中药复方苏木煎剂对荷瘤小鼠细胞外液蛋白含量的影响及意义

中药复方苏木煎剂对荷瘤小鼠细胞外液蛋白含量的影响及意义 中药复方苏木煎剂对荷瘤小鼠细胞外液蛋 白含量的影响及意义 ?882?占林医学2(X)6年8月第27卷第8期 中药复方苏木煎剂对荷瘤小鼠细胞外液蛋白含量的影响及意义 刘玉侠,陈军,夏风琴(吉林省肿瘤防治研究所,吉林长春130012) I摘要】目的:研究复方苏木煎剂对荷瘤小鼠细胞外液蛋白含量的影响及意义.方法:收集实验中箝组动物胸腺,睥,肿落组织 细胞外液,检测蛋白含量及其对肿瘤干细胞克隆形成的影响.结果:中药治疗组细胞外液蛋白含量较未治疗组高,并对肿瘤干细胞克 隆形成有明显抑制作用.结论:复方苏木煎剂可以提高荷瘤小鼠胸腺,脾细胞外液蛋白含量,此蛋白的某些组分对肿瘤细胞具有抑制 活性. 【关键词】复方苏木煎剂;荷瘤小鼠;细胞外液蛋白 中图分类号:K273文献标识码:B文章编号:1004—0412(2006)08—882—02 目前,巾草药在肿瘤治疗中日益受到关注.它与化疗药物不 同,是以扶正和驱邪两种作用方式进行治疗,即在杀伤肿瘤的同 时调动和增强机体的免疫功能….本实验观察了复方苏木煎剂 对荷瘤小鼠细胞外液蛋白含量的影响及生物学意义,对中药的 抗癌机理进行了初步探讨. l材料和方法 1.1中药方剂:复方苏木煎剂主要由赤木,莪术,白花蛇草等9 味中药组成,用常规方法制备成煎剂,浓度为lmg/ml(生药量). 1.2瘤株:QGY7703,人肝癌细胞株;Hep—A22,小鼠肝癌细胞 株.均由本研究所提供. 1.3实验动物:C57BL/6小鼠,体重18~22g,雄性,购于吉林大 学实验动物部. 1.4试剂:l~PMI-1640.购于美国GIBCO公司:3H—TdR,购于 上海原子能研究所. 1.5实验方法 1.5.1肿瘤动物模型的建立:取C57BL/6小鼠30只.随机分为 3组,每组l0只.A组为正常对照,B组为肿瘤对照,c组为肿瘤 治疗.取生长旺盛的Hep—A22细胞悬液2X106/0.2ml接种于B. c两组小鼠右前肢腋窝皮下.次日起分别给三组小鼠灌胃:A 组,B组灌生理盐水,c组灌中药煎剂,2次/日,0.2ml/次,连续 14天,第15天处死小鼠. 1.5.2细胞外液的制备及蛋白提取:分别取各组小鼠胸腺,脾, 肿瘤组织,加入2mlRPMI1640培养液,研磨,离心后取上清即为 细胞外液.将各组细胞外液分别过SephadexG一100层析柱,收集 洗脱液.用紫外分光光度计分别测280nm和260nm的oD值, 根据公式分别计算蛋白含量.计算公式蛋白含量(mg/m1)= 1.48OD280-0.74OD260. 1.5.3肿瘤干细胞克隆形成实验:将生长良好的QGY7703细 调细胞浓度为60个/m1.加入24 胞置于l~PMI1640培养液中. 孔培养板,每孔1.0ml,培养24h,待细胞贴壁后弃去上清,每孔 分别加入正常组,肿瘤组,肿瘤治疗组细胞外液提取物50~g/ 0.1ml,对照组加1640培养液0.1ml,每样品设三复孑L,置37?, 5%CO培养箱培养11天,弃上清,经固定液固定后用Giemse 染色.在显微镜下计数克隆形成数,每细胞团超过50个细胞作 为一个克隆.计算克隆形成抑制率.计算方法:克隆形成抑制 率=(对照组克隆数一实验组克隆数)/对照组克隆数. 2结果 2.1正常组,肿瘤组,肿瘤治疗组小鼠胸腺,脾,肿瘤组织细胞 外液蛋白含量变化,见表1. 表l各组小鼠胸腺,脾,肿瘤组织细胞外液的蛋白含量变化(m如组织) 从表1可以看出,胸腺和脾细胞外液抽提物中,肿瘤治疗组 蛋白含量明显高于正常对照组和肿瘤对照组.