HPLC法测定胃复春片中人参皂苷Rb1的含量[权威资料]

HPLC法测定胃复春片中人参皂苷Rb1的含量[权威资料] HPLC法测定胃复春片中人参皂苷Rb1的含量 摘 要:目的 采用高效液相色谱法测定胃复春片中人参皂苷Rb1的含量。方法 采用YMC-Pack Polymer C18 (250×4.6mm 5,滋m)色谱柱;乙腈-水-磷酸(20:80:0.01)为流动相;波长为203nm。结果 人参皂苷Rb1在1,20μg?mL-1范围内呈良好的线性关系， 人参皂苷Rb1的平均回收率为99.5%。结论 本方法是一种简便、准确、安全的测定胃复春片中人参皂苷Rb1含量的方法。 关键词:胃复春片;人参皂苷Rb1;高效液相色谱法 胃复春片由红参、香茶菜、枳壳(麸炒)组成。 胃复春片具有健脾益气、活血解毒等功效。胃复春片用于治疗胃癌、癌前期病变及胃癌手术后辅助治疗，慢性萎缩性胃炎、其它消化系统肿瘤的辅助治疗。胃复春片能减轻致癌物质N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对大鼠胃粘膜的损害，降低胃癌癌前期病变的发病率。长期服用胃复春片可抑制幽门螺旋杆菌;抑制醋酸致小鼠扭体次数;增加大鼠胃液分泌量。红参是参的熟用品，具有大补元气、益血、养心安神、强心、健胃、镇静、复脉固脱、益气摄血等功效。红参具有提高脑、体力活动能力、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等作用。红参可用于体虚欲脱、气短喘促、气不摄血、崩漏下血、心力衰竭、心原性休克自汗肢泠、精神倦怠、食少吐泻、气虚作喘或久咳等。人参皂苷具有抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、抗病毒、美容等药理作用[1-8]。文章用高效液相色谱法对胃复春片中的人参皂苷Rb1的含量进行了测定。 1 仪器与试剂 QT3120K脱气可调型超声波清洗器(天津市瑞普电子仪器公司);TH-W50GC多功能全自动纯水机(武汉市天虹仪表有限公司);RV10 数显型立式旋转蒸发仪 (上海东戈 姆科贸发展有限公司);JULABO 实验室温度控制器(优莱博技术(北京)有限公司);CC-100分析型色谱柱温箱(成都纳杰科技有限公司); Smartline高效液相色谱系统(北京创新通恒科技有限公司);AUX220 分析天平(上海东戈姆科贸发展有限公司)。 2 实验方法与结果 2.1 液相色谱条件 依据查阅文献[9-11]及考查的结果，确定色谱条件如下:色谱柱为YMC-Pack Polymer C18(250×4.6mm 5,滋m);乙腈-水-磷酸(20:80:0.01)为流动相;检测波长为203nm;流速1.0mL?min-1;柱温:30?。理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不得低于2000。 2.2 提取方法确定 取胃复春片，研碎，分成三份置索氏提取器中，分别加三氯甲烷20ml，加热回流3小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，分别精密加入水饱和正丁醇50ml，密塞，放置2小时，分别超声处理30分钟、40分钟、50分钟，滤过，滤液置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至5毫升，摇匀，微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。结果表明超声处理30分钟、40分钟、50分钟人参皂苷Rb1含量无明显差异，所以选择超声处理30分钟。 2.3 供试品溶液的制备 取胃复春片，研碎，置索氏提取器中，加三氯甲烷20ml，加热回流3小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，精密加入水饱和正丁醇50ml，密塞，放置2小时，超声处理30分钟，滤过，滤液置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至5毫升，摇匀，微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。 2.4 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rb1对照品约1mg，置100mL容量瓶中，用流动相超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL溶液中含人参皂苷Rb1 10μg)。 2.5 阴性干扰试验 香茶菜、枳壳(麸炒)分别加水煎煮两次，香茶菜每次3小时，枳壳(麸炒)每次1小时，过滤，合并滤液，浓缩至相对密度1.13-1.18(20)的清膏，加淀粉、硬脂酸镁混合均匀，制粒，干燥，压片，即得阴性制剂。将阴性制剂研碎，置索氏提取器中，加三氯甲烷20ml，加热回流3小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，精密加入水饱和正丁醇50ml，密塞，放置2小时，超声处理30分钟，滤过，滤液置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至5毫升，摇匀，微孔滤膜(0.45μm)滤过，按色谱条件测定。结果表明:在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与人参皂苷Rb1相同保留时间处不存在吸收峰，说明此方法具有较强的专属性。 