熊胆贝母止咳胶囊抗炎作用及对免疫功能影响的研究

熊胆贝母止咳胶囊抗炎作用及对免疫功能影响的研究 熊胆贝母止咳胶囊抗炎作用及对免疫功能 影响的研究 52中药药理与临床2007;23(4) 血状况大多恢复,其酶学指标是对此时恢复状态的一种描述, 两种指标反应模型的不同阶段,有时两者并不成正相关,两者 的差异往往与其恢复状态有关或由于个体的差异;三,t5内膜 缺血比心外膜缺血体现在酶学指标要重一些. 熊胆贝母止咳胶囊抗炎作用及对免疫功能影响的研究 刘洁,包旭',赵一瑾,钟文秀,何方,陈其宾,包定元 (四川大学华西药学院;四川大学华西基础医学与法医学院;成都610041) 摘要目的:研究熊胆贝母止咳胶囊抗炎作用及对免疫功能的影响.:采用二甲苯致小鼠耳肿胀,角叉菜肢致大鼠 足肿胀进行抗炎作用研究;观察小鼠腹腔内巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬功能以及对环磷酰胺致小鼠溶血素低下的影响.结果:熊 胆贝母止咳胶囊灌胃给药,4.44,2.22(生药)g/能显着减轻二甲苯引起小鼠耳廓的炎症反应,4,44,2.22,1.11(生药)g/能显着 减轻角叉菜胶引起大鼠足爪的炎症反应,4.44,2.22(生药)g/能显着增强巨噬细胞的吞噬能力,4.44,2.22,1.11(生药)g/能对 抗环磷酰胺抑制溶血素产生的作用.结论:熊胆贝母止咳胶囊具有抗炎作用和增强小鼠特异性和非特异性免疫功能. 关健词熊胆贝母止咳胶囊;抗炎;免疫 熊胆贝母止咳胶囊是熊胆,贝母,黄芩,儿茶等6味中药组 方,经现代制剂工艺研制而成的中药制剂,具有清热解毒功效, 本文对其抗炎作用及对免疫功能的影响的实验结果如下. 1材料 1.1试验药物熊胆贝母止咳胶囊,棕黄色粉末(5.5g生药/g 粉末),批号:010601,由四川I华星中医药有限公司提供;阿司匹 林:0.3g/片,由西安博华制药有限责任公司提供,批号: 0003077;左旋咪唑(LMS):25mg/片,批号:980901,由桂林制药 厂提供;环磷酰胺(CTX):200mg/瓶,批号:001121,由上海华联 制药有限公司提供. 1.2动物昆明种小鼠,体重17,21g,合格证号:川实动管质 第67号;sD大鼠,体重160,220g,合格证号:川I实动管质第7O 号;豚鼠:180,200g;均由四川I大学实验动物中心提供. 1.3试剂角叉菜胶:由辽宁省药物研究所赠送;补体:将3只 豚鼠无菌条件下心脏采血混合后离心取血清,用生理盐水稀释 成10%浓度供实验用;Alseverg液及5%鸡红细胞悬液制备:按 常规方法配制. 2方法与结果 2.1熊胆贝母止咳胶囊对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响小鼠 按体重随机分成5组,即熊胆贝母止咳胶囊4.44,2.22,1.11 (生药)g/kg剂量组,阿司匹林0.6g/kg及对照组(NS).按分 组,各组灌胃给予已配制的不同浓度受试物,容量均为20ml/ ,每日一次,连续5天,末次给药后30min用二甲苯涂抹每只 小鼠右耳0.05ml/只致炎,左耳作为自身对照,致炎后30min脱 颈椎处死,以7mm直径打孔器取下每鼠左,右耳片并用电子天 平称重,以左,右耳重量差异示肿胀度,结果如表1. 表I熊胆贝母止咳胶囊对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(i?s) 绸别 剂量鼠数肿胀度 i!i!ig! 对照128.87?3.40 熊胆贝母止咳胶囊4.44(生药)123.47?4.18一 熊胆贝母止咳胶囊2.22(生药)114,95?3.48' 熊胆贝母止咳胶囊1.11(生药)107.26?4.O3 堕旦:竺:!::: 与对照组比较?P(0.05,??P(O.叭(下同) 由表1可见,熊胆贝母止咳胶囊能明显减轻二甲苯致小鼠 耳廓炎症反应,表明熊胆贝母止咳胶囊具有抗炎作用. 2.2熊胆贝母止咳胶囊对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响大 鼠按体重随机分为5组,即熊胆贝母止咳胶囊4.44,2.22,1.11 (生药)g/剂量组,阿司匹林0.6g/kg及对照组(NS).按分 组,各组灌胃给予已配制不同浓度受试物,容量均为20ml/kg, 每日一次,连续5天.末次给药前用排水法测定右足爪致炎前 的体积,给药30min后,各鼠右足皮下注射1%角叉菜胶0.1ml 致炎,分别在致炎后5,3O,60,120,240,360min测定右足爪的体 积,致炎前后体积差为足爪肿胀度.