【doc】人胎盘提取物对实验性肝损伤保护作用的观察

【doc】人胎盘提取物对实验性肝损伤保护作用的观察 人胎盘提取物对实验性肝损伤保护作用的 观察 中国医师杂志2(x15羊4月第7巷第4期507 人胎盘提取物对实验性肝损伤保护作用的观察 谢元林,常伟宏,黄维亮,苏先狮 (湖南省长沙市染病医,湖南长410011:2.中南大学铂雅二医) 【摘要】本文采用CCL,诱导大鼠肝损伤模型,治疗各组采用不同途径,不同剂量给予人胎盘提取物观察大鼠血清谷丙转氨酶 (A),谷草转氨酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH),胆城酯酶(CHE),超氧化物歧化酶(SOD) 的变化,并做肝脏病理切片检查,研究人胎盘 提取物对实验性肝损伤大鼠的保护作用结果表明,人胎盘提取物对cc~肝损伤有一定的保护作用 [关键词]人胎盘提取物;肝损伤;大鼠 人胎盘中含有多种生物活性物质,如维生素,氨基 酸,生长刺激因子,具有改善皮肤,延缓细胞老化,促进新 细胞生长的作用_I?进一步研究发现,人胎盘中含有LFN 一 ?,具有抗病毒作用,同时具有免疫调节作用!-l_一,目前 国内外有报道采用动物内脏提取物用于促进肝细胞生 长_4j,但采用人胎盘提取物中抗肝细胞坏死的报导少见. 笔者利用负离子交换柱层析工艺,自制样品进行了大鼠 实验性肝损伤的研究,现如下: l资料与方法 1?1材料及试剂人胎盘来自健康产妇,行乙,丙,丁型 肝炎病毒及HIV,梅毒等检查,均为阴性.人胎盘提取物 本院自己制造(负离子交换柱层析工艺)含量160t~g/ml= A,A试剂盒购自E海申能技术有限公司S()D, LDH,CHE试剂盒购自南京生物工程研究所:80只SD雄 性大鼠,清洁级,体重l60,220(195.62?43.SS)g,购于中南 大学湘雅二医院实验动物中心:动物自由进食与饮水, 在整个实验过程中房间定期消毒: 1?2实验物分组及用药80只雄性大鼠,适应3(1 后,称重并随机编号分8组,每组l0只,分为正常对照组, 肝损伤模型组,治疗组共3组.治疗组又设口服大,中,小 剂量组,腹腔注射大,中,小剂量组.对照组和损伤组给 生理盐水腹腔注射2ml/200g体重,实验151服组为人胎盘 提取物3ml/200g体重,2ml/200g体重,lml/200g体重,灌 胃,2次/d,共6次:腹腔注射组为人胎盘提取物]6ove_/ 200g体重,8ovg/2~Og体重,4ot~/2OOg体重,腹腔沣射,2 次/d,共6次.损伤及治疗各组动物于开始治疗的第二 天下午4时,给予0.1%四氯化碳花生油溶液2ml/100g体 重,腹腔注射,36h后取眼球血检测,然后处死. 1.3血清学检测各组大鼠于第4d上午(CCLti腹腔注 射36h后)摘取大鼠眼球,从眼眶静脉丛取血,分离血清, 于全自动生化分析仪上按说明操作检测血清AIJT,AST, SOD,LDH,Che. l?4组织学评估及病理分级说明动物处死后,分离肝 脏,用10%中性甲醛溶液固定,经梯度乙醇脱水,二甲苯 透明后,石蜡包埋,切成5tma厚切片,作?染色,光镜下 观察.分级轻度坏死:肝小叶中央静脉有点状坏 死及偶见嗜酸l生小体形成;中度坏死:肝细胞坏死灶性或 片状占肝小叶1/3以内;重度坏死:肝细胞呈广泛性坏死 占1/2以上: 1?5统计学处理计量资料?S表示,统计分析采用方 差分析,组间比较采用q检验: 2结果 2?1人胎盘提取物对CcLti损伤模型大鼠血清?,AST 的影响住本实验条件下,损伤组清ALT,AST值均显 着高于正常对照组,具有统计学意义(P<0.O1),认为本 次化学性肝损伤模型成立;实验组中,腹腔注射小剂量 组,中剂量组及灌胃大剂量组,大鼠血清A,&ST值与损 伤组比较明显降低,具有显着及非常显着性差异(P< 0.05,P<0.01)见表1 表1人胎盛提取物对cc~H_F脏损伤大鼠血清AIT, AST的影响(Y?) 