2.6 曲线的制备 制备浓度为1、2、4、8、12、16、20μg?mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入液相色谱仪，色谱图。以峰面积积分值A为纵坐标，进样浓度(μg?mL-1)为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，人参皂苷Rb1对照品在1,20μg?mL-1范围内线性关系良好。 2.7 精密度试验 精密吸取人参皂苷Rb1对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.66%。结果表明，本实验精密度良好。 2.8 重现性试验 分别称取同批胃复春片样品6份，分别制备成供试品溶液，按色谱条件测定含量，并计算样品的RSD值为0.88%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。 2.9 稳定性试验 取供试品溶液，分别在0，2，4，8，10h精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进行测定，供试品人参皂苷Rb1峰面积积分值的RSD为0.53%。结果表明人参皂苷Rb1至少在10h内稳定。 2.10 回收率试验 采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的人参皂苷Rb1对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量(同时测定样品含量)，计算回收率。6次测定的平均回收率为99.5%，RSD为0.75%。 2.11 耐用性试验 用SPOLAR C18 HPLC Column(4.6×250mm 5μm)液相色谱柱、CAPCELL PAK C18 MG?(4.6×250mm 5,滋m)液相色谱柱测定同一样品，峰形及柱效均良好，表明不同的色谱柱测定时，色谱行为无显著性差异。 2.12 样品含量测定 依照上述含量测定方法，测定胃复春片三批样品中人参皂苷Rb1的含量，结果三批样品的含量分别为0.27μg?片-1、0.29μg?片-1、0.28μg?片-1。 3 结束语 分别考察乙腈-水-磷酸(50:50:0.01)，乙腈-水-磷酸(20:80:0.01)，甲醇-乙腈-0.05%磷酸水溶液(15:25:60)不同比例的流动相，结果以乙腈-水-磷酸(20:80:0.01)为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-水-磷酸(20:80:0.01)为流动相。本方法是一种简便、准确、安全的测定胃复春片含量的方法。胃复春片中人参皂苷Rb1的含量不少于0.26μg?片-1。 参考文献 [1]廖义林，张建平，孙新明.人参皂苷诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞的分化[J] .解剖学，2010，33 (2):207-209. [2]刘汉清，陈方芳，苗宁舒，等.人参皂苷C-K急性毒性及其致肺水肿作用的研究[J] .烟台大学学报，2011，24 (1):59-63. [3]周明，杨斌，姜蓉，等. 人参皂苷Rg1延缓造血干细胞衰老及其相关机制[J] .中华医学杂志，2010，90 (48):3421-3425. [4]张大雷，杨蓓，吴磊，等.人参皂苷保护小鼠精原细胞氧化损伤的研究[J] .中国药理学通报，2010，26 (8):1014-1016. [5]张凤普.人参皂苷的作用机理研究[J] .临床合理用药，2010，3 (21):158. [6]孟凡丽，苏晓田，刘发贵，等. 人参皂苷对醛糖还原酶的抑制作用[J] .中国药理学通报，2011，27 (6):827-830. [7]赵保胜，桂海水，徐暾海.人参皂苷Rg1抗炎作用实验研究[J] . 人参研究，2010 (4):2-4. [8]王振华，赵卫平，刘箐，等.人参皂苷Rh2对小鼠X射线辐射损伤的防护作用[J] .中华放射医学与防护，2010，30 (2):143-146. [9]任睿，贾宜军，金红宇.HPLC测定益气复脉口服液中红参的含量[J].现代食品与药品，2006. [10]何福根，方罗，林能明.高效液相色谱法测定参附注射液中人参皂苷3组分的含量[J].医药导报，2006. [11]韩江敏，林能明，芦柏震，等.反相高效液相色谱法测定含红参组方注射液中人参皂苷三组分含量[J].医药导报，2007，5. 文档资料:HPLC法测定胃复春片中人参皂苷Rb1的含量 完整下载 完整阅读 全文下载 全文阅读 免费阅读及下载 阅读相关文档:基于组态软件的PLC数据采集处理的控制应用 预防煤矿地质图纸资料失密和泄密的调研与思考 苗木培育相关技术探讨 青冈县三北防护林体系工程建设的调研报告 优质护理对冠心病患者的影响研究 输配电工作学习实践科学发展观的探讨 如何加强我国企业的营销管理 对会计集中核算模式的利弊分析 强化建筑工程有效管理探讨 小区风场对建筑微气候的影响 研究桥涵伸缩缝施工技术与改进 公路隧道施工的质量控制措施分析 浅谈青藏线关角沟小半径曲线养护 电力公司用电检查营销策略探析 浅谈园林造价工程量计算的应用张丽洁 基于新生儿重度窒息特殊情况的抢救及护理思路24例 浅谈对公路桥梁施工管理的几点 感谢你的阅读和下载 *资源、信息来源于网络。本文若侵犯了您的权益，请留言或者发站内信息。我将 尽快删除。*