hiv快诊检测点作业指导书

hiv快诊检测点作业指导书 凉山彝族自治州HIV快诊检测点 实验室作业指导书 凉山州人民政府防治艾滋病工作委员会办公室 1 凉山州疾病预防控制中心 中国-默沙东艾滋病合作项目凉山办公室 二0一一年七月 凉山州HIV快速检测点实验室作业指导书 目 录 前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„(1) 凉山州艾滋病快速检测样本的接收、登记与运送„„„„„„„„„„„(2) 凉山州艾滋病快诊检测点检测步骤及要求„„„„„„„„„„„„„„(3) 凉山州HIV抗体快速检测流程图„„„„„„„„„„„„„„„„„„(6) ) 凉山州HIV抗体快速检测质量控制„„„„„„„„„„„„„„„„„(7凉山州HIV抗体快速检测实验室消毒与污物处理„„„„„„„„„„„(9) 凉山州HIV抗体快速检测实验室生物安全及职业暴露„„„„„„„„„ (10) 凉山州HIV抗体快速检测实验记录及结果上报„„„„„„„„„„„„ (13) 凉山州HIV快诊检测实验室#管理#„„„„„„„„„„„„„„„„ (14) 凉山州HIV抗体快速检测保密程序„„„„„„„„„„„„„„„„„ (15) 凉山州艾滋病检测点资格审批申请表„„„„„„„„„„„„„„„„(16) 凉山州医疗卫生机构HIV常规检测登记表„„„„„„„„„„„„„„ (19) 凉山州HIV快速实验原始记录表„„„„„„„„„„„„„„„„„„ (20) 凉山州HIV抗体筛查报告单„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ (21) 凉山州艾滋病检测点HIV抗体复检检测单„„„„„„„„„„„„„„ (22) 凉山州艾滋病检测各类试剂入库、领取使用登记表„„„„„„„„„„ (23) 凉山州艾滋病检测实验室仪器使用温度记录„„„„„„„„„„„„„(24) 凉山州艾滋病检测实验室废弃物及生物垃圾处理记录表„„„„„„„„(25) 2 四川省艾滋病检测点审评验收情况一览表„„„„„„„„„„„„„„(26) 凉山州HIV抗体检测月报表„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ (27) 凉山州HIV抗体检测季度报表„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ (28) 前 言 为认真贯彻落实温家宝总理考察凉山州艾滋病防治工作的重要指示精神，实现国家艾滋病防治工作目标，加大艾滋病检测力度，加强对基层工作人员的技术指导，进一步规范HIV快速检测工作，提升防治工作的质量，我办委托州疾控中心，在国家艾滋病防治技术指南和规范的基础上，结合我州实际情况，制定了《凉山彝族自治州HIV快速检测点实验室作业指导书》(试行)(以下简称《指导书》)。《指导书》内容包括“样本的接收、登记和处理”、“HIV抗体快速检测流程图”“HIV抗体快速检测质量控制”、“实验室消毒与污物处理”、“实验室生物安全及职业暴露”、“检测实验记录及结果上报”“保密程序”、“记录表格”等。为提高《指导书》科学性、权威性和可操作性，特邀请国家和省级专家共同参与了《指导书》的制定工作。在此，我办对给予指导和支持的所有单位和机构，以及为《指导书》做出贡献的相关领导和专家表示衷心的感谢。 由于时间和水平等诸多因素和限制，本书难免存在疏漏、不当之处，请各使用单位和检测人员提出修改意见，我为将对《指导书》进行修订和完善。 凉山州人民政府防治艾滋病工作委员会办公室 2011年8月 3 凉山州艾滋病快速检测样本的接收、登记与运送 一、标本的接收登记:对受检人群的所有信息(检测日期、编号、姓名、性别、年龄、民族、婚姻、文化、身份证号码、户籍所在地、样本类型)详细登记在艾滋病咨询检测登记表和快诊原始记录表中。 