不同细胞因子诱导脐带血有核细胞增殖及杀伤活性的研究

不同细胞因子诱导脐带血有核细胞增殖及杀伤活性的研究 不同细胞因子诱导脐带血有核细胞增殖及 杀伤活性的研究 2964中国误诊学杂志2007年7月第7卷第13期ChinJMisdiagn,Jul2007Vol7No.13 不同细胞因子诱导脐带血有核细胞增殖及杀伤活性的研究 佟晓光,刘玉侠 嘲z ':NK活性,堑..% 因子],且在体外具有增殖分化潜能,近年来倍受国内外研究者…" 关:已地l用疾病二结果取脐篡' 竺兰L一:要置璺及2.1IL一2对脐血有核细胞增殖的影晌见1.NK活性的变化, 为脐血的临床应用提供了一定的实验依据.',a/ 表 i 1 … IL-血有细胞 "T4 增殖影响 1材料和方法 1.1脐血在无菌条件下取健康足月产婴儿脐带血. 1.2试剂IL一2:购于卫生部长春生物制品研究所;IMDM培 养基:购于GIBCO公司;GM—CSF,G—CSF:购于宝泰克公司; FCS:购于TBD公司;H—TdR:购于上海原子能研究所. 1.3方法 1.3.1脐血有核细胞的制备将新鲜采集的脐带血离心 (2000rpm/15min)后去除血浆,用红细胞裂解液裂解两次_4], 0.9生理盐水和不含血清IMDM各洗一次.用含1OFCS的 IMDM培养液调细胞浓度为5×10/ml,此为脐血有核细胞悬 液. 1.3.2脐血有核细胞的扩增将脐血有核细胞悬液加入96 孔细胞培养板内,每孔1001,每孔再分别加入IL一2(1000Iu/ m1),GM—CSF(50IU/m1),G—CSF(50Iu/m1),每个样品设6复 孔,培养72h. 以上培养的细胞在培养结束前6h加入.H—TdR(O.5uci/ 孔),培养结束后将细胞收集于玻璃纤维滤纸上,待自然干燥 后,用液体闪烁计数仪测定.H—TdR掺入量,结果以CPM值表 示. 1.3.3IL2对脐血有核细胞NK活性的影响(1)靶细胞的 制备:培养K.细胞,取至指数生长期的Ksez细胞,调浓度为5× 10/ml,备用.(2)效应细胞的制备:如上所述制备脐血有核细 胞,种植于培养瓶内,按以下设计分为三组:第一组为对照组, 不加任何处理因素;第二组加IL一2,1000IU/ml;第三组加 GM—CSF,50Iu/m1,37C,5C0z条件下培养72h,收集细 胞,调浓度为25×10./ml,备用.(3)混合培养:将以上调整好的 靶细胞和效应细胞按以下设计加入到96孔细胞培养板:第一 组(靶细胞对照组):加入K56.1001/孔;第二组(实验组):K56z 和脐血有核细胞各1001/孔;第三组(效应细胞对照组):脐血 有核细胞1oo1/孔. 以上细胞每组设6复孔,混合培养18h,培养结束前4h加 入sH—TdR,0.5uci/~L,培养结束,收集细胞于玻璃纤维滤纸上, 待自然干燥后,用液闪仪测定CPM值. NK活性计算: 作者单位:1.吉林省长春医学高等专科学校130031;2.吉林省肿瘤防治 研究所'130012 注:表示与对照组相比较,表示与IL一2组相比较. 从表1中数据可以看出,IL一2可以明显刺激脐血有核细胞 DNA合成和细胞增殖,其结果也明显高于GM—CSF和G—CSF 处理组. 2.2IL一2对脐血有核细胞NK活性的影响见表2. 表2IL一2诱导后脐血有核细胞NK活性的变化 处理因素NK活性(一6) 对照 IL一2 GM—CSF 注:与对照组相比,P<0.05,※P<0.001}与IL一2组相比,P <0.05. 从表2中数据可以看出,IL一2诱导后,脐血有核细胞的NK 活性明显增强(P<O.05),同时GM—CSF也具有明显促进脐血 有核细胞NK活性增强的作用(P<O.001). 3讨论 脐血作为一种新的造血干细胞的来源已得到了广泛的研 究和应用.目前,脐血除了作为骨髓造血干细胞的替代成分用 于骨髓移植的研究外,常用于恶性肿瘤大剂量放/化疗后的支 持治疗.],以期达到缓解症状,减轻骨髓抑制,维持和恢复患者 的外周血象,保证治疗的连续顺利进行的目的.我们本次所做 的实验结果也证实了脐血中的有核细胞成分对某些细胞因子 刺激很敏感,在与IL一2,GM—CSF,G—CSF共同培养时细胞扩增 能力很强,同时其NK活性也明显增强.GM-CSF,G-CSF,IL一2 这种促进脐血有核细胞增殖,增强其NK细胞活性的作用,为 体外大量培养扩增脐血有核细胞及其中的造血干细胞,满足临 床进行脐血移植的需要,以及对肿瘤患者放/化疗后给予脐血 有核细胞进行辅助及免疫治疗提供了理论依据. 【参考文献】 [13CairoS,WangerJE.Placentaland/orumbilicalcordblood:anal ternatives0urceofhematopoieticstemcellsfortransp1atation[J] ? 