知母皂苷对衰老大鼠脑乙酰胆碱受体的调节作用

知母皂苷对衰老大鼠脑乙酰胆碱受体的调节作用 知母皂苷对衰老大鼠脑乙酰胆碱受体的调 节作用 并董车药牵荦报第17卷第2期知母皂苷对衰老太鼠齄己酰胆碱受体的调节作用王氟官 文章螭号:1008—9926(2001)02—0071一?中田分类号:I也85.1文献标识码:A 知母皂苷对衰老大鼠脑乙酰胆碱受体的调节作用 王顺官?,徐江平@ (0广东省l了7医院广东广州510317;0中国人民解放军第一军医大学药理学教研室广东广州51(1515) 摘要:目的:研究知母皂苷(sAaB)对衰老丈鼠脑乙酰胆碱受体的影响.方法:采用放射受体配体结台实验,测定大鼠脑皮层 M,N受体的密度及亲和力.结果:与正常成年大鼠比较,衰老大鼠大脑皮层M受体的密度和亲和力无明显变化,而脑N受体 的密度显着减~’;SAaB能剂量依赖性地增加衰老大鼠脑N受体的数目,对M受体无明显影响.结论:S..~axB对衰老大鼠脑N受 体有上调作用. 关麓词:知母皂苷;受体;乙酰胆碱;脑 RegulationofSaponinsfromAnemarrhenaasphode/o/desBge.onCerebral AcetyicholineReceptorsinAgedRats WANGShun-Guan~ ,XUJia喈Pin (?The177thHospital,Gua~gzhou510317,Guangdong) (? DepartmentofPhanmeology,TheFirstMilitaryMedicalU.ivel~ity,Guangzhou510515,G~aong) ABSI3~CT:A.皿 TostudytheeffectsofsaponinsfromAnemarrhenaasphodeloidesBge.fSAaB)Oncerebra/ acety[cholinereceptorsinagedratsMe吐?0如Cerebral硼坞 cc(M)andnicotinic(N)耐蝌0Isweremeasuredbv radioligandreceptorbindingassay.RatswerepoadministeredwithSAaBfor15d.ResultsCparedwithnollnalrats,the densitiesofcerebralNreceptorsinagedratsdecreasedsignificantly.SAaB(15.0,25.0,and4o.0mg’kg,po) couldincreaseeerebraINreceptorsinadose-~dependentmannq:r,however.ithadnoremarkableeffects?Ml*ece~ors Colw.hl~OllSAaBcane|lhancetheeerebraINl*ece]~orsofarats. KEYWORDS:Anmr~rrhe?asphodeloidesBge;Saponins~Acetylehollne工eoD1ors;Cerebra 囊2浓度对六嘛地黄汤活性多糖樽辜的影响 4.6本工艺的生产成本较低,设备简单.工艺中, 经化学处理较少,容易保持分子的原始状态,且工艺 稳定,适合工业化生产. 参考文献 [J]乔善义六睬地黄场活性戚井的研究c]浣硐药科大学博士论 文集.199713 [2]张惟燕糖复合物生化研究技术[M]第1版,杭州:浙江大学出 版社.199416 13魏运安.方积年.高压凝胶色谱法测定多糖的纯度中成药,19t;0,12(I):3 [8]黄伟文.粱芸,邵霞超滤法制各中药注射液的质量研究 J].中草药,1988,19(9):16 [9空军北京置院药局,超滤{击制备复方中药注射液的实验研究 _J]中草药.1981,12(12):8 :IO]空军北京医院药局,超滤法制备中药注射液的实验研究:J]. 中草药.J螂.11(6):248 [11j郭立玮,彭国平.王天山.等.