【doc】高硒对雏鸡红细胞免疫功能红细胞总数及血红蛋白含量的影响

【doc】高硒对雏鸡红细胞免疫功能红细胞总数及血红蛋白含量的影响 高硒对雏鸡红细胞免疫功能红细胞总数及 血红蛋白含量的影响 中国兽医科学2008,38(06):535—539 ChineseVeterinaryScience 中图分类号:S816.72文献标识码:A文章编号:l673—4696(2008)06—0535—05 高硒对雏鸡红细胞免疫功能红细胞总数及 彭 血红蛋白含量的影响 西,柏才敏,李敏,陈涛,龚涛,崔恒敏 (四J1I农业大学动物医学院,四川1雅安625014) 摘要:将1日龄艾维茵肉鸡健雏300只随机分为5:}组,分别以基础日粮(含硒 o.2mg/kg)和高硒日粮 (含硒1,5,10,15mg/kg)饲喂6周,观察研究了高硒对红细胞免疫功能,红细胞总数和 血红蛋白含量影响的 动态变化.结果显示,当日粮中硒含量超过5mg/kg时,IC花环率升高,C3b受体花环 率,红细胞总数和血 红蛋白含量降低.明,雏鸡摄入过量硒会导致红细胞免疫黏附功能降低,并表现 贫血症状. 关键词:高硒;红细胞免疫功能;红细胞总数;血红蛋白;雏鸡, Effectsofhighdietaryseleniumontheimmunefunctionoferythrocyte, totalcountoferythrocyteandcontentofHbinchickens PENGXi,BAICai—min,LIMin,CHENTao,GONGTao,CUIHeng—min (CollegeofVeterinaryMedicine,SichuanAgriculturalUniversity,Ya'an625014,China) Abstract:Theredcellimmuneadherencefunction(RCIA),countoferythrocyteandcontento fhemo— globin(Hb)wereexaminedinone-day— oldAAchickensbyfeedingwithsufficient(0.2mg/kg),Orexcess selenium(1,5,10,and15mg/kg),assodiumseleniteinthedietstofivegroupsofchickens(60ea ch)for6 weeks.Excessselenium(morethan5mg/kg)intakeincreasedtheratioofICrosetteandreduce dtheratio ofC3bRrosette,countoferythrocyteandcontentofHbcomparedwiththesufficientselenium intake group.TheresultsshowedthatexcessseleniumintakedecreasedtheRCIAandinducedanemi ainchickens. Keywords:highdietaryselenium;immunefunctionoferythrocyte;totalcountoferythrocyte ;Hb; chicken 自1981年美国学者Siegel提出红细胞免疫系 统以来口J,红细胞免疫功能研究的进展迅速.业已 证实,红细胞具有识别,黏附,浓缩,杀伤异己和清除 免疫复合物的能力,并参与机体的免疫调控.目前, 红细胞免疫功能在疾病发生,发展中的作用已受到 国内外学者普遍关注,研究多见于人类疾病;动物疾 病对红细胞免疫功能影响的研究报道多见于畜禽的 某些传染病L2J.近几年,微量元素对红细胞免疫功 能的影响开始受到关注E4-5].