而接受治疗的肿 瘤组织细胞外液蛋白含量也明显高于对照组肿瘤组织. 2.2胸腺,脾细胞外液粗提物对QGY77O3细胞克隆形成的影 响,见表2. 表2胸腺,脾细胞外液对QCY77O3细胞克隆形成的影响,克隆形成 数(X:f.S) 与空白对照组比较?JP?O.05,?JP<o.01;与正常组比较(JP?O.05;与荷 瘤组比较(尸l<O.05,~P<0.O1. 从表2中可以看出.与空白对照相比,无论是正常对照组,肿 瘤对照组还是肿瘤治疗组,其细胞外液对肿瘤干细胞克隆的形 成均有抑制作用.三组比较,肿瘤对照组克隆形成数明显高于其 它二组(P<0.01)胸腺与脾趋势一致. 3讨论 中药治疗肿瘤的研究近年来日益受到重视,苏木,莪术的体 外抑瘤活性已见报道.本研究采用动物实验的方法对中药复 方苏木煎剂抗肝癌的作用进行了探讨.以往的对中药的研究报 道多侧重于其增强免疫功能方面,而对其影响细胞外液蛋白含 量及其对治疗的影响报道甚少.本实验通过对胸腺,脾,肿瘤组 织细胞外液蛋白含量及细胞外液生物效应的研究分析,发现未 经治疗的荷瘤小鼠胸腺及脾细胞外液蛋白含量均低于正常小 鼠,而治疗组则高于荷瘤组,甚至高于正常组(见表1).提示本方 剂治疗后可能改变了胸腺,脾脏的某些生物活性物质的含量或 产生了某些蛋白和肽类物质等,这种在治疗后细胞外液蛋白含 量的增加可能是其本身的一种防护机制【51.若将各组胸腺和脾 脏细胞外液分别加入到QGY77O3肝癌细胞的体外培养体系 中.则可见到加入细胞外液后.qGY7703细胞集落形成能力明 显下降.证实了胸腺及脾脏细胞外液中确实存在有免疫活性物 质,具有抑瘤活性,荷瘤组细胞外液的这种作用减弱,而治疗组 有所提高,特别是脾脏细胞外液的抑瘤活性接近正常组.而对肿 颜婷婷l例糖尿病患者慢性骨髓炎的护理体会 瘤干细胞克隆形成的抑制则可能是因为其治疗后细胞分泌的免 疫活性物质增高所至?.本实验的结果初步证明了在肿瘤治疗 后细胞外液蛋白含量可以升高,其中所含的免役活性物质对肿 瘤干细胞克隆形成有明显的抑制作用,同时也证明了此疗剂的 有效性. 4参考文献 …1郁有仁,主编.中医肿瘤学()[M】.科学出版社,1991: 23. 【2】李仪奎,主编.中药药理实验方法学[M】.上海科学技术出 版社,1991:518. ?883? 【3l任连生.汤莹.张斌.几种常用中药抗癌研究综述U]. 肿瘤防治研究,1996;8(2):124. 【4】刘群怡.防治肿瘤的中药一莪术U].中草药,1996;27(9): 572. f5】尉军,刘伟宏,刘树铮.10GYX线头部照射对大鼠胸腺 细胞增殖能力的影响及其神经内分泌机制探讨U】.白求恩医科 大学,1991;17(3):222. [6】6杨贵贞,主编.医用免疫学rU】.吉林人民出版社,1980:22. 【收稿日期:2006—03—03编校:郑英善】 1例糖尿病患者慢性骨髓炎的护理体会 颜婷婷(中国人民解放军第222医院骨科,吉林吉林132000) f关键词】糖尿病;慢性骨髓炎 中图分类号:P,.473.5文献标识码:B文章编号:1004-0412(2006)08—883-01 骨髓炎就是骨骼受到化脓性感染,感染可由开放性骨折伤250ml加先锋必2.0静滴,1次/12h,甲硝唑250ml静滴1次/d, 口直接感染到骨骼,也可由血流转移到骨或直接从附近组织感并间断给予白蛋白静滴,以促进伤口愈合. 染蔓延而来,其中以血源性骨髓炎最为常见.可分为急性和慢性3护理 两种,其中慢性骨髓炎多由血源性骨髓炎治疗不及时,不彻底发3.1心理护理:由于慢性骨髓炎的治疗是一个漫长的过程,加 展而来.