高盐饮食对大鼠离体胸主动脉环收缩功能的影响及其机.doc

高盐饮食对大鼠离体胸主动脉环收缩功能的影响及其机.doc 高盐饮食对大鼠离体胸主动脉环收缩功能 的影响及其机 【关键词】 高盐饮食 高血压 动脉环 平滑肌 Abstract: Objective: To investigate the effect of high-salt diet on the contraction of the rat's thoracic aorta and its mechanism. Methods: Tale SD rats ly divided into normal control (NC) group and high-salt (HS) group (n=10). After 2 easured. Using the isolated rat's thoracic aorta ring perfusion model, the effect of phenylephrine (PE) on the thoracic aorta ring free of endothelia -free liquid, then, it induced by 1，4，5- triphosphate inositol (IP3) -free liquid plus heparin and the path of diacylglycerol-protein kinase C (DG-PKC) -free liquid and then treated al in the early stage, the vascular smooth muscle contraction excited by agonist has strengthened, ay be related to the increasing intracellular calcium, especially the increasing activity of the DG-PKC pathooth muscle 高盐饮食能使盐敏感者的血压升高,并且涉及血压调节的内分泌及 生化代谢也都现异常，如钠代谢异常、肾脏潴钠倾向、交感神经 系统调节缺陷等[1]。韩运峰等[2]报道，高盐饮食能使感觉损伤性大 鼠血压升高，并伴有细胞内钙离子浓度升高。那么，在盐敏感性高 血压发病过程中，血压还没有升高的情况下，高盐饮食是否已经使 血管平滑肌收缩功能发生异常,平滑肌细胞内的钙离子浓度是否升 高,钙离子浓度升高是否会使血管平滑肌收缩功能发生异常,在这 方面的研究未曾报道。本实验给SD大鼠高盐(4%氯化钠)饲料喂 养2 ents公司生产，澳大利亚)。 1.2 药物与试剂 苯肾上腺素(phenylephrine，PE，上海禾丰制药有 限公司生产);乙酰胆碱(acetylcholine，Ach，上海试剂二厂生 产);Kreb-Henseleit(K-H)液(mmol/L):NaCl 118.0 mmol/L， KCl 4.7 mmol/L，NaH2PO4 1.2 mmol/L，MgSO4?7H2O 1.2 mmol/L，CaCl2 2.5 mmol/L， glucose 11.0 mmol/L，NaHCO3 25.0 mmol/L;无钙液:NaCl 118.0 mmol/L，KCl 4.7 mmol/L，NaH2PO4 1.2 mmol/L，MgSO4?7H2O 1.2 mmol/L，EDTA 0.05 mmol/L， glucose 11.0 mmol/L，NaHCO3 25.0 mmol/L。 1.3 动物与分组 雌性SD大鼠体重200,220 g，购自温州医学院实 验动物中心(浙医动字第220030002号)。实验随机分为2组:正 常饮食(NC)组和高盐(4%氯化钠)饮食(HS)组。NC组用普通 的大鼠饲料喂养，HS组用普通大鼠饲料加入氯化钠以质量比配成 4%的氯化钠饲料，喂养2 in后，记录血压值。 1.5 血管环制备及张力测定 动物放血后，迅速开胸，分离出胸主动脉，置于95% O2和5% CO2混合气预饱和的4 ? K-H液中。小心剔除血管周围结缔组织，剪成3,4 mm的血管环。用棉签磨擦血管环内表面去除内皮细胞，以制备内皮去除的血管环。将血管环悬挂于预置10 ml K-H液的浴槽内，37 ? 恒温，持续通以95% O2和5% CO2混合气体。血管环静息张力2 g，平衡60 min，期间每15 min换液一次。用6×10-2 mol/L的KCl重复刺激3次，以诱发血管的最大收缩幅度。待血管稳定后，用10-6mol/L PE收缩血管环达峰值，加入10-5 mol/L Ach检验血管内皮完整性。若加Ach后使PE预收缩的血管舒张在20%以下，可认为内皮去除，否则弃用。 实验用PowerLab生物功能实验系统记录血管环张力变化，以6×10-2 mol/L的KCl刺激引起的最大收缩幅度为，所得数据用百分比表示。 1.5.1 无钙液预处理血管环的作用:用无钙液孵育去内皮的血管环10 min，再加入3×10-7 mol/L PE使血管收缩，观察各组收缩幅度的情况。 1.5.2 无钙液加肝素预处理血管环的作用:用无钙液和5×10-2g/L肝素共同预处理内皮破坏的血管环20 min，然后用3×10-7 mol/L PE使血管收缩，观察NC组和HS组收缩幅度的情况。 1.6 统计学处理方法 采用t检验。 2 结果 2.1 两周喂养后的血压情况 经过2 ol/L PE对去内皮血管环HS组比NC组收缩幅度大，2组差异有显著性(P<0.01)，见表2。 2.3 无钙液加肝素预处理后PE对血管环的作用 无钙液和肝素共同预处理内皮破坏的血管环后，阻断三磷酸肌醇诱导的肌浆网内的钙离子释放，这时3×10-7mol/L PE血管的收缩主要是甘油二酯通过蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)激活肌凝蛋白轻链引起，使HS组血管环收缩幅度明显大于NC组，两组差异有显著性(P<0.01)，见表2。 3 讨论 高盐饮食后，盐敏感高血压病患者钠排泄较盐不敏感者为少，血浆钠浓度却与盐不敏感者无异，这提示高盐饮食时盐敏感患者所保留的钠有一部分进入细胞内，细胞内钠浓度升高，通过激活钠钙交换以及膜部分去极化引起Ca2+通透性增加，使细胞内钙浓度升高[3]。韩运峰等[2]发现用辣椒辣素处理的新生大鼠在高盐饮食时鼠尾动脉收缩压升高，淋巴细胞[Ca2+]i明显升高。钙离子是触发平滑肌收缩的关键，要激活收缩器，胞质内的总钙浓度必须增加[4]。主动脉平滑肌在经过高盐饮食后，是否也会引起细胞内钙离子浓度升高呢, 本实验经过2 dynamics of vascular smooth muscle cell [J].Progress in Physiological Sciences,1990,21(4):305-309. [6] .Regulation of contraction and relaxation in arterial smooth muscle [J].Hypertension,1992,20(2):129-137.