二、标本的采集:采集样品应按临床采血技术规范采集指尖血或静脉血，采集标本时应注意生物安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液时操作应戴手套，避免职业暴露。 三、标本运送:阳性标本在送往县疾控进行复检时，严格按照“生物安全运输管理条例”包装。事先检查样品管有无破损和溢漏，如发现溢漏应立即将样品移出，对样品管和盛器消毒。同时与“艾滋病检测点HIV抗体复检检验单”一并送往县疾控，双方签字验收。 对所采集的血样不能及时送往县疾控中心，可短期内将样品存放2,8?冰箱。 4 凉山州艾滋病快诊检测点检测步骤及要求 一、工作步骤 【步骤一】 对受检人群的所有信息(检测日期、编号、姓名、性别、年龄、民族、婚姻、文化、身份证号、户籍所在地、样本类型)详细登记在艾滋病咨询检测登记表和快诊原始记录表中。见附表1。 【步骤二】 按临床采血技术规范采集指尖血或静脉血，无菌条件下采集指尖血或(静脉血3,5ml)室温静置，让血浆自然分离。(做HIV快诊等实验用)。 【步骤三】 按照试剂盒说明书要求，从包装盒中取出测试卡，平衡至室温并编号，准确加入血浆(或全血、稀释液)样品于测试卡的架处。30分钟内观察结果，结果判定见图。 对照区(C)线 C C C C C 检测区(T)线 T T T T T 加样孔(S)线 S S S S S 阳性 阳性 阴性 无效 无效 快诊试剂保存条件: 5 1、 可以保存2,30?,有稀释液和快速试剂,建议保存在2,8?冰箱. 2、 试剂出入库一定要有记录,包括试剂厂家名称、规格、试剂效期、批号、接 收人、使用人签名、使用日期等。见附表2。 3、 每天记录存放试剂冰箱温度、实验温度、环境温湿度。 【步骤四】 加入样品后，一般在15,30分钟内观察结果(根据各试剂厂家的要求)不得超过30分钟，否则无效。在质控区和反应区均出现红线，结果评定为阳性。只在质控区出现红线，反应区不出现红线，结果阴性。不出现质控带，实验无效，(实验温度保持在20,25?)。 【步骤五】 阳性结果做好记录，并认真填写二表二卡，同时将血浆样本 一同送往县疾控中心做复检实验。初筛实验按《全国艾滋病检测规范技术》2009年版。 【步骤六】 待确证结果返回后，一并装入个人随访档案袋中。 二、筛查点实验室生物安全要求: 所有使用过的采血针头、真空采血器、测试卡、一次性手套、一次性工作服必须经过严格消毒或高压消毒，焚烧处理。 禁止在实验室内进食、喝水、吸烟、化妆等违反生物安全规定的行为。 三、艾滋病检测实验室常用的消毒方法: (一)物理消毒方法: 1、高压蒸汽消毒，121?，消毒15,20分钟。 2、干烤消毒，140?，消毒2,3小时。 3、定点集中式焚烧，要有专人看管。 (二)化学消毒方法: 1、含氯消毒剂，有效含氯量2000,5000mg/L。 2、使用75%乙醇消毒仪器表面20,30分钟。 3、使用2%的戊二醛消毒仪器表面20,30分钟。 四、艾滋病筛查点实验室房屋要求: (一)房屋面积:要求在16,20平方米独立的实验用房，决不允许和疫苗 6 预防注射、配制输液液体，注射液体等无关联的工作混合使用。 (二)房间内摆放一张清洁的桌子，专门用于登记记录，另外一张桌子用于采血和做快诊实验专用。摆放一个文件柜，存放文件档案。一台消毒高压锅(有条件的单位)，一个带盖的消毒桶，内装含氯量在2000,5000mg/L的消毒液，专门用于装被污染过的或使用过的实验耗材。另外在放置一个垃圾桶，放置无污染性垃圾。 