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血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法 

2017-09-19 3页 doc 14KB 184阅读

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血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法 血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法  授课对象:06级检验1-5班 课 时:2学时 血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法 目 标:1.掌握磷钨酸还原法测尿酸的原理及注意事项 2.规范地进行尿酸测定,正确地使用离心机 3.了解血清尿酸测定的临床意义 实验用品: 离心机、洗耳球、712型分光光度计、磷钨酸贮存液、磷钨酸应用液、钨酸试剂、 10%碳酸钠溶液、尿酸标准贮存液、(6mmol/L)尿酸标准应用液(0.3mmol/L) 内 容: 一、原理: ,OH尿酸,磷钨酸,,,,尿囊素,钨蓝,O 2 二、操作步骤: R...
血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法 
血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法  授课对象:06级检验1-5班 课 时:2学时 血清尿酸(UA)测定—磷钨酸还原法 目 标:1.掌握磷钨酸还原法测尿酸的原理及注意事项 2.规范地进行尿酸测定,正确地使用离心机 3.了解血清尿酸测定的临床意义 实验用品: 离心机、洗耳球、712型分光光度计、磷钨酸贮存液、磷钨酸应用液、钨酸试剂、 10%碳酸钠溶液、尿酸贮存液、(6mmol/L)尿酸标准应用液(0.3mmol/L) 内 容: 一、原理: ,OH尿酸,磷钨酸,,,,尿囊素,钨蓝,O 2 二、操作步骤: R S B 加入物(ml) 0.5 UA标 准 液 , , 0.5 血 清 , , 0.5 蒸 馏 水 , 4.5 4.5 4.5 钨 酸 试 剂 充分混匀,静置数分钟。R离心,另取3支试管编号 2.5 R管上清液 , , 2.5 S管上清液 , , 2.5 B管上清液 , , 0.5 0.5 0.5 10%碳酸钠 混匀,室温下放置20min,波长660nm比色 三、计算: 血清尿酸μmol/L=A/A×300 RS 四、正常参考值: 男:149~416μmol/L 女:89~357μmol/L 五、临床意义: 1、高尿酸血症与痛风 ?尿酸排泄减少:见于原发性肾功能不全、药物引起的尿酸潴留(如各种利尿药、水杨酸及抗结核药能抑制肾小管分泌尿酸)、铅中毒、铍中毒、氯仿中毒以及甲状腺功能亢进(可引起肾小管功能受损)、酸中毒(与尿酸竞争肾小管上皮细胞主动分泌机制)。 ?嘌呤代谢亢进:见于多发性骨髓瘤、红细胞增多症、地中海贫血、传染性单核细胞增多症等,由于核蛋白转换率增快,使尿酸生成过多。 有的高尿酸血症既由于尿酸合成增多,又由于肾排出尿酸减少。如慢性酒精中毒、妊娠高血压综合征等。 2、低尿酸血症 ?尿酸生成过少:见于黄嘌呤尿症(由于先天性黄嘌呤氧化酶缺乏,使尿酸不能正常生成,故患者血与尿酸水平很低,而排出大量黄嘌呤和次黄嘌呤),服用别嘌呤醇类药物(使嘌呤氧化酶抑制或假性反馈抑制嘌呤生物合成,从而阻断尿酸生成,出现低尿酸血症,伴有尿中尿酸排出减少和黄嘌呤排出增多)。 ?肾排出尿酸过多:见于Fanconi征(先天性肾小管疾患,使肾小球滤液中尿酸不能被重吸收)、大剂量应用阿司匹林、可的松、和ACTH(可抑制肾小管对尿酸的重吸收和增加肾小管的分泌,使尿酸的清除增加)。 六、注意事项: 21( 磷钨酸贮存液的配制可置于高压消毒器内(压力0.176MPa,即2kg/cm),温度132?,时间5分钟,取出冷却后加浓过氧化氢溶液2滴,然后用蒸馏水稀释至1L。其效果与2小时回流加热一致。 2( 红细胞内含有较多的非特异性还原物质,因此,用血清或血浆测定比全血好。但不能用草酸钾作抗凝剂,因草酸钾与鳞钨酸会形成不溶性的磷钨酸钾而导致显色液 混浊。 3( 血清或尿液标本中的尿酸在温室下可稳定3天,尿液标本经冷藏后,可引起尿酸盐沉淀,此时可调节pH至7.5~8.0,并将标本加温至50?,待沉淀溶解后再测定。 4( 尿酸在水中溶解度极低,但易溶于碱性碳酸盐或磷酸盐溶液中,所以,配制标准液时加入碳酸锂并加热助溶。如无碳酸锂可用碳酸钠或碳酸钾代替。 5( 用钨酸制备无蛋白血滤液时,滤液pH过低,可引起尿酸沉淀。如滤液pH小于3时,尿酸回收率将减低。用半量沉淀剂,滤液pH在3.0~4.3之间,回收率为93%~103%;用全量沉淀剂时,滤液pH在2.4~2.7之间,回收率为74%~97%。 6( 严格掌握比色时间,在加入磷钨酸溶液放置20分钟后,应在30分钟内比色完毕。 课后小结:
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