有学者报道,适量补硒 可促进红细胞的免疫黏附功能,促进抗体有效产 生L6],但尚未见有梯度高硒日粮对雏鸡红细胞免疫 功能影响的报道.笔者研究了饲喂含硒1mg/kg 以上高硒日粮对艾维茵肉雏鸡红细胞免疫黏附功 能,红细胞(RBC)总数和血红蛋白(Hb)含量的影 响,并探讨了高硒对红细胞功能影响的机制. 1材料与方法 1.1实验动物和日粮 选用1日龄艾维茵肉鸡健雏300只(购自成都 温江正大种禽场),随机分为5组,每组6O只,其中 2O只用于全程观察,其余4O只定期剖杀,做血液生 化指标的动态观察.各组雏鸡分别饲养于木制禽笼 内,自由采食,饮用去离子水,常规饲养管理,试验为 期6周. 收稿日期:2008一O1—29;修回日期:2008—04—15 基金项目:四川省教育厅重点项目(2006A007) 作者简介:彭西(1973一),女,四川岳池人,讲师,博士,E— mail:pengxi197313@163.com.*通讯作者,主要从事禽病免疫 病理学研究,E-mail:hmcui@scfc.edu 536中国兽医科学第38卷 基础日粮参照肉鸡NRC(1994)的营养标准,即 粗蛋白208g/kg,代谢能12.72MJ/kg,钙10.2 g/kg,总磷7.9g/kg,硒0.2mg/kg.对照组饲喂基 础日粮,在基础日粮中分别添加硒构成4个高硒组 日粮(I,?,?,?组日粮含硒量分别为1,5,10,15 mg/kg).硒源为分析纯NaSeO.晶体. 1.2红细胞免疫功能的测定 于试验开始后的第7,14,28,42d,各组随机抽 取5只鸡颈静脉采血,40g/IEDTA二钠抗凝,用 红细胞C3b花环和红细胞免疫复合物(IC)花环试 验红细胞免疫功能[7].测定用的冻干补体致敏 酵母多糖和冻干未致敏酵母多糖购于上海长海医院 免疫室. 1.3RBC及Hb含量的测定 于试验开始后的第7,14,21,28,35,42d,各组 随机抽取5只鸡颈静脉采血,按文献E8]的方法进行 RBC和Hb含量的测定. 1.4数据处理 用SPSSl1.0统计软件分析测定结果,采用单 因素方差分析法(one—wayANoVA)确定组间的差 异显着性. 2结果 2.1红细胞C3bR花环率的变化 当日粮硒含量为1mg/kg时,I组雏鸡的红细 胞C3bR花环率仅在7日龄时高于对照组,14,28 和42日龄时略低于对照组,差异均不显着(P> 0.05).当日粮硒含量超过5mg/kg时,雏鸡红细 胞C3bR花环率降低,并与日粮硒含量呈负相关.4 个时间段的检测结果中,?组雏鸡的红细胞C3bR 花环率均较对照组低,但差异不显着(P>0.05);? 组雏鸡红细胞C3bR花环率在28日龄时显着低于 对照组(P<0.05),IV组在7日龄时即显着低于对 照组(P<0.05),14,28和42日龄时极显着低于对 照组(P<0.01).见表1. 2.2红细胞IC花环率的变化 随着日粮硒含量的增高,雏鸡Ic花环率也升 高,并与日粮硒含量间存在剂量一效应关系,但随着 试验期的延长,Ic花环率的升高渐趋缓和.7日龄 时,仅?组与对照组差异极显着(P<0.O1);14,28 日龄时,?组显着或极显着(P<0.05或P<0.O1) 高于对照组,?组极显着高于对照组(P<0.O1);42 日龄试验结束时,各高硒组与对照组差异均不显着 (P>0.05).见表1. 2.3红细胞总数的变化 ,雏鸡红细胞总 当日粮硒含量超过5mg/kg时 数降低,并与日粮硒添加量呈负相关,试验后期,降 低趋势渐趋缓和.7日龄时,?,?组与对照组差异 极显着(P<0.O1);14,21日龄时,?,?,?组极显 着低于对照组(P<0.O1);28日龄时,仅?组显着低 于对照组(P<0.05);35日龄时,?组极显着低于对 照组(P<0.01),II,?组显着低于对照组(P< 0.05);至42日龄试验结束时,各试验组间差异不显 着(P>0.05).