7 凉山州HIV抗体快速检测流程图 样品 快诊实验 阳性反应 阴性反应 将样本送筛查实验室 复检实验 均阳性反应 均阴性反应 一阴一阳 送确证实验室做确证实验 报告阴性 8 凉山州HIV抗体快速检测质量控制 一、目的 监控每次检测的重复性和稳定性以及检验试剂盒批间差异、批间操作的重复性，验证检测结果。 二、适用范围 适用于HIV-1/2抗体定性快速检测。 三、作业程序 (一)检测前质控: 1、样品要求唯一编号，实验前仔细核对，检查。 2、检测人员每日检查室内温度，实验环境温湿度应在试剂盒说明书的范围内，试剂和样品应按要求存放，并做好记录。 3、检查是否有足够的试剂库存量，确证试剂是在有效期范围内，禁止使用过期试剂。 4、每批实验如果应用不同批号的试剂，应做好记录。 (二)检测过程质控: 1、准备好试验区域，摆放好必要器具。 2、详细记录样品编号、姓名、地址、试剂名称及批号，操作者、复检者签名。 3、核对样品编号、标记、检测、防止错号。 4、实验前仔细阅读试剂盒说明书，严格按照说明书操作。 5、需要在冰箱保存的试剂，先从冰箱内取出，放置室温，平衡后在使用。剩余的试剂条应立即放入自封袋中密封2,8?保存，可 9 以存放在室温的试剂，要尽可能避免高温。 6、建议每一次最多做10份样品，确保试剂条和编号与标本编号准确对应，防止错号和交叉污染。 7、结果判定时，质控带必须出现实验条带才能成立。如实验完成后未出现质控条带，本次实验结果无效，实验需重做。 8、外部质控，由国家或省疾控中心提供，或试剂厂家购买。要求在更换不同试剂批号时，更换不同厂家时，更更换不同检测人员时做外部质控。 (三)检测后质控: 1、实验结果进行判读时，应保证判读地点光线充足。对于难以判读的条带，最好有2人判读。 2、复核样品编号并填写实验结果。 3、向实验室负责人报告检测结果。 4、检查试剂库存量，根据实际需要，提前向上级实验室申请补充。 5、在收到或检测时，发现试剂出现外包装盒或内容物已损伤，标签出现错误、缺失或字迹模糊(特别是产品厂家名称、批号、生产日期或失效期)，应详细记录。 10 凉山州HIV抗体快速检测实验室消毒与污物处理 按照“生物条例”对污染物品、进行有效消毒处理。 一、血液标本应置于运输箱内，按照三层包装后运送，切勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液消毒。送检单位外面套清洁的塑料袋封口一并运送。 二、各种化学消毒剂均应贴有标签，放置于合适和位置，试验台上不放置不必要的物品。实验室环境一旦污染，限在污染区外周围倒入消毒液，逐渐向中心消毒处理。并做好记录。 三、实验室所有生物垃圾，包括用过的一次性手套和工作衣，置于黄色污物袋内，经焚烧或有效消毒处理后定点深埋。污染的非一次性工作衣应先消毒后洗涤。 四、所有尖锐品、血样管和血液标本放置于不宜刺破的容器内(锐器盒，带盖塑料桶)，限制在实验室内消毒后在指定地点焚烧处理。 五、常用的消毒剂和消毒方法与病毒性肝炎消毒法相同。 (一)锐器盒或塑料消毒桶:5000mg/L次氯酸钠。 (二)生物安全柜、工作台面和仪器表面:使用75%乙醇。 (三)溢出物:5000mg/L次氯酸钠。 11 凉山州HIV抗体快速检测实验室 生物安全及职业暴露 一、建立 (一)成立生物安全领导小组，随时自查和督导生物安全隐患。 (二)实验室的设备、建筑和设施的安全必应通过专家的评审。 (三)建立安全操作程序，该程序应适用于现有的实验条件，并与实验室其他规章制度一致。 (四)无论是否发生意外事故，每年都要对安全标准操作程序及其实施情况进行检查。 (五)制定意外事故处理预案，建立意外事故的登记和报告制度。出现职业暴露意外事故应及时处理，同时报告主管领导。 二、人员管理和培训 (一)人员管理 1、新调入人员、外来合作、进修学习的人员在进入实验室前，须经过实验室主任批准。非实验室人员和非实验室物品不得进入实验室。 