我bV4"~年收治了2例慢性骨髓炎的患者,均已痊愈出院.之该患者有糖尿病史,伤口不易愈合,而且对疾病缺乏正确的认 现将1例糖尿病患者慢性骨髓炎的康复护理的过程报告如下:识和了解.造成患者心理负担过重,担心预后不好,易产生抑郁, l病例介绍焦躁,恐惧的心理,所以在护理过程中我们护理人员主动与其沟 患者女性,47岁,已婚,缘于3月前被钉子刺中左足第一趾通,讲解疾病的相关知识,减轻其恐惧心理,并动员其家属积极 基底部后,伤口一直不愈,在其他医院治疗两个月后,伤口愈合,配合治疗,护理,在精神上给予患者支持,使其树立战胜疾病的 近一月来左足伤口再次破溃,伤口流出蛋清样分泌物,并逐渐浸信心. 泡脚掌皮肤,使脚掌皮肤溃烂脱落进而形成7cmX6cm皮肤缺3.2饮食护理:合理的饮食有助于疾病的康复,而且营养本身 损,可见一黄豆大小空洞,x线片显示有髓腔的改变,门诊以左就是一种积极的治疗因素,慢性骨髓炎的患者在理论上讲应多 足第一趾骨髓炎收入我科治疗.患者有7年高血压史和糖尿病食高蛋白,高热量饮食,但此病人有糖尿病史的特殊性,要严格 史,口服降糖药(具体药物及服用计量不详).现血糖669mmol/限制摄人糖类的饮食,多给予纤维素较多的食物,还应该戒酒, L,无药物及食物过敏史.专科情况:左足未见畸形,肿胀明显,左做到少食多餐,计算每日的总热量.并定期复查血糖和尿糖. 足第一跖趾关节处压痛(+),左足第一跖趾关节趾侧可见一黄33并发症的预防及护理 豆大小窦道,周围组织颜色发暗,窦道无渗血,有大量蛋清样分33.1伤口感染:病室环境,伤口换药,患者自身免疫力都是加 泌物渗出,缺损伤口深达真皮层,左1-5趾运动正常,末梢血运重伤口感染的因素,此患者有糖尿病史,伤口感染机会要比普通 良好,感觉未查及异常.化验:血常规WBC正常,血沉正常,经患者大的多.因此在护理过程中,我们为病人提供一个独立的, 对症抗炎治疗,伤口换药,精心护理,1个月伤口愈合出院.清洁的病室,每日用紫外线照射2次,每次30min.用1:100的 2治疗方法"84"消毒液湿扫床和擦拭床单.休养服和床单勤更换,保持床铺 2.1病灶清除术:切除坏死组织及瘢痕组织,刮除水肿的肉芽的清洁干燥.伤口换药时严格无菌操作,随时更换外敷料,在伤 组织,保持创面清洁,以利新鲜肉芽生长,以减少毒素的吸收,防口感染的早期做到及时处置,防止转为慢性感染,扩散蔓延到周 止败血症的发生.围邻近的组织,并且观察窦道渗出的情况.合理的膳食,充足的 2.2点滴冲洗法:清除病灶后,伤口采用点滴冲洗法进行药物睡眠,也都能提高患者自身免疫力.促进窦道愈合. 灌注,具体方法:伤口内置管用生理盐水500ml持续冲洗,待渗3.3.2水肿:由于患者足底的破溃面比较大,不能下床活动,影 出液减少后可停止冲洗.响血液循环,导致静脉回流受阻,因此易产生局部水肿,所以在 2.3局部伤口换药:分泌物细菌培养生长非发酵革兰氏阴性杆护理过程中我们采用抬高患肢,保持其功能位.防止水肿的发 菌,对庆大霉素及先锋必敏感,,因患者有糖尿病史,伤口不宜愈生. 合,故选择100U胰岛素加40万u庆大霉素冲洗窦道,并用红3.3.3泌尿系感染:由于患者长期卧床,并大量使用抗生素,易 外线烤灯照射伤口,2次/d,每次15~30rain.发生泌尿系感染,所以鼓励病人多饮水,注意外阴部清洁卫生, 2.4全身疗法:根据药敏结果选用敏感抗生索,大剂量全身应尤其经期前后,用新洁尔灭棉球擦拭外阴部,早晚各1次. 用,防止感染灶扩散到周围邻近的组织,我们选用生理盐水f收稿日期:2005—08—13编校:王菁1