0 0.0 .0.416 士?? 000 701 24— 中国误诊学杂志2007年7月第7卷第13期ChinJMisdiagn,Jul2007Vol7No.132965 Blood,1997,90:4665—4678. [2]BroxmeyerHE,HangocG,CooperS,eta1.Growthcharacteristics andexpansionofhumanumbilicalcordbloodandestimationofits potentialfortransplatationinadults[J].ProNatlAcadSciUSA, 1992,89:4109—4113. r3]RubinsteinP,CarrierC,ScaradavouA,eta1.Outcomesamong562 recipientsofplacental—bloodtransplantsfromunrelateddonors [J].NEnglJMed,1998,339:1565—1577. [4]刘玉侠,夏凤琴,石虹,等.LiCI对脐血有核细胞增殖,凋亡及细胞 周期的影响[J].实用肿瘤学杂志,1998,12(1):15—16. fi5]苏毅,王毅,赵碧,等.脐血输注对恶性肿瘤化疗后血象的影响及作 用机理探讨[J].中国输血杂志,1996,9(1):9—10. [6]侯俊卿,段玉龙,史中洲,等.脐血治疗化疗后的骨髓抑制[J].临床 荟萃,1994,9(1):493—495. [7]朱锦秀.脐带血治疗肿瘤化疗所致白细胞减少[J].肿瘤研究与I临 床,1996,8(2):i01-i02. 收稿日期:2007—01—20;修回日期:2007—02—28责任编辑:刘继烈 孕妇检测可溶性血清转铁蛋白受体的临床应用价值 李永伟,王春霞,裴东旭,张新春 【主题词】妊娠/血液;受体,转铁蛋白/血液 【中图分类号】R714.1【文献标识码】A 我们通过对可溶性血清转铁蛋白受体(STfR)等铁缺乏的 几种实验指标的检测,以验证STfR检测诊断孕妇缺铁性贫血 的可行性. 1对象和方法 1.1对象2005—01,2005—06来我院妇科产前检查的妊娠妇 女,年龄(26?5.1)岁.排除其他疾病,贫血诊断参照文献 [1].依据贫血程度分为三组:健康组,轻度贫血组[Hb(98.6? 6.9)g/L],中度贫血组[(87.3?5.6)g/L],从三组中各随机抽 取6O例为研究对象. 1.2方法静脉采血3ml,分离血清置一20C备用.STfR测定 【文章编号】1009—6647(2007)13-2965—02 采用透射免疫比浊法,试剂由芬兰OrionDiagnostic公司提供, 在OlympusAU64O全自动生化仪上测定.血清铁蛋白(Serum ferritin,SF)测定采用放射免疫法,试剂来源于北方放免研究 所,在BJ一2008P放射免疫计数器上检测.血常规分析采用Sys— mexXT一1800全自动五分类血液分析仪. 1.3统计学处理本资料数据以均数?标准差(?)表示,采 用SPSS10.0软件对数据进行统计学分析,尸<0.05为差异有 显着性. 2结果 2.1三组妇女红细胞指数的比较结果见表1. 表1各组红细胞指数及STfR,SF的检测结果 由表1可以看出:RDW健康组与轻度贫血组差异无显着 性(P>O.05);健康组与中度贫血组差异有显着性(P<0.05). MCV,MCH,MCHC健康组与两贫血组比较均差异无显着性 (尸>0.05).STfR,SF健康组与两贫血组差异有显着性(P< 0.05). 2.2STfR,SF对贫血的诊断作用比较分别选择STfR1.2 mg/L,SF15>g/L为临界值,其敏感性,特异性,阳性预测值和 阴性预测值见表2. 表2STfR,SF对贫血的诊断价值() 3讨论 铁蛋白受体是参与机体铁代谢的一种跨膜糖蛋白,当组织 作者单位:].河南省中医院检验科450002;2.平舆县人民医院检验科 463000 缺铁时,STfR就会升高,是一个很敏感的检测指标[2],人体内 75,8O的STfR存在于红骨髓的红系细胞表面,血清中 STfR主要是红细胞成数过程中脱落下来的游离形式,缺铁时 STfR增高,铁营养过剩时STfR降低.因此,测定STfR可以诊 断贫血患者是否缺铁_3]. 通过实验发现:STfR能够敏感地提示贫血组存在缺铁;对 于妊娠期贫血妇女,血常规分析中的MCV,MCH,MCHC和 RDW等参数的敏感性和特异性不高,可能与贫血程度有关;因 此,作者认为STfR,SF用于孕妇的铁营养状态监测是一个非 常敏感的指标,虽然SF是常用的较为准确的诊断IDA的检验 项目,但SF易受炎症,肿瘤因素的干扰,从而影响SF对IDA 诊断的准确性],在储存铁耗竭以后至贫血的过程中,各种缺铁 性指标还没有明显变化时,STfR已开始升高,且与缺铁的程度 有一定的相关性.STfR可用于观察储存铁减少的生理状况和 鉴别同为小细胞贫血的慢性疾病的继发性贫血.尤其是对于轻 度贫血的孕妇具有临床诊断价值. 本实验结果还显示STfR测定缺铁性贫血的灵敏度为