【doc】DNA图像定量分析对星形胶质细胞瘤的预后判定

【doc】DNA图像定量对星形胶质细胞瘤的预后判定 DNA图像定量分析对星形胶质细胞瘤的预 后判定 陕西医学杂志1999年4月第28卷第4期201 治疗听神经瘤与手术治疗相比有如下优点:?安 全准确,无手术风险,并发症少;?治疗简便.无痛 苦无创伤.无须住院;?治疗后病死率低,为零.而 肿瘤控制率可达97;?神经功能保留较好,尤 其是面神经.对术前无面神经功能障碍的患者来 说.术后面神经功能保留近i00,已面瘫者治疗 后症状亦有一定程度的恢复. x刀虽是治疗听神经瘤更为安全有效的方 法,但也有并发症,影响其疗效的因素亦很多.故 术前适应证的选择以及定位准确,剂量适当等都 是很重要的问量,对于一些体积较大的肿瘤(直径 >4cm),术前对组织已有压迫损害,照射治疗后 会加重损害.有可能因脑水肿加剧面使颅内压增 高危及患者生命,因此我们建议在这种情况下应 以选择手术治疗为宜,国内有人报道口"】MIR可 清楚地显示病灶周围结构,可以避免治疗中损伤 颅神经及脑干,减少术后并发症,我们也有类似体 会,建议MIR检查应成为x刀治疗的术前常规, 此外放射剂量太大也会出现很多不良反应,应严 格控制周边剂量,以免损伤正常组织,本组周边剂 量为7.5~20Gy,平均15.2Gy,与国内外报道无 显着性差异,14例患者经1年随访均未出现严重 不良反应,但仍需继续观察,积集资料和经验. 参考文献 1ColomboF,BenedettiA.PDmF,etat.Stereotacticir— r~diatiorLhy&cceler&tOt.Neurosurgery1985~t6l154 2丁学华.卢亦成.米成,等.巨大听神经瘤的手术治 疗.中华神经外科杂志,1995I11<4)l229 3插伟炎.姜洒长.听神经瘤手术治疗同题.中华耳鼻咽 喉科杂志.199g~27(2)t81 4昊涛,黄德亮.张秦珍,等.昕神经瘤的再手术.中华 耳鼻咽喉科杂志,1997;32(5)t273 <收稿;1998—05.14) 一 弓 DNA图像定量分析对星形胶质细胞瘤的预后判定 第四军医大学西京医院神经外科(西安710032) 王占祥章湖易声禹张传山:/晏培橙张志文 ?_一 --_一Y {{, 摘要目的:探讨DNA图像定量分析对星形细胞瘸恶性程度判定的意义,以及对其 于页后判定的应用价值.方法:应用定量图像分析(QFIA)和流式细胞光度术(FCM),蛄夸常 规病理学检查方法,对80事I星形胶质细胞瘸手术切除标拳,进行DNA定量分析研宄.结 果:?不同痛理分级的星彤胶质细胞瘸.其DNA指敷(DI)和细胞增磕指敷(PI)分别为:I 级1_4l,51.2;?肿瘸异倍体发 级1.08,36.2,l级1.10,3I8.1氟1_39.49.7,IV 生率随分级的增高而增高{?患者存活时间随r)I和PI值增高而缩短{?二倍体肿癯的复发 率坍显低于异倍体,各级二倍体肿瘤预后优于异倍体,高分级的异倍体肿瘤复发率高,顸后 极差.结论:肿瘤细胞的倍性程度与增殖程度呈正相关,随DNA含量的增加,随异倍 体发生 率的增高,肿瘤复发率增高,术后生存时间缩短,这种相关性对于监洲肿瘤复炭,判 断预后具 至芸床勰学脱M/~fFr硼后舱研南主题词星彤细胞瘤/病理学脱氧挺糖核后,一向I 星形柳胞瘸是临床神经外科最常见的肿瘤之 一 ,其病理形态学现复杂,仅从形态学角度判断 ,采用石蜡包埋材料DNA 其预后较困难.近年来 图像分析方法,对许多实体肿瘤进行了回顾性 *基础韶病理学教研室 DNA分析,结果发现DNA含量与肿瘤预后密切 相关.本研究采用定量图像分析(QFtA)和流式 细胞光度术(FCM)技术,结合常规病理学观察, 对8O倒星形细胞瘤的保留标本进行了DNA定 量分析?辅以对患者临床资料的随访调查探讨 星形细胞瘤的DNA含量与其预后的相关性. Jf,l I ?'J?l?