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【最新word论文】高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量【药学专业论文】

2017-12-20 4页 doc 16KB 20阅读

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【最新word论文】高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量【药学专业论文】【最新word论文】高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量【药学专业论文】 高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的 含量 作者:张淑萍,田嘉铭,白雪梅,李旺 【摘要】目的利用高效液相色谱(HPLC)法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次 酸的含量。方法色谱柱为YWG-C18(250mm×4.6mm,10μm),以乙腈-5%醋酸水(65? 35)为流动相,检测波长为250nm,流速为1.0ml?min-1。结果甘草次酸对照品浓 度在9.375,300mg?ml-1范围内线性关系良好,回归方程: A=31.545...
【最新word论文】高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量【药学专业论文】
【最新word】高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量【药学专业论文】 高效液相色谱法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的 含量 作者:张淑萍,田嘉铭,白雪梅,李旺 【摘要】目的利用高效液相色谱(HPLC)法测定炙甘草和炙甘草汤中甘草次 酸的含量。方法色谱柱为YWG-C18(250mm×4.6mm,10μm),以乙腈-5%醋酸水(65? 35)为流动相,检测波长为250nm,流速为1.0ml?min-1。结果甘草次酸对照品浓 度在9.375,300mg?ml-1范围内线性关系良好,回归方程: A=31.545C-82.030(n=6,r=0.9991),炙甘草加样回收率为99.81%;炙甘草汤为 100.28%。结论HPLC法准确可靠,可为控制炙甘草和炙甘草汤质量提供检测依据。 【关键词】炙甘草;炙甘草汤;甘草次酸;高效液相色谱法 Abstract: ObjectiveTodeterminetheglycyrrhetiniccontentsinZhiGancaorootandZhiGancaoDecoctionbyHPLC.MethodsYWG-C18column(250mm×4.6mm,10μ m)wasusedwithAcetonitrileand5%Aceticacid-waterasmobilephase.Thedetectionwavelengthwas250nm,andtheflowratewas1.0ml?min-1.ResultsThelinearrel ationshipwasgoodintherangeof9.375, 300mg?ml-1.Theregressionequationwas:A=31.545C-82.030(n=6,r=0.9991),theaveragerecoveryrateofZhiGancaiandZhiGancaodecoctionwere99.81%and100.28%respectively.ConclusionHPLCmethodisaccurateandvaluableforthequalitycontrolofZhiGancaoandZhiGancaodecoction. Keywords:ZhiGancao;ZhiGancaodecoction;Glycyrrhetinicacid;HPLC 炙甘草汤出自汉代张仲景的《伤寒论》,为治疗“心动悸、脉结代”的古代名 方,由炙甘草、生姜、桂枝、人参、生地黄、阿胶、麦门冬、麻子仁、大枣组成。 近年来,大量的实验研究证明,炙甘草汤确有抗心律失常的作用,对各种心脏疾 病所致的心律失常均有较好的疗效,且药理作用广泛而持久,极具开发价值,1,。 炙甘草为炙甘草汤的君药,甘草次酸为甘草提取物的有效成分之一。目前文献报 道多为测定甘草酸的含量,而测定甘草次酸的含量的方法少见报道,2,。为了探 讨中药主要单体在中药配伍中的变化规律,实验采用HPLC法对炙甘草和炙甘草汤 中甘草次酸的含量进行了测定,为炙甘草汤的复方制剂研究提供一定的实验依据。 1仪器与试药 1.1仪器 1 高效液相色谱仪(HP1100,美国Agilent。包括在线脱气机,四元泵,柱温箱,紫外检测器,3D化学工作站),A/D电子分析天平(1/10万,日本),756紫外分光光度仪(上海分析仪器总厂),超声波清洗器(KQ-500B,江苏省昆山市超声波仪器有限公司)。 1.2试药 甘草次酸对照品(中国药品生物制品检定所),甲醇(色谱纯,美国),乙腈(色谱纯,天津科密欧),蒸馏水为本室自制,其他试剂均为分析纯。方剂中九味中药均购自河北北方学院中医门诊部,并按照《中国药典》(2000年版)各单味药标准进行检定。 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱YWG-C18(250mm×4.6mm,10μm),流动相为乙腈?5%的醋酸水=65?35;流速:1ml?min-1;检测波长:250nm;柱温:25?;进样量:20μl。 2.2对照品溶液的制备精密秤取一定量的甘草次酸对照品,置5ml容量瓶中,加流动相溶液稀释至刻度摇匀,配成1mg/ml甘草次酸对照品溶液备用。2.3供试品溶液的制备样品?为炙甘草汤,按传统工艺煎煮两次,合并煎煮液浓缩成0.1g/ml(含炙甘草)的溶液;样品?为炙甘草单味药材按上述方法制成0.5g/ml(含炙甘草)的溶液。精密吸取样品?、?各2ml,分别加入6ml甲醇进行醇沉,离心5000r/min5min,上清液过0.45μm滤膜备用。 2.4阴性对照实验按炙甘草汤处方比例制成缺炙甘草的阴性对照品,依照供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。 2.5线性关系观察精密吸取上述甘草次酸对照品溶液18.75,37.5,75,150,300,600μl分别置2ml容量瓶中,加流动相溶液稀释至刻度,摇匀,按“2.1”项分别进样20μl进行测定。以甘草次酸含量(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,得线性回归方程:A=31.545C-82.030,r=0.9991(n=6),结果表明甘草次酸含量在9.375,300mg?ml-1范围内,本法线性关系良好。 2.6精密度实验精密吸取上述对照品溶液,按“2.1”项重复进样6次,峰面积的RSD为1.3%,表明本法精密度良好。 2.7重复性考察取同一批药材样品,按样品制备方法平行制备5份,按“2.1”项进行测定。炙甘草中草次酸含量的RSD为1.98%,炙甘草汤中甘草次酸含量的RSD为2.03%,表明重现性良好。 2.8回收率实验精密秤取己知含量的炙甘草和炙甘草汤方药材粉末适量,分别定量加入甘草次酸对照品,按照供试品溶液的制备方法操作,按“2.1”项进行测定,结果见表1。表1加样回收率实验结果(略) 2 2.9样品测定精密吸取供试品溶液稀释至合适浓度,按“2.1”项进行测定,代入回归方程,计算炙甘草和炙甘草中甘草次酸的含量,结果见表2,色谱图见图1。表2炙甘草和炙甘草汤中甘草次酸的含量(略) 3讨论 3.1流动相的选择实验选用了不同的流动相比例,结果表明在现用流动相比例下甘草次酸出峰时间适中,分离度最好。 3.2波长的选择用756MC分光光度仪对炙甘草和炙甘草汤进行全波长扫描,结果显示在250nm处均有较高的吸收峰。 炙甘草汤中甘草次酸的含量高于炙甘草,分析其原因,可能是复方中的其他成分对目标成分有增溶作用,或复方中的其它药材也含有目标成分,结果有待于进一步深入研究。 【参考文献】 ,1,郭春雨,宋威,刘芳,等.炙甘草汤抗心律失常的活性成分及药理研究概况,J,.长春中医学院学报,2001,17(2):63. ,2,惠寿年,董阿玲.国内对甘草化学成分的研究进展,J,.中草药,1999,30(4):245. 3
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