复方柴胡口服液制备工艺考察

复方柴胡口服液制备工艺考察 复方柴胡口服液制备工艺考察 第32卷第2期 2006年6月 兰州大学(医学版) JournalofLanzhouUniversity(MedicalSciences) V_01.32No.2 June2006 文章编号:1000-2812(2006)02.0053-03 复方柴胡口服液制备工艺考察 李红卫,焦海胜,李平,蒋军刚 (1.兰州大学第二医院药剂科,甘肃兰州730030;2.兰州大学药学院,甘肃兰州730000) 摘要:目的筛选复方柴胡i=l服液中橙皮苷的水煎煮提取工艺,比较乙醇沉淀和壳聚糖澄清剂的澄 清工艺.方法采用9(3)正交设计,考察加水量,煎煮时间,煎煮次数3个因素,以青皮中有效成分橙皮 苷作为指标,采用高效液相色谱法测定橙皮苷的含量.结果煎煮次数对橙皮苷的含量有显着性影 响,溶媒用量对橙皮苷的提取有较大的影响;壳聚糖吸附澄清法与醇沉法均能使药液澄清.结论水提 最佳-T艺确定为加水l8倍量,每次1.5h,煎煮3次;壳聚糖澄清剂可以替代乙醇沉淀;优选得到的提取 工艺稳定可行. 关键词:复方柴胡口服液;橙皮苷;正交试验;乙醇沉淀;壳聚糖 中图分类号:R283文献标识码:A Investigationonthepreparingproceduresof compoundChaihuoralliquid L1Hong—wei,JIAOHal—sheng,LIPing,JIANGJun-gang (1:Departmento/Pharmacy,TheSecondHospitalo/LanzhouUniversity,Lanzhou,730030,China; 2.Schoolo|Pharmacy,LanzhouUniversity.Lanzhou.730000.China) Abstract:ObjeetiveTooptimizetheextractiontechnicsofhesperidinfromcompoundChaihu oralliquidandcomparethesedimentationprocessbyethanolandchitosan.MethodsThe orthogonal-testmethodwasadoptedtostudytheeffectsof3factors:thevolumeofwater.the durationandtimesofextraction.DeterminationofhesperidinbyHPLCwasusedasappraisement index.ResultsThenumberofextractionandtheamountofwaterhadsignificantinfluenceonthe contentofhesperidin.Bothprocessesbychitosanandethanolhadclearingaction.Conclusion TheoptimumtechnicsforextractinghesperidinfromcompoundChaihuoralfiquidWasa8follows: thevolumeofwaterWas18timeslargerthanrawherb,tileoptimumextractingtimesWas3and thedurationofextractionWas1.5heachtime.Chitosanprocesscouldsub~,;tituteethanolprocess, andtheextractiontechnicsWasstableandfeasible. Keys:compoundChaihuoralliquid;hesperidin;orthogonal-test;ethanolsedimentation; chitosan' 复方柴胡El服液是由柴胡,青皮,酸枣仁,香 附等中药组成的复方制剂,具有疏肝解郁,养心安 神之功效,临床主要用于治疗抑郁症.青皮是方中 主药之一,具有舒肝破气和消积化滞之功能,故 选其主要有效成分橙皮苷作为正交试验的考核指 标.因本方中大多数有效成分为水溶性成分,故工 艺上采用水提醇沉法.为更好地发挥复方柴胡口 服液的药用功效,作者采用正交设计探讨复方柴 胡口服液的提取工艺条件,并考察醇沉浓度和壳 聚糖澄清剂的用量,同时比较采用乙醇沉淀和用 壳聚糖作为澄清剂的澄清效果. 1仪器与试药 1.1仪器 ~t[]Agilent1100高效液相色谱仪,包括Gl315 AZ.元泵,G1315B~极管阵列检测器,G2170AA色 收稿日期:2005-11-29 作者简介:李红卫(1967_),男,山西运城人,副主任药师,研究方向为中西药制剂的开 发,e-marl:lhw8908(~sina?corn. 兰州大学(医学版)第32卷 谱作站;ZorbaxSB.CM4.6mmx15cm,5m)色 谱柱;HPD一25真空泵(天津市恒奥科技发展有限 公司);RE.85Z旋转蒸发仪(上海青浦沪西仪器 厂);AE240天平(瑞士梅特勒公司). 