凝集素芯片鉴别胸水中的癌细胞与反应性间皮细胞的临床应用价值_

凝集素芯片鉴别胸水中的癌细胞与反应性间皮细胞的临床应用价值_ 经典论文 博硕论文 博 硕 论 文日期:幽论文作者签名:塑含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一中国医科大学研究生学位论文版权使用中国医科大学研究生学位论文独创性声明论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密论文作者签名:指导教师签名:证毕业离校后，发论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的，即:研究内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。明并表示谢意。同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学 经典论文 博硕论文 论 文,四目录致谢…………………………………………………((,,在学博 硕 期间科研绩…………………………………………(,,五、参考文献………………………………………………(,,个人简 介………………………………………………(,,综 述………………(…((,……………………………((,,结 论…………………………………………………((,,讨 论…………………………………………………((,,实验结 果………………………………………………(,,材料与方 法………………………………(……………(,,日, 青…………………………………………………((,,前 言…………………………………………………((,,四、本研究创新性的自我…………………………………((,,二、英文缩略 语((保灿?穆壑 吨形穆壑 炝?铰家弧??畚?经典论文 博硕论文 博 硕 论 文与反应性间皮细胞的临床应用价值凝集素芯片鉴别胸水中癌细胞的目腔积液是肺部多种疾病的常见并发症，它也是验证疾病病因，判断其良恶?中文论著摘要?细胞病理学诊断恶性胸腔积液有一定的困难，通常其阳性率仅有,,,,,,，尤胞恶性转变的不同而不同。这就表明细胞的种类和不同的分化阶段具有潜在的不糖基化是翻译后修饰的主要形式之一，并且糖基化的水平随着细胞分化和细准确的肿瘤标记物仍然有待于被发现。文献证明不同的聚糖信号分子的激活可能导致了不同的细胞生物学过程。聚糖结构的组合数要远远大于,,,和蛋白质结构的数量。细胞表面大量不同的聚糖结构样的积液非常具有挑战。传统的方法，例如免疫细胞化学和酶联免疫吸附试验，有少量异型性不明显的腺癌细胞，同时又存在大量的反应性间皮细胞时，诊断这其恶性胸腔积液内含有大量的反应性间皮细胞时难度更大。当恶性胸腔积液中含同的标记物。特定的细胞种类例如胚胎干细胞具有特异表面糖基化类型。近来有内死亡。或随后脱入胸腔内，形成胸腔脱落癌细胞。一旦误诊，发展为胸膜转移多在短期胸腔积液的方法。肺癌病灶浸破 脏层胸膜，常引起胸腔积液，癌细胞可同时肺癌。约,,,的肺癌患者最初的临床表现是胸腔积液，而细胞病理学是诊断恶性性的重要媒介。大约,,,的胸腔积液是由恶性肿瘤引起，其中的,,,又为原发性胸与细胞和外界环境，相邻细胞及病原体之间的关系紧密相关。本课题以肺癌为主攻对象，以肺癌患者的胸腔积液为检测基础，应用凝集素芯片检测恶性胸腔积液中的腺癌细胞及良性胸腔积液中的间皮细胞的细胞膜表面率，许多具有细胞特异性抗原的肿瘤标记物已经被应用于胸腔积液的诊断，然而最在胸腔积液的鉴别诊断中提供着较大的帮助。迄今为止，为了提高细胞学的诊断 经典论文 博硕论文 博 硕 论 文材料与方法的检测,、凝集素芯片对,,,,细胞系及胸腔积液中腺癌细胞及间皮细胞,、凝集素芯片的制备,、应用凝集素芯片获得,,,,细胞表面的聚糖谱,、应用凝集素芯片获得胸腔积液中腺癌细胞表面的聚糖谱禾有的过程都是在盲法下进行的。有自己独特的聚糖结构并且这些聚糖结构可以被凝集素芯片所捕获。