征:各组这1日JAUI'比较F?3.I7,,J<001;与损伤组比较q? 53I,??P<001;q?339,?P<0,05 2?2人胎盘提取物对大鼠胆碱脂酶,乳酸脱氢酶,超氧 化物化酶的影响肝损伤模型组LDH明显高于正常对照 组,SOD,CHE值低于正常对照组,说明造模成立:各实验 组LDH值除注射大剂量组外,其他各组值均低于损伤组, 且具有统计学意义(P<0.05),而SOD,ChE值各实验组 与损伤组比较,腹腔注射的小,中剂量和灌胃大剂量组值 均有上升,具有显着性差异(P<0.Cl5)见表2 JcJunl~lthl?cI'1lv?AI.il-2(X)5,{1j7Ntd 表2^胎盘攫取物耐cI甥伤模型尢鼠 CHE.LDII们孵响(…=10/组l #n之?2j,P<0uI:ncE?4l2 ?Pcno'i 2?3病理组炽学观察病理形忐学规察.肝损伤摸型 组肝胞空泡惮蛮气球样变,细胞浸润.细胞坷:死 程度较荤.数目多丁对照鲴.说叫此试验昕造槿型 成肯.6十不同剂Ji【滑疗蛆埘,死的程度和数均低于拊 份组.尤"肝细胞坏政善为显着:肝损伤组山城细 胞坏死青肯9只小鼠(9/}0),其中3个为雨I且,{个冉 中度;注剁巾剂舒绀和灌大刺臣组出现盯坏死的 分别鼠3个(3/10)和d个(4/10).LL盘部为轻度坏 矩(圈I!) 3讨论 肝损伤尾多田索骞与的复杂过程.近年来研究表 蝈.rJ由基和脂质过氧化反f住肝损伤厦月T胜攘病- 起着l分堕耍的作?](5(1I的嚣性佧I1.机制是多方暗T 的刑肝细胞的损协n用使盯细胞内AITASTLDII 水平增高,检测=的活陛,町_乍为m功能的敏感 指怀.CHE肝脏台成,肝脏蟹损刚.血清CHE活力 下降.删定cHE可幢J忏脏受扭情况 率研究坫表刚Jc(染毒36h后.损伤蛆血清 AIASTLDH?月显升高I_】CHE明下降.与文献 批憎一致;病理组!掌检查艇现肝细胞浊肿卒泡样 变气球样变绑胞崔润取l肝绑胞蜘:琵的程度较.『f=『6 个疗组湍AII^IllI)H水.}脐低.SODCHE水 上;痫娜矧织学改坚血显菩减轻.说明人胎越提取 物中有机盯细胞J,死的物质此物刘?l所致?十扭 伤有拮抗作用,能降低拇怡盱太鼠请^lrA针 LD]I活性.增弧SlIDCHE力帆m减轻c_{I4划肝 细胞的l瑚害(丧I表2)SOD姓趟氧化离J自由的 清际剂.可以抑制门m基的脂质过氧比J应.推测人l临 舟提取物刊肝拙f*的侏护作用帆制是湎过增强SOD活 性.清际盯肿,'生的…?而稳定肝纲眦膜的结构. 外也可以通过减少自山蚩由膜脂』五价结 合而减轻?千市忡.足胥坷过娃机制篮坪垛作用仃许 进一的研究 #女女 I女?g?羊m忭??lJ]-目恂 2口1231^I292 2tm豫书.?林等将W十恤.鲫 J]r^.2000.{】2Jl72060 mMF??制*J]J 2"f214-7qr】0 目I?十}(HJiIx"4 鼬2nI巩十t月qEH(1f)0 f刺撇K?十cH1.mJ0 ?IIuI:4I 《.fm.*l:"0协堪措?J-li? ?2?l:(^):I『lI2 Lt水.等蜘W,HtlI" 仃mJ1'm2?Il7【】)22-~q [收稿日蛳:2004一ln一,n]