大孔树脂嗳附与超滤联用对六昧 地黄丸中丹皮酚和马钱素含量的影响[J]南京中医药大学学 报.1999.I5(2):86 (收稿日期:20o0一ii一08:恪回日期:2(3Ol—OI一23) (本文编辑刘贺之) 报2001年4 知母皂苷(saponinsfromAnernarrhena asphodeloidesBge.SAaB)是从中药知母中提取分离 的有效成分,临床及基础研究_】0J表明,SAaB对衰老 和老年性痴呆有一定的治疗作用,认为其作用机制 可能是使衰老动物脑Ml受体上调.但新近的研 究_3~4J表明,在衰老动物和老年性痴呆病人脑组织 中,M受体的下降并不明显.病理学研究-还显 示,在阿尔采末病(Alzheimerdisease,AD)人脑组织中 下降的M受体,仅限于只占全脑M受体约5%的M2 受体,并提出在AD的发病中,脑N受体特征的变化 较M受体可能具有更大的意义.本研究将观察衰 老大鼠脑M,N受体的变化及SAaB对二者的影响. 1与方法 1.1实验动物Wistar成年大鼠,0,体重220— 250g(由第一军医大学实验动物中心提供,动物合格 证号粤动字96A23).衰老大鼠按参考文献_7选用 正常饲养至24月龄以后的老龄大鼠. 1.2药品与试剂知母皂苷(由第一军医大学药理 学教研室制备,批号990621);烟碱重酒石酸盐[(.). nicotinedi.galt~rate,Nie],硫酸阿托品(Sigma公司产 品). . OB(M-受体配基;放射比活度1.5TSq? rnmol),0H-Cytisine(N一受体配基;放射比活度1. 4TSq?rmml)(均为NEN公司产品). 1.3sAaB的给药方式衰老Wistar大鼠,SAaB15. 0,25.0,40.Omg?kg,SAaBpo,qa,30d.对照组只给 普通饲料,其它饲养条件相同. 1.4放射受体配体结合实验(1)大鼠脑皮层膜蛋 白的制备按参考文献_进行.剪颈处死大鼠,迅 速取出脑组织,置于冰浴中解皿内.分离大脑皮层, 用滤纸吸净血迹,称重,按重量(g)的加倍体积加人 0.32retool?L..蔗糖溶液匀浆.1x103g,离心.取上 清液,将上清液以1x103g离心,取沉淀,用15倍体 积缓冲液悬浮混匀.重复高速离心,取沉淀,用1O 倍体积缓冲液悬浮.一20”C冻存.Lowry’s法蛋白 定量.(2)H.oNB和H.Cytisine与膜受体的结合实 验按文献_10_方法进行操作. 1.5数据处理放射配体受体结合实验的数据分 析,使用军事医学科学院汤仲明教授提供的LIGAND 软件进行计算;组间差异采用SAS软件包进行单因 素方差分析 2结果 2.1对衰老大鼠脑MN一受体的影响衰老大鼠 大脑皮层N受体密度(B一)较正常成年大鼠明显减 少(P<O.001),N受体对放射配基的亲和力()无 明显改变(P>0.05);而M受体在衰老大鼠脑皮层 的密度及亲和力相对于正常成年组有一定的下降趋 势,但均无统计学意义(P>0.05),见表1. 寰1正常与囊老大?大脑皮屡MN受体的特征比较c;?,=5 注:与正常组比较,<0.001 2.2SAaB对衰老大鼠脑MN一受体的调节衰老 大鼠经不同剂量的SAaB给药30d后,M受体的特征 (B一和)无明显改变;而N受体密度显着增加,表 明SAaB对衰老大鼠脑组织减少了的N受体数目具 有上调作用.方差分析显示,有M2受体亚型位点的轻度下 降.与M受体相反,N受体在AD中的研究日益引 起人们的重视.舯年代后期以来,众多的实验几乎 一 致显示,AD病人的脑(无论活检还是尸检)组织N 受体较正常人减少约50%.本研究也显示,在衰老 大鼠脑皮层,M受体的数目及亲和力均无明显下降, 而N受体的密度较正常成年大鼠显着减少.表明随 年龄的增长,脑神经元突触膜表面的N受体可能存 在生成减少或代谢增多,由此导致N受体绝对数目 的下降,其机制有待进一步的探讨.临床研究_】表 明,AD病人经Taerine(他克林)治疗后,PET显示其 脑组织N受体数目有明显升高.鉴于N受体在学 习记忆中的作用,应用药物使衰老造成减少的N受