,,;,,,,，,,,位点，而其它位点不捕获,,,,细胞。这个结果表明,,,,细胞表面拥凝集素芯片捕获,,,,细胞，结果显示,,,,仅表达,,,，,,,(，，,,,，,,,，温度,,?的室内孵育,,,，时。(肺炎患者,,例，肺结核患者,,例)。的差异，同时评估凝集素芯片区分恶性胸腔积液和良性胸腔积液的能力，以提高细胞学的诊断效能。除。结合后的凝集素芯片进行巴氏染色并且由两名细胞病理学医师进行观察。所或过量的细胞。靠,,,重力作用轻柔的将未结合或过量的细胞从凝集素芯片上去悬在,,,中的细胞室温下在凝集素芯片上孵育,,分钟，孵育后用,,,除去未结合胞膜表面的糖链表达情况进行检测，获得这些细胞细胞膜表面的糖链表达谱。垂应用凝集素芯片对肺腺癌细胞系(,,,,)，胸腔积液中腺癌细胞及间皮细胞细,,,,，，)或将凝集素点到处理后的载玻片上，完毕后，将新制作的凝集素芯片放在湿度,,,,，收集中国医科大学附属第一医院,,,,年,月至,,,,年,月门诊及住院患者,(,,,,,,(其它凝集素)，然后用芯片点样仪,,,,,,,,,胸腔积液,,,例，其中:恶性胸腔积液,,例(肺腺癌)，以及良性胸腔积液,,例,,,,,(,,,，,,,,，合剂来处理载玻片。凝集素被溶解为，为了将凝集素芯片固定到载玻片上，我们选择,一氨丙基三甲氧基硅烷作为耦，，(,,,,,,,,,,,,，,,,,,,,)田,,,(幺七,三口 经典论文 博硕论文 博 硕 论 文讨论,、生物标记物的发现,、应用凝集素芯片获得胸腔积液中反应性间皮细胞表面的聚糖谱们不能确定它是间皮细胞还是腺癌细胞。然而，用荧光扫描仪仅仅获得每个点阵的强度，而不是细胞的种类，也就是说我的细胞可以通过荧光扫描仪扫描，每个点阵上的荧光信号减去背景的信号来计算。异型性小或腺癌细胞的数量较少时，诊断会更加困难。细胞学诊断腺癌细胞假阴集素的芯片，这种凝集素具有高通量的特点并且可以检测游离的聚糖，荧光标记和阶段的糖基化特征明显不同。最近，,,,,,,,,,等发明了一种新颖的包含,,种凝错误主要是由于将间皮细胞误诊为腺癌细胞。糖生物学一直认为不同的细胞种类性结果有严重的后果，假阴性错误主要是由于腺癌细胞误诊为间皮细胞。假阳性不同，,,,，,,,位点在这,,个位点中的表达率较高，分别捕获了,,，,,例。然腺癌与间皮细胞增生具有一定的相似性，所以导致了诊断的困难。当问皮细胞的胸腔积液中鉴别反应性间皮细胞和腺癌细胞是诊断学上的挑战，胸膜转移性癌细胞捕获,例。这预示着,,,凝集素可能能用来区分腺癌 细胞和间皮细胞。面的聚糖发现，,,,位点有着明显的不同，在,,例患者中捕获问皮细胞,,例而腺为了检验凝集素芯片发现生物标记物的能力，我们比较了间皮及腺癌细胞表，，和,,,位点的捕获率较低，分别为,，,和,例。中,,,，,,,，和,,,位点的捕获率较高，分别是,,，,,和,,例，然而,,,，,,,,,,位点未捕获细胞外，,,例间皮细胞在,,个凝集素位点上均有表达，但表达率通过凝集素芯片，,,例胸腔积液中反应性间皮细胞的聚糖表达图产生。除了位点的捕获率较低，分别为,，,例。为了证明凝集素芯片能够区分胸腔积液中的腺癌细胞与间皮细胞，我们检测,,,位点，然而其它位点未捕获到细胞，,,例患者,个位点的表达率也有不同，其,,,,细胞表达,,,’,,,,，，,,,，,,,，,,;,,,,和,,,位点一样外，还表达了,,,，了临床上,,例胸腔积液中的腺癌细胞。,,例肺癌患者胸水中的腺癌细胞除了与而,,,，,,,, 经典论文 博硕论文 博 硕 论 文,,,位点的捕获率较高，分别是,,，,,和,,例，然而,,,，,,,位点的捕获率较低，区分胸腔积液中的腺癌细胞和间皮细胞。面标记物的应用中具有巨大的潜力，并且可能会应用于胸腔积液中区分腺癌细胞性为,,,,，特异性为,,(,,，正确率为,,(,,。这表明,,,可能为一新颖的标记物来位点在,,例间皮细胞中表达,,例，但是在,,例腺癌细胞中表达,例，而且它的敏感的标记物较少，例如,,,,(,和,,(,,，而且后者诊断效能欠佳。