洗液的配制

洗液的配制 1、玻璃器皿的消毒和清洁 ?新购玻璃器皿的处理新购玻璃器皿应用热肥皂水洗刷，流水冲洗，再用1%,2%盐酸溶液浸泡，以除去游离碱，再用水冲洗。对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等，经清水洗净后应注入浓盐酸少许，慢慢转动，使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸，再用水冲洗。 ?污染玻璃器皿的处理 ?一般试管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%石炭酸浸泡，再煮沸30分钟，或在3%,5%漂白粉澄清液内4小时，有的亦可用肥皂或合成洗涤剂洗刷使尽量产生泡沫，然后用清水冲洗至无肥皂为止。最后用少量蒸馏水冲洗。 ?细菌培养用的试管和培养皿可先行集中，用1kg/cm2高压灭菌15,30分钟，再用热水洗涤后，用肥皂洗刷，流水冲洗。 ?吸管使用后应集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时，逐支用流水反复冲洗，再用蒸馏水冲洗。 ?油蜡沾污的器皿，应单独灭菌洗涤，先将沾有油污的物质弃去，倒置于吸水纸上，100?烘干半小时，再用碱水煮沸，肥皂洗涤，流水冲洗。必要时可用二甲苯或汽油去油污。 ?染料沾污的器皿，可先用水冲洗，后用清洁或稀盐酸洗脱染料，再用清水冲洗。一般染色剂呈碱性，所以不宜用肥皂的碱水洗涤。 ?玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡，取出后流水冲洗，再用肥皂或弱碱性煮沸，自然冷却后，流水冲洗。被结核杆菌污染或不易洗净的玻片，可置于清洁液内浸泡后再冲洗。 2、无菌器材和液体的准备将玻璃器具中的培养皿、培养瓶、试管、吸管等按上述方法洗净烘干后，用一洁净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花，装入干净的铝盒或铁盒中，于120?的干燥箱中干燥灭菌2小时，取出备用。对于手术器械、瓶塞、工作服以及新配制的PBS洗液，则采用高压蒸气灭菌法，即在15磅的条件下，加热20分钟。而对于MEM培养液、小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后使用。 3、无菌操作过程在无菌操作过程中，最重要的是要保持工作区的无菌、清洁。因此，在操作前20,30分钟要先启动超净台和紫外灯，并认真洗手和消毒。在操作时，严禁喧哗，严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的止血钳、镊子等。培养瓶应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。对于吸管应先用手拿后1/3处，戴上胶皮乳头，并用酒精灯烧烤之后再吸液体。 4、常用清洁液的配制法 ?重铬酸钾清洁液:可根据不同需要，选用下列的任何一种浓度。先将重铬酸钾溶于水中，再慢慢加入浓硫酸。注意，此时可产生高热，应防止容器破裂。重铬酸钾清洁液除污力强，腐蚀性大，应避免接触皮肤和衣服。为防止吸收空气的水分而变质，此液应贮存于带盖的容器中。 如清洁效力较差，可再加入少量重铬酸钾及浓硫酸，还可继续使用。直到液体变蓝绿色，即不能再用。配制重铬酸钾清洁液时，宜用耐高温的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。使用玻璃器皿时，应特别注意防止产生高热而破裂，切忌用量筒来配制。 ?磷酸三钠将其配成5%,10%水溶液，可用于洗涤玻璃器皿上的油污，但经常使用腐蚀玻璃，使器皿面模糊、毛糙。 ?硝酸清洁液将其配成50%水溶液，可用于清洁微量滴定筒。?乙二胺四乙酸二钠(EDTA钠盐)将其配成5%,10%水溶液，可洗脱粘附于玻璃器皿内壁的白色沉淀物。?尿素溶液尿素是溶解蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤粘附有血液血清等蛋白质的吸管、试管等。 玻璃器皿的洗涤及各种洗液的配制(转) 实验中所使用的玻璃器皿清洁与否直接影响实验结果。由于器皿的不清洁或被污染，往往造成较大的实验误差，甚至会出现相反的实验结果。因此，玻璃器皿的洗涤清洁工作是非常重要的。 