2、实验室工作人员每年采血检测HIV、HBV、HCV、PT抗体检测，建立个人健康档案制度，血清样本应长期保留。 (二)培训 1、所有工作人员必须经过HIV检测技术和实验室安全培训，包括上岗培训和复训，并接受管理人员的监督。实验室的安全责任人要对工作和环境的安全负责，所有工作人员都有责任保护自己和他人的安全。 12 2、必须告知新上岗人员实验室工作的潜在危险，进行安全教育，直至有能力后方可单独工作。 三、安全保障措施 (一)个人保健和防护 1、高标准的个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险。手部皮肤有开放性伤口及其它不适于工作的情况，应暂停工作。 2、进实验室前要摘除首饰，修剪长的带刺的指甲，以免刺破手套。 3、进入实验室应穿隔离衣、戴手套。如手套破损，立即丢弃，洗手后换上新手套。 4、离开实验室前必须脱去隔离衣、手套并洗手。 5、严禁在艾滋病检测实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。 (二)带入和带出实验室的物品 1、对所有带入实验室的样品都应进行检查，装有测试样品的包装箱(袋)应在安全柜或其他适当的装置内打开。 2、将HIV测试样品转送到上级实验室复检时，应按照生物安全三层包装，防止对人员和环境的污染。运送样品的人应明确接收地点为和接收人，在样品接收单上双方签名，确认样品无外溢，无不合格现象。 3、污染或可能造成污染的材料在带出实验室前应进行严格消毒。 (三)减少利器的使用 1、实验室最好不使用玻璃器皿，应作用塑料器皿。 2、尽量使用安针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，以降低直接接触血液的刺伤的危险性。应将用过的针头直接放入锐器盒内，消毒处理。 四、意外事故处理 (一)紧急处理措施 1、皮肤针刺伤或切割伤:立即用肥皂洗和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤 13 处的血液，用70%乙醇或其他消毒剂消毒伤口。 2、皮肤污染:用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其他皮肤消毒剂。 3、粘膜污染:用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位。 4、衣物污染:尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理。 5、污染物泼溅:无论发生大、小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。 (二)事故登记 1、记录事故发生的时间、地址及详细经过。 2、记录暴露方式，受伤部位、伤口深浅、暴露程度。 3、处理方法:经专家评估暴露级别和是否采用暴露后药物预防，如果是，应详细记录用药情况。 4、随访检测日期:0、1、3、6、12，记录每次检测结果。 (三)发生上述事件后，遵循三条原则，及时处理原则，报告原则，保密原则。 14 凉山州HIV抗体快速检测实验记录及结果上报 一、目的 由于快速检测结果难以进行电子化记录，检测条无法作为原始记录长期保存，因此现场检测数据的记录和管理就变得十分重要。真实和准确的原始记录是审核检测结果报告的唯一基础性数据，记录信息不全或错误，将导致感染者无法追踪和管理。 二、内容 快速检测记录本用于登记日常快速检测结果，包括的基本内容有:检测日期、检测序号、受检者姓名、年龄、性别、民族、文化、婚姻、人群来源、户籍所在地和单位住址，身份证号码或新农合号。 