见表2. 表1各组试验雏鸡的红细胞C3bR花环率及lC花环率 Table1RatiooferythrocyteC3bRrosetteandratiooferythrocyteICrosetteinchickensinthed ifferentexperimentalgroups 同一列中右上角标有不同小写字母的数据之间差异显着(P<0.05),标有不同大写字母的数据之间差异极显着(P<0.01).下表同 Thedifferencebetweenmeanswiththedifferentsmallletterwithinacolumnissignificant(P <O.05).andthedifferencebetweenmeanswith thedifferentcapitalletterisverysignificant(P<O.01).Thesameasfollows 2.4血红蛋白含量的变化 高硒对血红蛋白含量的影响与对红细胞总数的 影响相似.当日粮硒含量超过5mg/kg时,血红蛋 白含量不同程度地降低,与日粮硒含量呈负相关,至 第6期彭西等:高硒对雏鸡红细胞免疫功能红细胞总数及血红蛋白含量的影响537 试验后期,变化趋势减弱.7,14,21,28,35日龄的 检测结果显示,?组雏鸡的血红蛋白含量明显降低, 与对照组比较差异极显着(P<0.01),1I,HI组在7, 14,21日龄时极显着(P<0.O1)低于对照组,?组在 35日龄时极显着(P<o.O1)低于对照组;42日龄 时,仅?组显着(P<O.05)低于对照组,其余各高硒 组雏鸡与对照组间差异不显着(P>0.05).结果见 表2. 表2各组试验雏鸡的红细胞总数及血红蛋白含量 Table2ThecountoferythrocyteandHbcontentinchickensinthedifferentexperimentalgrou ps 3讨论与结论 3.1高硒对红细胞免疫黏附功能的影响 红细胞不仅具有黏附,杀伤抗原,清除免疫复合 物的作用,而且参与机体免疫,其自身还存在完整的 自我调控系统_1].本试验结果表明,摄人1mg/kg 硒在短期内有升高雏鸡红细胞C3bR花环率的趋 势,而当饲料硒含量超过10mg/kg后,可导致雏鸡 C3bR花环率下降,且饲料硒的含量越高,C3bR花 环率下降的时间越早,下降幅度越大,c3bR花环率 与饲料硒含量之间存在着负相关(见表1),表明高 剂量亚硒酸钠摄入对雏鸡红细胞免疫功能有抑制作 用.本试验结果与周惠萍等对亚慢性硒中毒猪的 研究结果一致,杨鸿等研究发现,给新城疫免疫雏 鸡饮水中添加亚硒酸钠溶液至1mg/kg时,红细胞 免疫黏附功能虽高于对照组,但较0.75mg/kg组 有所降低.表明硒对c3bR有激活作用,适量的硒 可以提高血清中红细胞免疫黏附促进因子的活性, 增强红细胞的免疫黏附功能,但当硒添加量过高时, 则使红细胞的免疫黏附功能降低. 郭峰指出,红细胞免疫功能的降低分为原发 性和继发性两种,原发性功能损伤与Cab受体数量 减少和功能损伤有关,继发性功能损伤与C3b受体 和IC结合后被占位覆盖有关.笔者认为,本试验高 硒导致的红细胞黏附能力下降可能既有原发性又有 继发性因素.一方面,C3b花环率的高低与I型补 体受体(CR1)的活性和数量有关口;另一方面,高 剂量亚硒酸盐可引起DNA断裂,导致DNA合成抑 制,细胞生长受阻?,本研究中高硒组红细胞总数 的显着降低也佐证了这一点,而DNA的合成抑制 会相应影响其蛋白质合成功能,使红细胞膜上C3b 受体的生成数量减少或质量降低;同时,硒能取代细 胞膜上一SH和一S—S一等基团中的硫,随着机体 内硒含量的增多,细胞膜上的硫大量被硒取代,从而 导致细胞膜的结构和功能受到破坏_1引,C3b受体的 功能也可直接受到影响,引起原发性功能损伤.