{ 202陕西医学杂志1999年4月第-28卷第4期 资料与方法 1病例资料 采用我院1981,1985年行开颅手术切除,病 理诊断为星形胶质细胞瘤的存档石蜡包埋组织共 80侧,其中男性40例,女性31例,年龄23,72 岁,以31,50岁最多见占52;肿瘤位于大脑半 球56例.位于小脑13例,位于其余部位11侧.另 取10例正常大脏组织蜡块作对照. 2FCM样制备及检测 ?每一石蜡块切取50t~m厚切片.置二甲苯 中充分脱蜡;?梯度乙醇永化;?胃蛋白酶37C 下作用30rain;?过滤,离心,弃上清后调整单个 细胞数在2×10/ml;?RNA酶37C下作用 30rain;@50~g/ml溴化乙锭溶液行细胞核DNA 染色;?用FACS420型流式细胞仪定量检测 DNA含量;?计算DNA指数(DI)和细胞增殖指 数(PI). 3QFIA样品制备及检测口 在切取FCM厚片的同时,每个蜡片切取 5vm厚切片5张,以Schiff试剂进行常规的Feu1 gen染色,然后进行图像分析.采用西德Leilz TAS图像分析仪,每张片子随机测定100个肿瘤 细胞,同时测定同张切片间质中5O个淋巴细胞作 为二倍体对照. 4常规病理形态学观察 每个蜡块均切取8m常规切片5张,经HE 染色制片进行单盲法病理学复查,根据WHO标 准进行分级.. 5临床资料随访 80例星形细胞瘤中,先后对53例病人进行 了2,10年随访. 6资料处理 各组资料均在微机上用统计学处理软件 MST做t检验.统计隶中组标字母木同,表示组 问存在显着差异P<0.01.. 结果 1星形细胞瘤病理分析 按WHO分类80例星形胶质细瘤中,I级 18例,H级23侧,n级22例,?级17例. 2星形细胞瘤分缎与FCM分析结果的关 系 由表1可见.随病理分级的增高,DI和PI值 均增加,且I,?级与?,?级之间存在着显着差 异,表明星形细胞瘤随恶性程度的增加.其DNA 含量增加,细胞增殖状态增高. 表1星彤细胞瘤分级与nI,PI值关系 3星形细胞瘤分级与DNA倍性的关系 由表2可见,随病理分级的增高,异倍体发生 率逐渐增加,I,?级与?,?级之间存在显着差 异. 表2星彤细胞瘤分叛与DNA倍,}生关系 分组n二倍体异倍体异倍体发生率组标 —丁—————————i丽一__ ?2310l356.52A I275l777.27'B ?1731482.35B 4星形细胞瘤的存活时间与DI,PI值的关 系 由表3可见,在得到随访的j3侧患者中,病 理分级与FCM检测的DI及PI值是平行的,并 且随DI和PI值增高.患者存活时间缩短I,? 级与?,级之间存在明显组刷差异. 表3DI,PI值与术后存活时间及病理分级关系 表4复发状况与DNA倍性及病理分级关系 5星形细胞复发状况与DNA倍性的关系 由表4可见,无复发患者多是二倍体I,?级 陕西医学杂志1999年4月第28卷第4期203 患者,而死于复发的患者多是异倍体n,IV级患 者.异倍悻患者总复发率为9O.1,而二倍体总 复发率为50%,二者存在显着差异(尸<0.Q1) 讨论 治疗后的星形狡质细胞瘤有较高的复发率, 对其复发的预测应是治疗全过程中的一个重要方 面.近年来人们对DNA含量测定的各种进 行了详细的研究.但对其预后意义的认识相对进 展缓慢,这是由于肿瘤细胞的异质性和治疗方式 的多维性造成的.大多数理察认为:高的DNA指 数,高的_细胞增殖率总是帮高的恶性程度槽关 联,肿瘤的倍性程度与蜡殖程度呈正相关?,肿 瘤的异倍体发生率,般为60,100],且随 着分期分级的增高而增多,在肿瘤白钰预后方面二 倍体与异倍体有明显的差捌二倍体肿瘤预后较 好.而异倍体肿瘤的复发及病死率较商p. 