三、要求 (一)对于阳性样本，除了要记录详细地址、身份证号码或新农合号外，还要求填写二表二卡(传染病报告卡、艾滋病性病附卡、个案随访表、艾滋病感染者/病人及家属情况登记表)，用指尖血检测的的要重新采集静脉血(3,5ml)，分离血浆，按规范包装好和送检单一同送往当地县疾控中心复检。 (二)检测点每月将结果统计一报到县疾控中心，县疾控中心再把辖区内各个检测点数据收集汇总后，上报到凉山州疾控中心艾滋病确证实验室，凉山州疾控中心艾滋病确证实验室将全州的数据汇总后，上报省疾控中心。 (详见:凉山州医疗卫生机构HIV常规检测登记表及检验原始记录) 15 凉山州HIV快诊检测实验室管理制度 一、进入本实验室的人员必须是经过上岗培训合格的人员。外来人员需经领导同意后，方可进入。 二、本实验室为专用实验室，不能和其他科室共用。实验室分为清洁区和污染区，必须严格遵守生物安全管理条例。 三、进入实验室前要换上一次性鞋套，口罩、工作帽，穿上本实验室专用的工作服，戴上一次性乳胶手套方可进行实验操作。 四、实验结束后，要对工作台面消毒，工作台面应当用含氯消毒剂(2000,5000mg/L)或75%的乙醇进行消毒。 五、离开实验室之前应脱去工作服、手套，禁止将实验室工作服穿出，按照标准程序彻底洗净双手。 六、实验室不能放置任何玻璃器皿。清洁区桌子只能放置检测登记本和原始记录表格，实验用桌子用于采血和做快诊检测。 七、遇见意外事故，应立即处理并分别以口头和书面报告上级部门。 八、每天实验前记录冰箱、孵箱温度，登记在维护记录本上。 九、注意门窗、水电安全防护。 十、保持实验室清洁，每天清扫地面，桌面。所有废弃物品须消毒后焚烧处理。 十一、严格按照《全国艾滋病检测技术规范》(2009版)进行操作，对所有检测结果遵行保密制度。 16 凉山州HIV抗体快速检测保密程序 一、HIV抗体检测实验室要有专人负责妥善保存各种试验记录、感染者档案，不得擅自修改和销毁;严格遵守保密制度，未经省级卫生行政部门许可，不得向无关人员或单位提供任何情况。 二、HIV抗体快诊检测实验室检测的阳性结果不是最终结果，应及时作进一步复检、确认。快诊检测实验室不能出具HIV抗体阳性的结果报告，不能告知无关联人员。 三、HIV抗体确认实验室确认的阳性结果，以注意保密形势向送检单位出具阳性报告，送检单位接到阳性报告后，应报告当地疾控和卫生行政部门，在对阳性者告知检测结果时要先杉好法律、医学、生活等方面的咨询。 四、经确认的阳性标本，应存放在实验室走低温冰箱保存，冰箱要求上锁(双人双锁保管)，不得擅自处理。标本保存时间根据卫生行政部门要求。 五、电脑保存的所有HIV资料应加密保存。 17 凉山州艾滋病检测点资格审批申请表 申请单位: 地 址: 邮 编: 电 话: 联 系 人: E—mail: 年 月 日填 18 一、艾滋病检测点人员名单及基本情况: 姓名 性别 年龄 技术职称 何时何时取得检测点上岗证 备注 二、实验室仪器、设备情况: 仪器设备名称 厂家 型号 购买时间 运转状况 核实者 注:1.仪器、设备表格不够可另附页 2.运转状况可按运转正常、需小修、需大修三档填写 三、申请理由: 单位(盖章) 年 月 日 四、县(区、市)卫生行政主管部门意见: 19 单位(盖章) 年 月 日 五、市(州)级专家组验收意见: 组长(签字) 专家(签字) 年 月 日 六、卫生行政(或主管)部门审评结果: 20 单位(签字) 年 月 日 凉山州医疗卫生机构HIV常规检测登记表 略 21 凉山州HIV抗体筛查报告单 HIV抗体筛查报告 REPORT OF HIV ANTBODY SCEENING TESTING 秘密 SECRET 编号 NO: 送检单位 送检日期 FROM DATE 送检标本 送检人群 SPECIMEN POPULATION 姓名 性别 年龄 职业 NAME SEX AGE OCCUPATION 国籍或民族 地址 NATIONALITY