结果如下表2. 表2熊胆贝母止咳胶囊对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响(i?s) ?通讯作者 中药药理与临床2007;23(4)53 由表2结果,熊胆贝母止咳胶囊对角叉菜胶所致的足肿胀 有抑制作用. 2.3熊胆贝母止咳胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影 响"l2小鼠按体重随机分为5组,即熊胆贝母止咳胶囊4.44, 2.22,1.11(生药)kg剂量组,左旋咪唑5mg/kg及对照组 (NS).按分组,各组每鼠灌胃给予已配制不同浓度受试物,容 量均为20ml/kg,每日一次,连续7天,于末次给药后30min,每 鼠腹腔注射5%鸡红细胞悬液0.8ml.注射6h后,将鼠脱颈椎 处死,经腹膜注人生理盐水2ml,并轻柔小鼠腹部,然后于腹膜 中央剪--d'~L,吸取腹腔液滴于载玻片上,置37?孵箱中温育 30min,用生理盐水冲洗,晾干,瑞士染色3,5min,蒸馏水漂洗, 晾干,油镜下观察100个巨噬细胞吞噬鸡红细胞数.并按下公 式计算吞噬百分率及吞噬指数.吞噬百分率=(吞噬鸡红细胞 的巨噬细胞数/100个巨噬细胞)×100%,吞噬指数=被100个 巨噬细胞吞噬的鸡红细胞总数/100个巨噬细胞,结果如表3. 表3熊胆贝母止咳胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(i 由表3结果显示,熊胆贝母止咳胶囊可显着增强小鼠腹腔巨 噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率及吞噬指数,表明熊胆贝母止 咳胶囊可增强小鼠的非特异性免疫功能. 2.4熊胆贝母止咳胶囊对环磷酰胺致小鼠溶血素低下的影响 昆明种小鼠按体重随机分为6组,即熊胆贝母止咳胶囊4.44, 2.22,1.11(生药)剂量组,左旋咪唑5mg/kg,阴性对照组 (NS),空白对照组(NS).腹腔注射5%鸡红细胞悬液0.2ml进 行免疫,同时按分组,灌胃已配制不同浓度受试物,容量均为 20mWkg给药,每日一次,连续7天,并于给药第4日,除空白对 照组外,其余各组各鼠在给药的同时皮下注射环磷酰胺(CTX) 20mg/kg,每日一次,连续4次,末次给药后1h,各组各鼠摘眼球 取血1ml,离心分离血清,并用生理盐水稀释200倍.取稀释血 清1ml加5%鸡红细胞悬液0.5ml和10%补体0.5ml,混合均匀 后置37?恒温箱中温孵30min,再置0?冰箱中约15min后终止 反应,离心,取上清液于紫外分光光度计540nm处比色,测其吸 收值(OD),以吸收值作为判定血清溶血素含量的指标,结果如 表4. 表4熊胆贝母止咳胶囊对环磷酰胺致小鼠溶血素低下的影响(i 药物组与CTX对照组比较?P<0.05,??P<0.01 由表4结果表明,皮下注射环磷酰胺而使小鼠血清吸收度 非常显着地降低,各受试物组与其比较吸收值都明显升高,说明 熊胆贝母止咳胶囊可显着对抗由于环磷酰胺引起溶血素降低 的作用. 3讨论 急性炎症时,局部组织发生血流动力学变化,内皮细胞表达 血管内黏附分子,嗜中性粒细胞黏附,游走,释放炎症介质,毛细 血管扩张,通透性增强引起炎症反应.本实验采用两种急性 炎症模型和药物不同剂量对其抗炎作用进行研究,结果显示熊 胆贝母止咳胶囊可显着减轻由于二甲苯和角叉菜胶引起的炎 症反应,这与之前的研究报道相一致.巨噬细胞作为机体的免 疫效应细胞以及免疫调节细胞,在机体免疫中发挥了重要的作 用,本实验研究结果表明熊胆贝母止咳胶囊可增强正常小鼠巨 噬细胞的吞噬作用以及对抗由环磷酰胺造成小鼠免疫低下引 起溶血素降低的作用,表明熊胆贝母止咳胶囊可增强小鼠非特 异性和特异性免疫功能. 参考文献 1刘兵,宋社吾,王钦茂等.益气通便颗粒免疫增强作用研究.中药药 理与临床,2005;21(3):47,49 2黄枚,陈利铭.851牌劲源片对小鼠免疫功能的影响.福建中医学院 ,2004;14(5):41,43 《中药药理与临床》编辑部关于审稿费的通知 有鉴于《中药药理与临床》杂志作者多数系本专业实验与临床研究人员,熟知相 关行业规范与投稿准则,审稿费的预先收取给 作者与编者都带来麻烦,经研究决定并再次通知:本刊不预先收取审稿费,请作者 不要未接本刊正式通知-I--R~~时汇寄任何费用, 更不要在信函中夹寄现钞. 《中药药理与临床》编辑部