乳酸环丙沙星氯化钠注射液和甲硝唑的配伍稳定性考察_王艳

乳酸环丙沙星氯化钠注射液和甲硝唑的配伍稳定性考察_王艳 乳酸环丙沙星氯化钠注射液和甲硝唑的配伍稳定性考察 王艳 徐州医学院附属医院药剂科 江苏 徐州 221002. 摘要: 目的 考察在高温(70?)和室温 (25?1?)下乳酸环丙沙星氯化钠注射液与甲硝唑注射液配伍的稳定性。方法 采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定乳酸环丙沙星和甲硝唑的含量;热分解法、留样观察法考察环丙沙星与甲硝唑配伍液的含量、PH值及外观变化。 -1-1结果 环丙沙星和甲硝唑分别在 4,130µg.mL和20,400µg.mL范围内线型关系良好;平均回收率分别为98.12%和99.69%。高温6h的热分解试验以及室温0,24 h 内的留样观察结果表明, 环丙沙星与甲硝唑在配伍前、后药物残存率均大于95%, PH值、外观均无明显变化。结论 环丙沙星氯化钠注射液和甲硝唑注射液在室温24小时内及高温6小时稳定，二者可以配伍使用。 关键词 乳酸环丙沙星 ;甲硝唑; 反相高效液相色谱方法; 配伍; 稳定性 乳酸环丙沙星为第三代喹诺酮类广谱抗菌药，对革兰氏阴性菌有强力杀菌作用。其注射液用于治疗由革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌感染, 或两种以上细菌的 [1]混合感染，也可用于多重耐药菌株引起的感染。甲硝唑为硝基咪唑类抗菌药， [2]具有很强的抗厌氧菌和抗原虫作用。临床上，常将两者配伍应用治疗胆道等复杂性感染但二者能否混合滴注尚未见报道。鉴于此,本文建立同时测定注射液中乳酸环丙沙星和甲硝唑含量的HPLC法，并应用加热分解试验、室温留样观察 [3]方法考察两者配伍的稳定性，为临床二者合理伍用提供实验依据。 1.仪器与试药 1.1仪器 Waters高效液相色谱仪，515输液泵，2487紫外分光监测器，717自动进样器，Empower色谱工作站(美国)，PH-3B型精密PH计(上海精密科学仪器有限公司)，TG328A天平，KS—80D超声仪，日本岛津UV-2401PC紫外分光光度仪。 1.2试药 乳酸环丙沙星对照品(中国药品生物制品检定所提供, 批号:130451-200302);甲硝唑对照品(中国药品生物制品所提供,批号100191-200305);乳酸环丙沙星氯化钠注射液(广州南星制药有限公司, 规格: 200ml:0.4);甲硝唑注射液(江苏远恒 1 药业有限公司, 规格: 250ml:1.25);乙腈为色谱纯, 其它试剂为分析纯。 2.方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱 XTerra.RP(4.6mm×250mm, 5μm); 流动相:枸橼酸盐缓冲液-乙18 腈(80:20，用三乙胺调节PH值至3.5，使用前超声脱气，用0.45μm的微孔滤膜 -1滤过)，流速:1.0mL?min;柱温:30?;检测波长:277nm;进样量:10μL。 2.3系统适应性实验 分别精密量取上述阴性对照品溶液，环丙沙星、甲硝唑混合对照品溶液，配伍液，按“2.1项”色谱条件进样10µL，色谱图见图1。由图可见供试品溶液呈现与对照品溶液保留时间相同的色谱峰，而阴性对照品无该色谱峰。此条件下的环丙沙星和甲硝唑理论塔板数均大于2000， 二者的分离度大于1.5。表明乳酸环丙沙星氯化钠注射液和甲硝唑中其他成分不干扰供试品的含量测定，并且两者互不干扰其含量测定。环丙沙星和甲硝唑的保留时间t分别为5.8min和 4.6minR 2 (见图1)。 2 1 1 t/min t/min t/min A B C 图1 阴性对照品、对照品和供试品高效液相色谱图 A.阴性对照品溶液;B.对照品溶液;C. 配伍液 1.甲硝唑;2.环丙沙星 2.4线性关系考察 精密量取乳酸环丙沙星对照品贮备液10、20、50、100、150、200μL分别置容量瓶中， 并精密量取1ml流动相加入上述12支试管中稀释定容，摇匀。精密量取甲硝唑对照品贮备液10、20、50、75、125、200μL分别置试管中，精密量 2 取1mL流动相加入上述12支试管中稀释定容，摇匀。取上述系列对照液依次进样10μL，按“3.4.1”项下色谱条件进样10μL，记录色谱图。