凝血因子VIII活性FVIIIC测定凝血因子VIII活性FVIIIC测定
操作规程
出凝血10.1 VIIIFVIIIC 出凝血10.2原理:
凝血因子VIII活性是通过其纠正乏VIII因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。将稀释已知凝血因子VIII活性的血浆与乏VIII
因子血浆的混合物做部分凝血活酶时间(APTT)测定,建立参考曲线,该曲线能将受检者血浆的APTT值转化为VIII因子活性单位。受检者血浆与乏VIII因子的基质血浆混合,测其APTT值,将受检者血浆的测定结果在标准曲线上计算其凝血因子VIII的活性。 出凝血10.3标本处理:
患者处...
凝血因子VIII活性FVIIIC测定
操作规程
出凝血10.1 VIIIFVIIIC 出凝血10.2原理:
凝血因子VIII活性是通过其纠正乏VIII因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。将稀释已知凝血因子VIII活性的血浆与乏VIII
因子血浆的混合物做部分凝血活酶时间(APTT)测定,建立参考曲线,该曲线能将受检者血浆的APTT值转化为VIII因子活性单位。受检者血浆与乏VIII因子的基质血浆混合,测其APTT值,将受检者血浆的测定结果在
曲线上计算其凝血因子VIII的活性。 出凝血10.3标本处理:
患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外)。采血者应
技术熟练,“一针见血”,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标
本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采
完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血
液和抗凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。
全血要在1小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下
3000rpm离心10分钟,室温下可存放4小时。全部试验不能在4小时
内完成,应将乏血小板血浆分装在0.5~1.0ml的小试管中快速冷冻,储存于-20?冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。
冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于37?水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。
标本在-20?可保存2周。-70?可保存6个月。
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操作规程
出凝血10.4试剂:试剂购于天津威士达公司
1) APTT试剂: 德灵Actin试剂(试剂盒代号527165)。每瓶试
4剂内含磷脂(从兔脑中提取),1.0×10mol/L糅花酸,稳定剂;
共2ml。
2) 乏VIII因子血浆(德灵,产品号OTXW)
3) 0.025 mol/L氯化钙
每瓶乏VIII因子血浆用蒸馏水1ml复溶。室温平衡15min后上机分析。
复溶的乏VIII因子血浆分装为0.1ml/支,-70?可保存60天。实验前应37?快速解冻,轻轻颠倒混匀备用。
出凝血10.5仪器:使用Sysmex公司的CA-7000型全自动血液凝固仪。
出凝血10.6操作:按仪器操作步骤执行标准操作。 出凝血10.6.1开机:按下机器侧面的POWER 按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。 出凝血10.6.2检查消耗品:
1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,
不足时,需及时添加。(一次性最多可放1000 个杯子) 2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相
应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉试剂位置时,可在
主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。 3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶
出凝血10.6.3准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器
进样器上。
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操作规程
出凝血10.6.4输入检测项目:主菜单上按下Work List 键,进入工作菜单,输入VIII项目。
出凝血10.6.5输入样本号: 按屏幕下菜单的ID No.键,按顺序输入样本的序号。
出凝血10.6.6开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角
START 键,开始检测。
出凝血10.7 计算:仪器自动计算出结果。
出凝血10.8 参考值:FVIII:C 50~150% (或0.5~1.5) 出凝血10.9 临床意义
凝血因子VIII水平增高:见于高凝状态和血栓性疾病,尤其是静
脉血栓形成性疾病,如DVT、肺栓塞、肾病综合征、口服避孕药、妊
娠高血压综合征、恶性肿瘤、肝病等。
凝血因子VIII水平降低:见于血友病甲,按其减低程度分:重型
(<2%)、中型(2-5%)、轻型(5-25%)、亚临床型(25-45%);其次见于VWD(I型、II型)和DIC;抗VIII:C抗体所致获得性血友病甲较
为少见。
出凝血10.10 参考文献:
1) 主编王鸿利.止血与血栓检验技术.(第一版1992.6)上海科学技
术出版社.
2) 主编李家增 王鸿利 韩忠朝.血液实验学.(第一版1997.10)上海科
学技术出版社.
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操作规程
3) 主编邓家栋 杨崇礼 杨天楹.临床血液学.(第一版1985)上海科学
技术出版社.
4) 主编邓家栋 杨天楹 杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版1985)天津
出版社.
5) 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第一版
1991).东南大学出版社.
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