果蝇的三点测交

果蝇的三点测交 摘要 此次我们选择野生型18号果蝇与6号白眼、小翅、焦刚毛果蝇为原始材料， 、F2代果蝇性状情况，验证了连锁交换定律通过合理设计实验，观察、统计F1 并学习掌握三点测交进行基因定位的方法。 前言 基因定位是指确定的基因在染色体上的相对位置和排列顺序的过程。基因在染色体上的位置是相对恒定的，因此人们就有可能根据基因彼此之间的重组率来确定它们在染色体上的相对位置。染色体图又称连锁图或遗传图，是指依据测交的实验结果，测得某特定基因间的重组率。或采用其他方法确定连锁基因在染色体上的相对位置而绘制的一种简单线性示意图。图距是指两个连锁基因在染色体图上相对距离的数量单位。1%的重组率去掉百分率的数值定义为一个图距单位。图距的单位是厘摩(centimorgan,cM)。我们通常利用三点测交(three-point testcross)来进行基因定位。 三点测交，它是指将3个基因在同一次交配中，取其三杂合体与三隐性体进行测交的方法。进行三点测交实验一般是先将携带三个待测基因的两个亲本杂交，再用所得的F1与相应的三隐形纯合体进行测交，测交后代的表型实际上是F1配子的类型。通过统计发生基因重组的F1个体数，可推算出交换值，再以此确定三个基因的距离极其相对位置 先将野生型果蝇与三隐性果蝇杂交，作为三因子杂种(abc,+++)，再用三隐性个体进行测交。在测交后代中，因交换可得到各种类型的组合。与两个亲本表型不同的称为重组合类型。将三隐性个体与野生型杂交，取F1代雌蝇(三杂合子)，用三隐性个体测交，得测交后代。 材料与方法 材料 器具:麻醉瓶，毛笔、解剖针，培养基，标签、恒温培养箱、解剖镜、酒精灯 材料:野生型果蝇原种(18号)红眼、长翅、直刚毛(++、++、++);三隐性突变型果蝇原种(6号)白眼、小翅、焦刚毛(ww、snsn、mm) 药品:乙醚，乙醇棉球等 方法 1、第一周:选处女蝇，以18号果蝇为父本、6号果蝇为母本进行正交;6 号果蝇为父本、18号果蝇为母本进行反交，将以上两组移到新的杂交瓶中， 贴好标签，于25?培养; 2、第二周:7d后，释放杂交亲本(一定要干净)再放回25?培养。制备新 的培养基以备第三周使用。 3、第三周: F1成蝇出现，集中观察记录F1眼色、刚毛和翅型表型;从正 反交中选取2对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25?培养; 4、第四周:将培养瓶中F1亲本全部处死，继续培养; 5、第五周:F2成蝇出现，开始观察记录眼色、刚毛和翅型表型，用解剖镜 观察刚毛，统计8种不同类型果蝇数，记录成表。 结果 表1本组果蝇三点测交结果统计 表型 果蝇数 比例(%) 重组发生位置 w—m m—sn w—sn + + + 22 56.7% w m Sn 20 + + Sn 0 1.4% ? ? w m + 1 w + Sn 7 23.0% ? ? + m + 10 w + + 8 18.9% ? ? + m Sn 6 合计 74 100% 41.9% 24.4% 20.3% 表2全班果蝇三点测交结果统计 表型 果蝇数 比例(%) 重组发生位置 w—m m—sn w—sn + + + 404 56.6% w m Sn 232 + + Sn 22 4.1% ? ? w m + 24 w + Sn 110 25.7% ? ? + m + 178 w + + 93 13.6% ? ? + m Sn 60 合计 1123 100% 39.3% 29.8% 17.7% 讨论 本组的连锁图 3w sn m 20.3 24.4 44.7 因为44.7>41.9,即计算m-sn与w-sn间的重组值时，同时使用了两次双交换，而在计算w-m间没有计算双交换;而比例最小的组合必定是双交换，即1.4%，则w-m的实际图距为41.9+1.4*2=44.7 全班的连锁图 3w sn m 17.7 29.8 47.5 因为47.5>39.3,即计算m-sn与w-sn间的重组值时，同时使用了两次双交换，而在计算w-m间没有计算双交换;而比例最小的组合必定是双交换，即4.1%，则w-m的实际图距为39.3+4.1*2=47.5 参考文献 百度文库 果蝇的三点测交实验 百度文库 果蝇的三点测交