准 C—— 校准血清中T-BIL浓度，umol/L; 0 ?A ,A2,A1 仪器直接读出测定结果，无需计算。 9. 质量控制:每天使用RANDOX水平1、水平2质控和临床标本同时检测，结果在控制范围内。 0. 生物参考区间:3.42,20.5 umol/L 1 11. 操作性能: 0,684 umol/L; 11.1线性范围: 11.2 精密度: 批内变异系数CV?6%，批间极差?6 %。 11.3 准确度:与质控血清靶值相对偏差应?10 %。 12.超出范围结果处理:如果结果超过684 umol/L，需用蒸馏水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。 13. 注意事项: 13.1 由于胆红素遇光要崩解，样品和标准品要远离直射光源。 13.2本试剂能抗抗坏血酸对测定的干扰(50mg/L以下)，但溶血对测定有影响，若遇到溶血样本，请先做血清空白测试。 13.3请勿将R1与R2混合成工作液使用。 14. 临床意义: 胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血(肝前黄疸)、实质的肝损伤(肝性黄疸)和胆管堵塞(肝后黄疸)都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使60,70%的婴儿血液出现总胆红素增高。