本研究中，,,,研究中我们发现了特异的肿瘤标记物来区分腺癌细胞与间皮细胞。然而间皮细胞高通量分析的目标是为了发现具有诊断价值的新颖的肿瘤标记物。在前期的记物的应用价值。潜在的临床意义，包括区分腺癌细胞与间皮细胞的能力以及筛选胸腔积液肿瘤标但高通量的检测了胸腔积液中的腺癌细胞和间皮细胞，而且还发现了凝集素芯片然而,,,，,,,(，，和,,,位点的捕获率较低，分别为,，,和,例。因此，我们不达率不同，,,,，,,,位点在这,,个位点中的表达率较高，分别捕获了,,，,,例。除了,,,位点未捕获细胞外，,,例间皮细胞在,,个凝集素位点上均有表达，但表为,，,例。通过凝集素芯片，,,例胸腔积液中反应性间皮细胞的聚糖表达图产生。总之，此结果说明了凝集素芯片在区分良性胸腔积液和恶性胸腔积液细胞表其它位点未捕获到细胞，,,例患者,个位点的表达率也有不同，其中,,,，,,,，和,,,位点一样外，还表达了,,,，,,,位点，然而,,,(，，,,,，,,,，,,;,,,,捕获,,,,细胞。,,例肺癌患者胸腔积液中的腺癌细胞除了与,,,,细胞表达,,,(结果显示,,,,仅表达,,,，,,,,，，,,,，,,,，,,;,,,,，,,,位点，而其它位点不间皮细胞多，但是聚糖结构的数量要比间皮细胞多。凝集素芯片捕获,,,,细胞，的数量要比间皮细胞的数量多。这个结果可能表明腺癌细胞表面的聚糖种类要比在,,,，,,,,，，,,,，,,,’,,,,,,,，,,,，,,,，,,,,和,,,位点捕获腺癌细胞我们发现间皮细胞表面的聚糖种类可能要比腺癌细胞表面的聚糖种类要多，然而至仅仅只是一个细胞，这种方法比荧光扫描仪更敏感正确率更高。在这项研究中，不仅通过显微镜下得到了凝集素结合的细胞种类，而且可以检测到细胞的数量甚面聚糖的能力，同时获得了腺癌细胞与问皮细胞表面的聚糖表达谱，因此，我们我们采用了一种不通过荧光标记的凝集素芯片，探索凝集素芯片检测细胞表,,,, 经典论文 博硕论文 博 硕 论 文关键词结论,、胸腔积液中腺癌细胞和反 应性间皮细胞表面的聚糖结构具有明显的差异性,、,,,可以作为一种鉴别胸腔积液中反应性间皮细胞与腺癌细胞的标记物,、应用凝集素芯片鉴别良性胸腔积液中的反应性间皮细胞和恶性胸腔积液中的腺胸腔积液,肺癌,糖生物学,凝集素芯片,细胞病理学癌细胞，对肺癌的诊断具有重要的临床应用价值与反应性间皮细胞。, 经典论文 博硕论文 博 硕 论 文,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,?英文论著摘要?,,,,,;,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,，,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,;,,,,,;”,,,,,;,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,(,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,, ,,,,, 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博 硕 论 文一、标本的收集与处理材料与方法图,，胸水中的问皮细胞。(,(,，,,,,)所有病例均经气管镜组织活检、组织刷片和或细胞学检查所证实。收集中国医科大学附属第一医院,,,,年,月至,,,,年,月门诊及住院患者,,,例男性(,,(,,)和,,例女性(,,(,,)，平均年龄为,,(,岁，年龄范围在,,到,,之间。(,,(,,,)，平均年龄为,,(,岁，年龄范围在,,到,,之间。,,例恶性胸腔积液中有,,患者,,例(肺腺癌,,例)。,,例良性胸腔积液中有,,例男性(,,(,,)和,,例女性,,,例胸腔积液中良性胸腔积液患者,,例(结核,,例和肺炎,,例)和恶性胸腔积液例，于接受任何治疗前采集的胸腔积液。其中男,,例(,,(,,)，女,,例(,,(,,,);...