1.2试药 橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所);处 方所用药材均符合中国药典2005年版一部; 复方柴胡口服液(兰州大学第二医院);壳聚糖(中 国科学院兰州化学物理研究所,脱乙酰度为80%); 乙腈和甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯;水为 重蒸水 2方法与结果 2.1橙皮苷的含量测定…1 2.1.1色谱条件 腈):(冰乙酸):(水)=22:1:77; 流动相:(乙 流速1.0mL/min;检测波长283nm;柱温箱温度 40.C;理论塔板数按橙皮苷峰计不低于4000. 2.1.2对照品溶液的制备 精密称取橙皮苷对照品约9.8mE,置于50mL 容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得 浓度为0.196mg/mL的对照品溶液. 2.1.3标准曲线的绘制 '精密量取橙皮苷对照品溶液0.2,0.4,1.0,1.4, 2.0mL,分别置于5mL容量瓶中,加甲醇至刻度. 摇匀,精密吸取20L在上述色谱条件下进行分析, 以峰面积为纵坐标,溶液浓度为横坐标进行线性 回归,得方程为:y=14.54X一10.91,=0.9996. 结果明橙皮苷浓度在7.84-,~78.4#g/mL范围内与 峰面积呈良好的线性关系. 2.1.4样品含量测定 取样品适量,离,5,10min,精密吸取上清液1mL, 置于50mL容量瓶中,加水稀释至刻度;取稀释液, 用0.22m微孔滤膜过滤,吸取续滤液20L,注入 液相色谱仪测定,计算含量. 2.2水煎煮条件的优选 2.2.1正交试验设计及结果 本处方中柴胡,酸枣仁,香附,青皮等主药均 含有大量水溶性成分.故工艺上采用了水煎煮法. 加水量),煎煮时间(口),煎煮次数()是影响煎 煮效果的主要因素,因此采用这3个因素为考察对 象,以青皮中有效成分橙皮苷为评价指标,进行 正交试验优化,因素水平见表1.按处方量称取药 材,按L9(31正交表对样品进行提取.得正交试验 各组样品.正交试验测定结果见表2.方差分析见 表3. 5.978 0123456 t(min) A橙皮苷对照品 0123456 t(min) B样品 012345 t(min) C缺青皮阴性对照品 图1HPLC色谱图 2.2.2工艺条件的确定 由表13可见,各因素对有效成分橙皮苷提取 的影响程度依次为>>B,各因素的最佳水平 为A3B2.aP~u18倍量水,煎煮3次,每次1.5h. 第2期李红卫等:复方柴胡t:r服液制备工艺考察55 2.2.3工艺验证 根据正交试验结果,按最佳工艺条件放大试 验,投料3批进行工艺验证,结果橙皮苷含量分别 为1.414,1.410,1.457mg/mL,表明该工艺提取有 效成分效率较高. 表1因素水平表 表2五.(3)正交试验结果 方差来源离均差平方和自由度方差F显着性 Fo.05(2,2)=19.0,Fo.01(2,2)=99.0. 2.3澄清工艺的研究 为尽可能除去杂质,提高药液澄明度及稳定 性,对水提液进行沉淀处理.本试验将乙醇沉淀和 壳聚糖澄清两种工艺进行了比较. 2.3.1乙醇沉淀工艺 按正交试验所得最佳工艺制备6份样品,每 份20mL,置于100mL=角烧瓶中,分别加入乙醇 使溶液含醇体积分数依次为0,40.0%,50.0%, 60.0%,7O.0%,80.0%,边加边搅拌,静置24h,抽 滤,滤液回收乙醇至无醇味,补足水量,按2.1.4项 方法测定橙皮苷的含量.药液密闭置冰箱内保 存1周,观察澄明度,结果见表4. 2.3.2壳聚糖澄清工艺 按文献【2,31,称取壳聚糖1g,加入1%的冰乙 酸100mL,磁力搅拌后静置24h得澄清溶液,备用. 取2.3.1项下6份样品,每份20mL,分别置于50mL烧 杯中,于快速搅拌下加入壳聚糖澄清剂,使含壳聚 糖质量分数分别为0,0.Ol%,0.05%,0.10%,0.20%, 0.30%,静置24h,抽滤,滤液补足水量,按2.1.4项 方法测定橙皮苷含量.药液密封置于冰箱内保 存1周,观察澄明度,结果见表4. 裹4澄清工艺的比较 p(乙醇)橙皮苷含澄明沉淀叫(壳聚糖)橙皮苷含量澄明沉淀 (%)量(mg/mL)度物(%)(mg/mL)度物 注:++严重浑浊;+浑浊;士微浊;一澄清. 3讨论 根据上述试验,复方柴胡口服液的最佳水 提条件可确定为加药材量的18倍水,煎煮3次,每 次1.5h,此最佳工艺条件具有较高的提取效率和 稳定性. 由实验可知,乙醇沉淀工艺和壳聚糖澄清工 艺中样品的澄明度随着澄清剂浓度的增大而改 善,久置后沉淀物随着澄清剂浓度的增加而明显 减少,且两种澄清工艺对橙皮苷的含量影响均不 显着.考虑到生产实践中为了节约时间和成本,认 为可以用壳聚糖替代乙醇作为本制剂的澄清剂, 壳聚糖质量浓度以0.10%为宜. 参考文献 fl1林以宁,赵洁如,杨晓琴.健脾药糕的质量标准研 究『J1.中国药房,2005,16(1):57-58. 【21谢虞升,李汉保,刘紊清.壳聚糖在抗敏口服液制 备的应用时珍国药研究,1998,9(1):42—43, 【31吕定刚.玉屏风口服液澄清工艺的实验研究[J】_中 国实验方剂学杂志,2002,8(3):1-2. (本文编辑:李进文)