蒲地蓝消炎口服液质量控制方法的研究

蒲地蓝消炎口服液质量控制方法的研究 蒲地蓝消炎口服液质量控制方法的研究 齐鲁药事?QiluPharmaceuticalAffairs2012Vo1.3i,No.2 蒲地蓝消炎口服液质量控制方法的研究 蒋磊,孟祥松,李军,益磊,马欣羽 (1.亳州市食品药品检验所,安徽亳州236800;2.安徽中医学院,安徽合肥230031) ? 75? 摘要:目的建立蒲地蓝消炎口服液的质量控制方法.方法采用薄层色谱法定性鉴别,展开剂为三氯甲烷一甲醇 一 甲酸(9:1:0.5),置紫外光灯(365nm)下检视.采用反相高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎口服液中咖啡酸的含量,流 动相为甲醇一磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠1.56g,加水使溶解成1000mL,再加1%磷酸溶液调节pH值至3.8,4.O), 检测波长为323nm,柱温40?.结果薄层色谱中供试品在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点.咖啡酸 在一定色谱条件下能够完全分离,咖啡酸线性范围8.95,53.7Ixg?mL,,平均加样回收率为99.99%;RSD为0.35%. 结论本方法简便快捷,稳定性高,重现性好,可有效地控制蒲地蓝消炎口服液的质量. 关键词:蒲地蓝消炎口服液;咖啡酸;薄层色谱法;反相高效液相色潜法 中图分类号:R927.1文献标识码:A文章编号:1672—7738(2012)02—0075-03 DeterminationofPudilanXiaoyanOralLiquid JIANGLei,MENGXiang—song,LIJun,YILei,MAXin.yu (.BozhouInstituteforFoodandDrugControl,Bozhou236800,China;2.AnhuiUniversityof TraditionalChineseMedicine,Hefei230031.China) Abstract:0bjectiveToestablishamethodforthequalitycontrolofPudilanXiaoyanOralLiqui d.MethodsTLCwas usedinqualitativeanalysisandthechromatographicconditionwasasfollows:trichlormetha ne—methylalcohol—formicacid(9: 1:0.5)asdevelopingagent,toviewbyultraviolet(365nm).ThecontentofcaffeicacidinPudil anXiaoyanOralLiquidwasde- terminedbyRP—HPLCwithmethanol— buferphosphateftakingnatirumbiphosphoricum1.56gtodissolveintowaterto1000 mL,andagainadding1%phosphoricacidtoadjustpHvalueto3.8, 4.0)asmobilephase.Thedetectionwavelengthwas323 nmandthecolumntemperaturewas40?.ResultsCaffeicacidcouldbeisolatedcompletelyatacertainchromatographiccon— dition,thelinearrangeofcaffeicacidwas8.95—53.7g?mL 一,theaveragerecoverywas99.57%withRSDof1.29%.Con- clusionThismethodwasconvenient,withgoodstabilityandreproducibility,andcanbeusedf orthequalitycontrolofPudilan XiaoyanOralLiquid. Keywords:PudilanXiaoyanOralLiquid;Caffeicacid;TLC;RP—HPLC 蒲地蓝消炎口服液是由蒲公英,黄芩,板蓝根,苦地丁四 味中药组成,具有清热解毒,抗炎消肿的功能.可用于疖肿, 腮腺炎,咽炎,淋巴结炎,扁桃体炎等疾病的治疗J.蒲公英 是蒲地蓝消炎口服液的主药之一,现代药理研究表明,蒲公 英的药理作用主要有以下几点:抗菌及抗病毒作用,提高免 疫功能的作用,抗胃损伤作用,保肝胆作用,抗肿瘤作用J. 此外,蒲公英还是一味治疗妇科疾病的良药,单用即有可靠 的效果,若以其为主组方辨证论治疗效更佳.可用于回乳, 更年期综合征,女性腹痛等.蒲地蓝消炎口服液现行国家 标准收载的质控项目中未对蒲公英有效成分进行质量控制, 因此作者拟对处方中蒲公英的有效成分咖啡酸进行定性定 量控制研究.首先采用薄层色谱法作定性鉴别,并以口服液 中特异性较强的咖啡酸为指标,为了有效地控制制剂质量, 采用RP—HPLC法对处方中蒲公英的咖啡酸进行含量测定, 考察蒲地蓝消炎口服液中咖啡酸的线性范围,专属性试验, 精密度考察,重复性试验,稳定性试验,回收率试验,为蒲地 蓝消炎口服液的质量控制提供简便可行,重现性好的方法, 从而建立蒲地蓝消炎口服液的质量控制标准. 1仪器,试剂与试药 1.1仪器高效液相色谱仪:型号:Agilent1200,Hypersil ,G1329A自动进样 ODS(4.6mmx250mm,2.5Ixm)色谱柱 器,G1316A柱温箱,G1315D检测器(上海禾工科学仪器有限 公司),超声仪:型号:JL360DT(上海吉理超声仪器有限公 司),三用紫外分析仪:型号:uV一8(无锡科达仪器厂),离心 ? 76? 