ADDRESS 检测方法 检测日期 检测结果 METHOD DATE RESULTS 快速检测 结论 CONCLUSION 检测者 签发者 报告日期 OPERATOR HEAD DATE 22 备注 NOTE 筛查单位或实验室(公章) INSTITUTION OR LABORATORY 本报告仅对送检样品负责 县 HIV抗体筛查快诊实验原始记录 实验批次: 样品来源 收样日期 检测日期 样品名称 样品性状 样品数量 试剂名称 试剂批号 试剂效期 室内温度 检验标准 《全国艾滋病检测技术规范》 μl于加样处， 实验流程:取出检测卡放至室温，取样品 分钟内读取结果。在试剂盒规定结果读取时间内检测卡反 应如下图: 1 2 1 2 C C C C C 对照区(C)线 T T T T T 检测区(T)线 加样孔(S) 图A ,阳性, 图B,阴性, 图C,无效, 实验编号 结果描述 结果判断 实验编号 结果描述 结果判断 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 23 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 检测卡反应与图 相符 备注: 检测人: 复核人: 凉山州艾滋病检测点HIV抗体复检送检单 秘密 编号 送检单位 送检日期 送检标本 送检人群 姓名 年龄 性别 职业 婚姻 文化国籍 民族 状况 程度 身份证号 联系电话 现住址 户籍地址 检测方法 检测日期 试剂厂家 批号 有效期 结果 检测者 审核者 24 送检单位(公章) 备注 本报告全部由送检单位填写 电话 邮编 凉山州艾滋病检测各类试剂入库、领取使用登记录 入库 使用 使用 试剂名称 批号/效期 数量 签收人 使用人 时间 时间 数量 25 凉山州艾滋病检测实验室仪器使用温度记录 仪器名称: 备月份 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 日期 注 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 26 23 24 25 26 27 28 29 30 31 记录人 凉山州艾滋病检测实验室废弃物及 生物垃圾处理记录表 数量kg 产生时间 性质 处理方式 处理时间 处理人 (客观) 27 四川省艾滋病检测点审评验收情况一览表 评审内容 评审情况 1.人员 经艾滋病确证或确证实验室的培训，获得艾滋病检测资证 名 2.建筑条件 是否有专用实验室或专用实验区域 3.设备 是 否 普通冰箱 是 否 加样器(仪) 是 否 离心机 是 否 消毒与污物处理设备 是 否 安全防护服用品 是 否 恒温设施 是 否 4.文件管理 1)作业指导书 样本采集及运送 是 否 快速检测 是 否 消毒与污物处理设备 是 否 2)记录 28 实验原始记录 冰箱/冰柜温度记录 是 否 实验室环境温度记录 是 否 消毒与污物处理设备使用及维护记录 是 否 5.盲样检测 操作是否规范 是 否 检测结果是否正确 是 否 评审专家组(签字): 年 月 日 艾滋病检测份数 月,季,报表 填报月份,季度,: HIV检测 检 测 样本来源 快速诊断 初筛 WB 份 检测数 阳性数 检测数 阳性数 检测数 阳性数 不确定 数 术前检测 受血,制品,前检测 性病门诊 其他就诊者检测 婚前检查,含涉外婚检, 孕产期检查 检测咨询 阳性者配偶或性伴检测 女性阳性者子女检测 职业暴露检测 从业人员体检 有偿供血,浆,人员检测 无偿献血人员检测 出入境人员体检 新兵体检 强制/劳教戒毒人员检测 29 妇教所/女劳收教人员检测 其他羁押人员体检 专调查 其他, , 合 计 填报单位: 填报人: 审核人: 填报日期: 年 月 日 30