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中，用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸溜水冲洗。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来不及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干备用。 1. 初用玻璃器皿的清洗 新购买的玻璃器皿表面常附着有游离的碱性物质，先用肥皂水(或去污粉)洗刷，再用自来水洗净，然后浸泡在1%~2%盐酸溶液中过夜(不少于4h)，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2~3次，在100~130?烘箱内烘干备用。 2. 使用过的玻璃器皿的清洗 (1)一般玻璃器皿 如试管、烧杯、锥形瓶等(包括量筒)。先用自来水洗刷至无污物，再选用大小合适的毛刷蘸取去污粉(掺入肥皂粉)刷洗或浸入肥皂水内。将器皿内外，特别是内壁，细心刷洗，用自来水冲洗干净后再用蒸馏水洗2~3次，热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉与去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗。烘干或倒置在清洁处备用。凡洗净的玻璃器皿，不应在器壁上带有水珠，否则表示尚未洗干净，应再按上述方法重新洗涤。若发现内壁有难以去掉的污迹，应分别使用下述的各种洗涤剂予以清除，再重新冲洗。用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油，要先用皱纹纸擦去或浸在二甲苯内摇晃几次，使油垢溶解。再在肥皂水中煮5~10min，用软布或脱脂棉擦拭，立即用自来水冲洗，然后在稀洗涤液中浸泡0.5~2h,自来水冲去洗涤液,最后用蒸馏水换洗数次,待干后,浸于95%乙醇中保存备用.使用时在火焰上烧去乙醇。用此法洗涤和保存的载玻片和盖玻片清洁透亮，没有水珠。检查过活菌的载玻片或盖玻片应先在2%新洁尔灭溶液中浸泡24h，然后上述方法洗涤方法洗涤与保存。玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需要用洗涤液浸泡数小时，然后用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水洗2~3次后备用。 (2)量器 如吸量管、滴定管、量瓶等。使用后应立即浸泡于凉水中，勿使物质干涸。工作完毕后用流水冲洗，以除去附着的试剂、蛋白质等物质，晾干后浸泡在铬酸洗液中4~6h(或过夜)，再用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2~4次，风干备用。 (3)其他 具有传染性样品的容器(如分子克隆、病毒玷污过的容器)常规先进行高压灭菌或其他形势的消毒，再进行清洗。盛过各种毒品(特别是剧毒药品和放射性核素物质的容器)必须经过专门处理，确知没有残余毒物存在时方可进行清洗。否则使用一次性容器。装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在2%煤酸皂溶液(来苏水)或0.25%新洁尔灭消毒液内24h或煮沸0.5h,再用上述方法洗涤。 3. 洗涤液的种类和配制方法 (1)铬酸洗液 (重铬酸钾一硫酸洗液，简称洗液或清洁液)广泛用于玻璃器皿的洗涤，常用的配制方法有4种 ? 取100mL工业浓硫酸置于烧杯内，小心加热，然后慢慢地加入重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解后冷却，贮于带玻璃塞的细口瓶内。 ? 称取5g重铬酸钾粉末置于250mL烧杯中，加水5mL，尽量使其溶解。慢慢加入100mL浓硫酸，边加边搅拌，冷却后贮存备用。 ? 称取80g重铬酸钾，溶于1000mL自来水中，慢慢加入工业浓硫酸1000mL，边加边搅拌。 ? 称取200g重铬酸钾，溶于500mL自来水中，慢慢加入工业浓硫酸500mL，边加边搅拌。 (2)浓盐酸(工业用) 可洗去水垢或某些无机盐沉淀。 (3)5%草酸溶液 可洗去高锰酸钾的痕迹。 (4)5%~10%磷酸三钠(NaPO?12HO)溶液 342 可洗涤油污物。 (5)30%硝酸溶液 洗涤CO测定仪器及微量滴管。 2 (6)5%~10%乙二铵四乙酸二钠(EDTA)溶液 加热煮沸可洗去玻璃器皿内壁的白色沉淀物。 (7)尿素洗涤液 为蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤盛蛋白质制剂及血样的容器。 (8)酒精与浓硝酸混合液 最适合于洗净滴定管，在滴定管中加入3mL酒精，然后沿管壁慢慢加入4mL浓硝酸(相对密度1.4)，盖住滴定管管口。利用所产生的氧化氮洗净滴定管。 (9)有机溶液 如丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗去油漆污垢。 (10)氢氧化钾-乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠溶液 它是两种强碱性的洗涤液，对玻璃器皿的侵蚀性很强，清除容器内壁污垢，洗涤时间不宜过长。使用时应小心谨慎。 上述洗涤液可多次使用，但使用前必须将待洗涤的玻璃器皿先用水冲洗多次，除去肥皂液、去污粉或各种废液。若仪器上有凡士林或羊毛脂时，应先用软纸擦去，然后再用乙醇或乙醚擦净。否则会使洗涤液迅速失效。例如肥皂水、有机溶剂(乙醇、甲醛等)及少量油污物均会使重铬酸钾-硫酸液变绿，降低洗涤能力。 4. 细胞培养级玻璃器皿的洗涤处理 (1)按上述方法对玻璃器皿进行初洗，晾干。 (2)将玻璃器皿浸泡入洗液中，24~48h。注意玻璃器皿内应全部充满洗液，操作时小心勿将洗液不溅到衣服及身体各部。 (3)取出，沥去多余的洗液。 (4)自来水充分冲洗。 (5)排列6桶水，前3桶为去离子水，后3桶为去离子双蒸水。 (6)将玻璃器皿依次过6桶水，玻璃器皿在每桶中过6~8次。 (7)倒置，60?烘干。 (8)用硫酸纸包扎，160?干烤3h。 洗涤液的种类和配制方法 (1)铬酸洗液(重铬酸钾-硫酸洗液，简称为洗液)广泛用于玻璃仪器的洗涤。常用的配制方法有下述四种: ? 取100mL 工业浓硫酸置于烧杯内，小心加热，然后小心慢慢加入5g 重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解后冷却，贮于具玻璃塞的细口瓶内。 ? 称取5g 重铬酸钾粉末置于250mL 烧杯中，加水5mL，尽量使其溶解。慢慢加入浓硫酸100mL，随加随搅拌。冷却后贮存备用。 ? 称取80g 重铬酸钾，溶于1000mL 自来水中，慢慢加入工业硫酸100mL(边加边用玻璃棒搅动)。 ? 称取200g 重铬酸钾，溶于500mL 自来水中，慢慢加入工业硫酸500mL(边加边搅拌)。 (2)浓盐酸(工业用):可洗去水垢或某些无机盐沉淀。 (3)5,草酸溶液:用数滴硫酸酸化，可洗去高猛酸钾的痕迹。 (4)5,,10,磷酸三钠(NaPO?12HO)溶液:可洗涤油污物。 342 (5)30,硝酸溶液:洗涤CO测定仪器及微量滴管。 2 (6)5,,10,乙二胺四乙酸二钠(EDTA,Na2)溶液:加热煮沸可洗脱玻璃仪器内壁的白色沉淀物。 (7)尿素洗涤液:为蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤盛蛋白质制剂及血样的容器。 (8)酒精与浓硝酸混合液:最适合于洗净滴定管，在滴定管中加入3mL 酒精，然后沿管壁慢慢加入4mL 浓硝酸(比重1.4)，盖住滴定管管口，利用所产生的氧化氮洗净滴定管。 (9)有机溶剂:如丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗去油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗脱油漆的污垢。 (10)氢氧化钾的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠溶液:是两种强碱性的洗涤液，对玻璃仪器的侵蚀性很强，清除容器内壁污垢，洗涤时间不宜过长。使用时应小心慎重。上述洗涤液可多次使用，但是使用前必须将待洗涤的玻璃仪器先用水冲洗多次，除去肥皂、去污粉或各种废液。若仪器上有凡士林或羊毛脂时，应先用纸擦去，然后用乙醇或乙醚擦净后才能使用洗液，否则会使洗涤液迅速失效。例如:肥皂水，有机溶剂(乙醇、甲醛等)及少量油污都会使重铬酸钾-硫酸洗液变成绿色，减低洗涤能力。