有 资料报道,摄入高剂量硒可增加硒在脾,肝的沉 积_1,并损伤肝,脾的结构及功能,使红细胞上 黏附的IC不能在肝,脾及时被巨噬细胞吞噬清除, 造成对红细胞膜上C3b受体的占位与覆盖,引起继 发性功能损伤.由于红细胞的免疫功能同时受红细 胞免疫调节因子,细胞因子和神经内分泌系统等多 种因素的影响.,所以高锌对红细胞免疫黏附能 力的影响机制可能更为复杂,有待进一步深入探讨. 本试验结果表明,高硒导致雏鸡红细胞Ic花环 率持续升高,而且加硒剂量与Ic花环率之间存在正 相关,周惠萍等报道,亚慢性硒中毒猪红细胞IC 花环率无明显变化,可能与硒添加量不同有关.高 硒组IC花环率升高的机理可能是:?Ic花环率的 高低与血液中Ic的含量有关,大量资料显示,高硒 会导致心,肝,肾等组织变性或坏死_1H],机体内这 些组织细胞和亚细胞结构的破坏必然导致抗原物质 增多.?正常情况下,大多数IC进入体内后会很快 与红细胞结合,并迅速被运送到肝,脾等组织加以清 除.有学者认为,红细胞内含有高浓度过氧化氢酶 及超氧化物歧化酶,能清除吞噬过程中产生的氧化 538中国兽医科学第38卷 代谢产物,从而促进吞噬作用引,而硒中毒时,红细 胞和血清中GSH—Px活力的下降会导致IC清除障 碍.此外,肝,脾内过氧化物酶活性的改变同样 会影响巨噬细胞功能的正常发挥,使其不能将IC有 效清除,因此,硒中毒导致雏鸡的红细胞IC花环率 升高. 42日龄的检测结果显示,各高硒组的C3bR花 环率下降和IC花环率的上升趋势缓和,仅有高硒? 组显着低于对照组,其余3个高硒组与对照组比较 差异不显着,表明,随着试验期的延长,高硒对红细 胞免疫黏附功能的损伤逐渐减弱.笔者认为,可能 是因为雏鸡随年龄增长对高硒的耐受能力逐渐增强 的缘故. 3.2高硒对红细胞总数和血红蛋白含量的影响 红细胞总数和血红蛋白含量为判断机体是否贫 血的指标.检测结果显示,当日粮中的硒含量为1 mg/kg时,雏鸡红细胞总数和血红蛋白含量与对照 组无显着差异,表明对红细胞不产生明显的毒性作 用,但当硒含量超过5mg/kg时,雏鸡红细胞总数 和血红蛋白含量降低与日粮硒含量呈负相关,表明 过高剂量的日粮硒可致雏鸡贫血.Halverson等[20l 观察到断乳大鼠摄食硒含量达8mg/kg以上时,血 红蛋白含量降低,血中胆红素含量升高.章子贵 等[2发现饮用含亚硒酸钠7.5mg/L的饮水5个 月,对大鼠造血机能的影响不明显,与本试验中高剂 量硒明显影响雏鸡造血功能的结果有差异,但与 Halverson的结果相似.这可能与实验动物不同及 硒的摄人方式不同有关,也可能与不同年龄动物对 硒的耐受性不同有关.本试验结果显示,随着雏鸡 日龄的增加,对高硒的毒性作用表现出耐受性,至 42日龄试验结束时,仅有?组的血红蛋白含量显着 低于对照组,而I,?,?组均与对照组差异不显着. 硒中毒影响雏鸡造血机能和引起贫血的机理可 能与下列因素有关:?硒中毒时,机体内的甲基转移 作用受阻[1,并由此引起维生素B和叶酸代谢障 碍;?硒能影响维生素C和维生素K的代谢,硒中 毒时,维生素C减少可直接造成血管损伤[2;?王 子健等[2.观察到在硒中毒病人的血红蛋白中有较 多的硒分布,红细胞中的高浓度硒会促进自由基的 产生,从而产生细胞毒性作用;?高浓度硒引起的抗 氧化酶活性下降导致红细胞更容易受到自由基攻 击;?与肝对红细胞的破坏作用加强有关. 参考文献(Refefences) r1]SIEGELI,TIANLiu—liu,NORBERTG.Thered—cellimmune system[J].Lancet,1981,318(9):556—559. 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