沉淀机:型号:80—2(上海手术器械厂),分析天平:型号:ES 一 180J(沈阳龙腾电子称量责任有限公司),分析天平:型号: AB135一S(瑞士梅特勒一托利多),数显恒温水浴锅:型号: HH—S6(江苏省金坛市金城国胜实验仪器厂),酸度计:型 号:PHS一25(上海第二分析仪器厂). 1.2试剂与试药咖啡酸对照品(中国药品生物制品检定 所,批号:110885—200102);水(娃哈哈纯净水,杭州娃哈哈 集团有限公司,批号:20110409);乙腈(色谱纯,国药集团化 学试剂有限公司,批号:20110209);甲醇(色谱纯,国药集团 化学试剂有限公司,批号:20110209);其他试剂均为分析纯. 1.3药品蒲地蓝消炎口服液(市售). 2方法与结果 2.1薄层色谱分析 2.1.1供试品溶液的制备取本品l0mL,用乙酸乙酯振摇 提取2次,每次20mL,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液j. 2.1.2阴性对照溶液的制备取除蒲公英以外的其他3味 药材按处方制备成缺蒲公英的样品,同2.1.1法制成阴性对 照溶液. 2.1.3对照品溶液的制备取咖啡酸对照品,加甲醇制成 每1mL含0.5mg的溶液,作为对照品溶液. 2.1.4薄层色谱分析展开剂:三氯甲烷一甲醇一甲酸(9 :1:0.5),方法:吸取上述三种溶液各5,分别点于同一硅 胶G板上,放入展开缸中展开,取出,晾干.置紫外光灯(365 nm)下检视.供试品与对照品药材在相同的位置上显相同 颜色的斑点,阴性对照则不显斑点,见图1. 123 图1蒲地蓝消炎口服液的薄层鉴别 1.对照品,2.供试品,3.阴性对照品 2.2高效液相色谱分析 2.2.1色谱条件HypersilODS(4.6mm×250mm,2.5 m)色谱柱;流动相:甲醇一磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠 1.56g,加水溶解为1000mL,再加1%磷酸溶液调节pH值 至3.8,4.0);检测波长323nm;流速1.0mL?min,;柱温 40?.理论板数:以咖啡酸计算应不低于3000. 2.2.2溶液的制备 2.2.2.1对照品溶液精密称取经五氧化二磷减压干燥 齐鲁药事?QiluPharmaceuticalAffairs2012Vo1.31,No.2 24h的咖啡酸对照品8.95mg,置100mL量瓶中,加甲醇溶 解并定容至刻度,摇匀,即得. 2.2.2.2供试品溶液取本品2mL,置10mL量瓶中,加 5%甲酸的甲醇溶液至刻度,摇匀,离心,取上清液,置棕色瓶 中,即得. 2.2.2.3阴性对照液取除蒲公英以外的其他3味药材按处 方制备成缺蒲公英的样品,再按供试品溶液方法制备,即得. 2.2.3标准曲线的制备取按2.2.2.1项下制备的对照品溶 液,分别取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0mL置于10mL量瓶中, 加甲醇定容至刻度,摇匀,即得.分别进样10,记录色谱 图,由峰面积(1,)对相应的浓度()直线回归,得咖啡酸回归 方程为:Y=33.402X+16.38,r=0.999,表明咖啡酸在8.95, 53.7g?mL的浓度范围内线性相关(见表2,图2). 表2咖啡酸标准曲线 恒 鹫 浓度(峙'mL.) 图2咖啡酸标准曲线 2.2.4专属性试验分别取对照品溶液,样品溶液,阴性对 照液注入色谱仪,记录色谱图,从图3,4,5中可以看出,咖啡 酸与其相邻峰完全分离,阴性对照色谱图在对应的咖啡酸峰 位置处无干扰峰,即表明其他组分对测定无干扰.咖啡酸峰 与其他组分峰的分离度都大于1.5.对照品液相色谱图(见 图3,4,5). 一 图4样品色谱图 曲.?????...,一一 皿 齐鲁药事?OiluPharmaceuticafAffairs2012Vo1.31.No.2 图5阴性对照色谱图 2.2.5精密度考察取同一对照品溶液连续进样5次,进 样量10,测定峰面积,计算RSD为0.26%.表明仪器与 色谱条件具有良好的精密度. 2.2.6重复性试验取同一批号的样品5份,按2.2.2.2 项制备供试品溶液,分别精密吸取各供试品溶液10注人 高效液相色谱仪.测定峰面积,结果连续5针供试品峰面积 的RSD为0.30%,表明含量测定方法的重复性良好. 2.2.7稳定性试验取同一样品溶液,在0,2,4…6810h 分别进样10,依法测定峰面积,结果6次测定的咖啡酸峰 面积RSD为0.01%,表明样品溶液在10h内相对稳定. 2.2.8回收率试验精密量取同一批已知含量的供试品 (含咖啡酸浓度为91.94wg?mL)2mL6份,分成3组,每 组2份,分别置5mL量瓶中,分别加入咖啡酸对照品(含咖 啡酸浓度为89.5g?mL)1.8,2.1,2.4mL,加甲醇定容, 按2.2.2.2方法制备,按2.2.1项下分别进样10,记录色 谱图,计算咖啡酸的回收率(见表3). 表3咖啡酸回收率计算结果 2.2.9样品含量测定将4批不同批号的蒲地蓝消炎口服 液按2.2.3方法制备,进样10,测定峰面积,按外标法计 算含量(见表4). 表4咖啡酸含量测定结果 ? 77? 3讨论 本实验采用硅胶G板,以三氯甲烷一甲醇一甲酸(9:1: 0.5)为展开剂,置紫外光灯(365nm)下检视,斑点清晰.RP — HPLC在选择检测波长时,经紫外一可见分光光度计扫描, 咖啡酸在323.2nm处有最大吸收,故选323nm作为检测波 长. 4结论 本方法可通过简单有效的方法首先对蒲地蓝消炎口服 液中咖啡酸进行薄层色谱定性鉴别,确定其中含有咖啡酸, 之后采用高效液相色谱法进行定量检测,从而有效地控制蒲 地蓝消炎口服液中蒲公英的投药量,为蒲地蓝消炎口服液质 量控制提供了准确,简便,可行的方法. 参考文献: [1]曹兵,胡春雪,熊叶红,等.蒲地蓝消炎片质量控制方法 研究[J].大理学院,2008,7(8):4—6. 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