本组研究结果表明:随星形细胞瘸病理分级 的蠼加,DISIA指数,细胞增殖指数及异倍体发生 率亦增加;随细胞DI,Pl值增加,患者生存时问明 显缩短;各级二倍体肿瘤的预后均优于异倍体,高 分级的异倍体肿瘤预后援差,病死率明显较其它 组别为高.结合以往研究结果,我们认为:DNA倍 性及DNA的DT,PI值不失为一种实用的预测星 形细胞瘤复发机率的参数,将组织病理学与DNA 测定综合运用.无疑是对星形细胞瘤生物学特征 更为精确舶描进. 在组织病理学,细胞学及DNA定量分析的 结果比较中,分级较高的星形细胞瘤中三个参数 相关良好,提示DNA分析的蕊后价值更适用于 临床上分期分级较高的肿瘤. 通过我们对单个患者复发前后的对比观察, 一 般在基形细胞癯复发后DNA含量偏离二倍体 程度增加,细胞分化程度更差,表现为组织病理学 分级的增高.结合实验和随访结果我们认为,对于 二倍体的低级星形细胞瘤,可在严密随访的前提 下给予适度的手术切除(不应影响功能活动),辅 以全身或局部放化疗可望有较好的疗效和预后} 而对于异倍体星形细胞瘤.DNA测定能够提供更 重要的信息,异倍体肿瘤中分级较高者,在初次治 疗时即给予根治性手术切除,可以延长生存时同, 减少复发后对患者的重复手术治疗.同时对于初 次诊治时已有浸润的分级较高的星形胶质细胞瘤 患者,可以利用DNA测定判断哪些患者可望有 较好的治疗效果. 参考文献 1MorkveO.JohnsonTS.F1owcytometricanalysisof headandneckcarcinomaDNAcontentinparaffin emheddedtJuefrombronchialc~inonm.Cytome— try?1991-112i438 2.Danqu.~PO,ChenFIB.PatilJ,4.Imageanalysis verseflowcytometryforDNAploidequantitationof soIt咖ors.MedPa~ol,1993}6t270 3田玉旺,丁华野.吴景,等.肿瘤细聃图像分析.中华 病理学杂志.1995;24:264 4LiJY,JisngYY,ZhangSX?etaLaicaIsignificance ofcellularDNAp|oldyrectalCancerlessthan3cm indiameter.ChinMedSciJ.1993}3l143 5AlbroJ-BauerKD,CharlesL,口,.ImprovedDNA eimenthistogramsfromiormalinqixed,paraffinem— beddedtissuepreparationforDNAflowcytometry. Cyometvy-1993|】4t541 6v丑ndenBergE,V?ovanMW,DeJongB.eta1. Comparisionof~ytOggntieabnormalitiesanddeoxyri— honucleicacidploldyofbenign.borderlinemalignant. anddifferentgradesofmaligantsoletissuetumors. LabInves,1994|70l307 7李玉林.扬正中.张会华.等.细胞形态测量和DNA音 量与AgNOR计数在鼻咽良恶性庸变诊断中的应用. 舯癯防淮研竞.1996}23t18 8SaDiZ.HendrleksJB,PharisPC,,etal,Tissusection imageanalysisofbreastneoplasmas.AmJClin tho1.1993}99'714 9SchmidtD,WisdumeyerP.LeushnerI.et.DNA analysisinhepatoblastomabyflowandimagecytom etry.Cancer.1993;72}2914 (收稿1998.08—17)