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实验二 耐盐菌的培养实验.doc

2017-10-20 2页 doc 12KB 54阅读

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实验二 耐盐菌的培养实验.doc实验二 耐盐菌的培养实验.doc 试验二、耐盐菌的培养试验 一、实验目的:熟练掌握斜面接种技术和稀释平板涂布技术 二、实验概述: 试验仪器:高压锅,酒精灯,接种环,显微镜,超净工作台,培养皿,三角瓶、吸管、玻璃涂布棒、试管(15ml) 实验试剂:修饰过的Gibbons培养基、生理盐水 三、实验方法和步骤: (一)斜面接种: 1、点燃酒精灯 2、将菌种试管和待接种的斜面试管,用大拇指和食指,中指,无名指握在左手中,试管底部放在手掌内并将中指夹在俩试管之间,使斜面向上盛水平状态,在火焰便用右手松动试管塞以利于接种...
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实验二 耐盐菌的培养实验.doc 试验二、耐盐菌的培养试验 一、实验目的:熟练掌握斜面接种技术和稀释平板涂布技术 二、实验概述: 试验仪器:高压锅,酒精灯,接种环,显微镜,超净工作台,培养皿,三角瓶、吸管、玻璃涂布棒、试管(15ml) 实验试剂:修饰过的Gibbons培养基、生理盐水 三、实验方法和步骤: (一)斜面接种: 1、点燃酒精灯 2、将菌种试管和待接种的斜面试管,用大拇指和食指,中指,无名指握在左手中,试管底部放在手掌内并将中指夹在俩试管之间,使斜面向上盛水平状态,在火焰便用右手松动试管塞以利于接种时拔出。 3、右手拿接种环通过火焰烧灼灭菌,在火焰便用右手手掌边缘和小指,小指和无名指分别夹持棉塞将其取出,并迅速烧灼管口(取试管棉塞或试管帽时,要缓缓拔出,不宜用力过猛。 4、将灭菌的接种环伸入菌种试管内,现将环接触试管内壁,或未装菌的的培养基,使接种环的温度下降达到了冷却的目的,然后再挑取少量菌苔。将接种环推出菌种试管,迅速伸入待接种的斜面试管,用环在斜面上自试管底部向上端轻轻的划曲线 5、接种环推出斜面试管,在用火焰灼烧管口,并在火焰边将试管塞上,将接种环逐渐接近火焰在灼烧,如果接种环上沾的菌体较多时,应先将环在火焰边烤干,然后灼烧,以免未烧死的菌中飞溅出污染环境, (二)稀释平板涂布技术法: 1、融化培养基:将已配置好灭菌后的培养基在电炉或水浴锅中加热融化 2、倒平板:待培养基冷却至50?左右时,按无菌操作法倒平板(大约15ml,不超过平皿高度的1/3),平置,待凝固。 3、稀释菌液:用10ml无菌吸管吸取1ml已充分混匀的菌悬液(待测样品),精 4 确地放至盛有9ml无菌水的试管中,此即为10倍稀释。将试管振荡,使菌液充分混匀。 4、取样:从稀释管中取0.2ml(大约吸管两滴)菌悬液滴入无菌平皿中,用涂布棒均匀涂布。 5、涂布:将0.2ml菌悬液小心地滴在平板培养基表面中央位置(0.2 ml的菌液要全部滴在培养基上,若吸移管尖端有剩余的,需将吸移管在培养基表面上轻轻地按一下便可)。右手拿无菌涂棒平放在乎板培养基表面上,将菌悬液先沿一条直线轻轻地来回推动,使之分布均匀,然后改变方向沿另一垂直线来回推动,平板内边缘处可改变方向用涂棒再涂布几次。 6、培养:完毕后,盖上培养皿盖,在超净工作台上静置10min,倒置于恒温培养箱中培养。 5
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