胆碱酯酶活

胆碱酯酶活性测定（干化学法）操作规程 1.预期用途     快速定性检测人血清、血浆中胆碱酯酶活性。 2.检验原理     胆碱酯酶催化水解乙酰胆碱（Ach）生成乙酸和胆碱，乙酸能使指示剂溴百里香酚蓝（BTB）发生颜色变化，通过颜色的改变反映生成乙酸的量，乙酸量的多少即可表示酶活力的高低；反应结果可与胆碱酯酶活性测定比色表直接进行比色测定。 3.主要组成成份   本产品系由乙酰胆碱(Ach)、溴百里香酚蓝等试剂固定在通过双面胶粘贴有中速滤纸的PVC板上，干燥后裁切成胆碱酯酶活性测定试纸。 4.样本要求 4.1、在无菌条件下采集静脉血样本，尽快分离血清或血浆以避免溶血。 4.2、检测时应使用新鲜标本。 4.3、常规抗凝剂不影响检测结果。 5.检验方法 在进行测试前必须先完整阅读使用说明书。 5.1、取测定试纸一片，放在培养皿中，向反应纸片中央加上8～10μl待测新鲜血清或血浆， 盖上培养皿盖保持密封（保持一定的湿度以防血清蒸发，同时防外界酸碱影响），放置37℃水浴箱中并开始记时。 5.2、11分30秒后取出，所呈现色泽与胆碱酯酶活力比色表(见图一)比较，即得胆碱酯酶活力单位。 5.3、如无水浴箱，根据测定时室温，查附表确定反应所需时间，在到达反应所需时间后立即比色。 5.4、正常值30-80单位，如低于30单位的标本，欲求得较精确的结果，可将时间延长一倍，再观察结果。 附表：20～40℃内反应终点时间表 温度(℃) 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 时   间 22′15″ 21′ 19′45″ 18′45″ 17′45″ 16′45″ 16′15″ 15′45″ 15′15″ 14′45″ 14′15″ 温度(℃) 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40   时   间 14′ 13′30″ 13′ 12′30″ 12′15″ 12′ 11′30″ 11′15″ 10′45″ 10′30″     6.结果判定 阳性：胆碱酯酶活力单位小于30。 阴性：胆碱酯酶活力单位大于等于30。 无效：向胆碱酯酶活性测定试纸加上待测新鲜血清或血浆后不出现墨绿色，表明标本受污染或试纸失效。 7.检验结果的解释 7.1、阳性结果表明胆碱酯酶活力降低，可能是由于有机磷农药中毒或肝实质性损害（如急性肝炎、慢性肝炎活动期、肝硬化失代偿期及肝癌等）造成。 7.2、阴性结果表明胆碱酯酶活性正常。 7.3、检验结果无效时应考虑标本是否受污染，如排除标本受污染，应换用其它批号胆碱酯酶活性试纸重新检测。 8.检验方法的局限性   本法为临床诊断初筛产品，任何检测阳性的样本都应用其它方法进行进一步的确认。 9.产品性能指标 9.1、准确度：胆碱酯酶活性测定试纸对胆碱酯酶质控品各活力单位的检测结果与参考标示值一致。 9.2、批内精密度：活力单位为15的胆碱酯酶质控标准品重复性试验，时间内检测结果与参考标示值相差同向不超过一个量级。 9.3、批间精密度：活力单位为15的胆碱酯酶质控标准品重复性试验，规定时间内检测结果与参考标示值相差不超过一个量级。 10.说明及注意事项 10.1请使用新鲜标本，以防胆碱酯酶活力变化。 10.2已打开的试纸应继续防潮、防晒、防酸碱污染，注意密封、干燥、避光保存。 10.3酸中毒患者禁用此法测定CHE活力。 10.4试纸接触血清后应立即变蓝，如不变蓝，排除酸中毒原因，说明试纸失效不能再用。 10.5温度及时间对结果有影响，应根据要求严格控制温度及对应的反应时间。 10.6反应过程中必须盖上培养皿盖，以防外界酸碱及血清蒸发对结果的影响。 10.7大量标本进行试验时，请作好标记，以免混淆。 10.8用过的试纸请与病人血清标本一同处理。 10.9切忌冷冻或在已过有效期后使用。