分别以相应的乳酸 -1环丙沙星和甲硝唑峰面积(A)对浓度(C，μg?mL)进行线性回归，得到乳酸环丙沙星的回归方程为A= 7 546C+11 668，(r=0.9999, n=6);甲硝唑的回归方环环 程为A,8 514C+75 504，(r,0.9998, n=6)。结果表明:乳酸环丙沙星和甲硝甲甲 -1-1唑分别在4,130μg.mL和20,400μg.mL范围内色谱峰面积与浓度具有良好的线性关系。 2.5精密度实验 μL，各重复进样5次。分别精密量取环丙沙星和甲硝唑标准储备液, 进样10 结果两者峰面积基本不变，RSD分别为0.78%， 0.38%。 2.6加样回收率试验 精密量取已知准确乳酸环丙沙星含量的同一批乳酸环丙沙星氯化钠注射液10μL，制备供试品溶液9份，置试管中，再分别精密量取乳酸环丙沙星对照液10、50、150μL各三份加入试管中，精密加入流动相稀释，混匀。在上述色谱条件下依次进样10µL。 精密量取已知准确甲硝唑含量的同一批甲硝唑注射液10μL，制备供试品溶液9份，置试管中，再在分别精密量取甲硝唑对照液10μL，加流动相稀释定容，混匀。在上述色谱条件下依次进样10μL。 依法测定，记录乳酸环丙沙星和甲硝唑的色谱峰面积，按乳酸环丙沙星和甲硝唑的回归方程计算乳酸环丙沙星和甲硝唑的含量，从而计算回收率，RSD分别为:0.69%，1.09%。 2.7稳定性考察 2.7.1留样观察试验 取同一批号的乳酸环丙沙星氯化钠注射液(批号:CFIA05407)和同一批号的甲硝唑注射液(批号:080107)按“2.2.2项”下制备配伍溶液，于室温下放置，分别在0、0.5、1、2、3、4、5、6、12、24h进样10μL，测定其含量，同时测定PH值，观察外观色泽澄明度变化无明显变化。结果表明，二者配伍液放置24小时内稳定。 2.7.2热分解产物的干扰实验 3 取新配制的配伍液先在室温(25?1) ?下,测定其含量，后在70 ?水浴锅内加热6h 后, 再进行含量测定，二者对比，得到药物恒温6h后的残存率(即相对含量)分别为97.33%和97.89%。配伍液的PH值为4.11，外观色泽保持不变。 3.讨论 将乳酸环丙沙星和甲硝唑的混合对照品溶液在紫外分光光度计上进行光谱扫描，结果乳酸环丙沙星在277nm波长处有最大吸收甲硝唑在该波长处有较强吸收且吸收光谱曲线平坦。经考察，选用277nm作为测定波长，二者均有较好并且相近的检测灵敏度，色谱峰分离度均较好，可以确保两者含量测定的准确性，同时此波长处溶剂无干扰。 [4-5]乳酸环丙沙星氯化钠注射液的PH值为3.5,4.6，不宜与有较高PH值的 [6]药物配伍使用。甲硝唑注射液的PH值为4.5, 6.0，两者均呈酸性，配伍后溶液不会因PH值增加导致溶解度降低而产生沉淀现象。本实验结果显示，在留样观察试验及热分解实验中，乳酸环丙沙星与甲硝唑配伍液的PH值分别为 4.09?0.01和4.11?0.01，外观无沉淀现象出现，均较稳定。 乳酸环丙沙星和甲硝唑的配伍液在室温(25?1?)下0h,24h内两者残存率分别为(98.33?1.44)%和(99.85?2.6)%，配伍液的PH值保持相对稳定。高温(70?)下6h配伍液中乳酸环丙沙星和甲硝唑残存率分别为97.33%和97.89%， [7]验证了乳酸环丙沙星和甲硝唑热稳定性好的特性，外观均无变化。结果表明，配伍液在24h及高温(70?)6h内稳定性良好,可以配伍应用。 两者配伍应用时药代动力学、药效动力学及其不良反应将进一步探讨。 参考文献: [1] 陈仙美,郑丽洁.HPLC法测定乳酸环丙沙星滴眼液的含量[J]。中国现代药学杂志，2006， 9，23(18):785. [2] 钟玉莲，杨颖，刘丽芳，赵雪梅.反相高效液相色谱法测定乳酸环丙沙星注射液的含量。 中国药品标准，2000，1(1):42. [3] 朱雪松，郑芳，何婧. 高效液相色谱法测定复方环丙沙星栓中环丙沙星和甲硝唑含量.医 药导报[J]。2007，10，26(10):1218. [4] 邓葵强.环丙沙星注射液的制备[J]。华西药学杂志, 2001, 16(2):159. 4 [5] 刘晓惠.乳酸环丙沙星和头孢拉定的配伍稳定性[J]。华西药学杂志,2001，16(3):248. [6] 严鑫.甲硝唑G注射液制备工艺的改进[J]。中国现代药学杂志,2000，17(15):411 [7] 张建，谭远亮，等.甲硝唑热分解动力学及其含量测定[J]。中国药科大学学报，2000， 31(4):309. 5