网织血小板检测及临床意义

网织血小板检测及临床意义 l临床血液学杂志2001年1月第14卷第一期 网织flit.-J,板检澳及f缶床意_.vzL 于峰刘瑛李研王捷 ?4j? ? 综述? [关键词]同织血小板;血液学检测 [中图分类号]R446.11[文献标识码A[文章编号]1004Z806(2001)010045—02 巨核细胞数和形态的观察一直作为判断骨髓 血小板生成情况的手段应用于临床,但骨髓穿刺和 骨髓活检不仅给患者带来痛苦,而且容易造成人为 误差.l969年Ingrain和Coopersmilh应用新亚甲 蓝染色发现放血后的Beagle犬外周血液中含有一 种清晰的浓染网状结构的血小板,被命名为网织血 小板(Reticulatedplalelet.简称RP).放血前RP为 0.8,3.0.放血后5,10天增加至6以上,认 为这种RP与网织红细胞类似,能反映骨髓血小板 的生成状态由于检测技术的进步,RP的检测 已应用于临床.现就其检测方法及其临床意义作综 述. l检测方法 Ingrain等对正常人用同样方法也可看到含有 清楚的斑点样网状颗粒的血小板.而且与血小板体 积大小无关.由于血小板中网状结构的颗粒非常 小,数量又少,在普通光镜下检测非常困难,所 RP的检查很长时间未教临床应用 自1986Iee等研制出能与活细胞结合的核 酸.尤其与RNA结合的合成荧光色素一噻唑橙 (thiazoleorange,TO)后.又诞生了流式细胞仪, 1990年Kienast等.用TO作为RNA的荧光染 色.通过流式细胞仪能够比较容易地检测出含有 RNA的血小板,从此开创了RP的自动化TO计数 方法,用该法测定50例正常人RP为8.6?2.8 (2.8,l5.8),2l例特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患者RP明显增加,可达24.9=l0.9 (13.3,57.1),此法对鉴定T0阳性血小板比 较容易而准确,不足之处是需把TO和血小板共同 孵育lh以上,时间较长,而且垒血标本受网织红 细胞的荧光干扰较大. 1995年Richards等在上述方法的基础上作 了一些改进,将全血标本改为血浆.用缓冲液冲洗 后,主要采取1甲醛固定,再用TO染色,经流式 细胞仪测定525nm波长处的荧光强度即为RP 数,同时计数血小板总数即求出RP的比值l999 年林悟等'又进一步对TO法作如下改良:?血小 板经过固定;?TO浓度需要稀释8倍;@染色时间 国家沈阳新药安全评价研究中一(洗fEt,110021) 审棱者 60,l20rain,置于室温暗处;@染色不影响血小板 数:?用抗CDh单克隆抗体集聚血小板.通过已 上改良,TO法收到良好效果.但仍有操作复杂费时 之弊. l995年渡道清明等建立了一种用奥黄o (AuramineO,AO)作为RNA染色剂的RP自动化 AO计数法.主要将RP检测软件安装在自动网织 红细胞检测仪上.具体方法是将外周血标本200l 吸人自动RP检测仪内.其中l0l用于检测,10l 的全血立即与40I2.6的AO溶液(95.9乙二 醇和1950l稀释液)混合.短时间内血小板就被 AO染色.取2.4/*1混合液进人测量室,用波长488 nill的氩激光照射即可自动检测前向散射光强度和 荧光强度的散点分布凰.前者散点为血小板总数, 后者散点为RP数这种方法精确度好.而且标本 在4C和22c中可稳定保存l2h.其最大特点是检 测外周血标本仅80S即可检测完毕,为临床应用创 造了条件. 2临床意义 RP是与网织红细胞同样在细胞质中残留 RNA的血小板,是骨髓释放出的新生血小板.可反 应血小板生成状态由此可见,检测外周血的RP 对鉴别血小板减少症有一定的诊断价值虽然检测 方法不同,其结果都显示出血小板生成活性. Kienast等'用TO法检测jO例正常人和2l例 ITP患者的RP.结果分别为8.6?2.8(2.8 , l5.8)和26.9?10.9(13.3,57.1). 林悟等用改良的TO法检测RP.结果健康者RP 为8.7?2.2.48例ITP患者RP高达23.6? l3.3.渡边清明等"用AO方法检测2O例ITP 患者RP,结果血小板总数为(50.7?2l)×l0./ I,RP比率为4.95?3.23,RP绝对值为(2.12 ?1.15)×l0/I;而60例健康人分别为(230.0? 53.3)×l0/I…098?0.4l%和(2.12?0.69)× l0./L.可见ITP患者RP比率明显增高,说明RP 的检测是ITP的重要诊断指标. 再生障碍性贫血,急性白血病,恶性淋巴瘤侵 及骨髓等患者的血小板减少,而RP比率与健康人 对照基本相似".急性白血病化疗后血小板数缓慢 上升前的几天,其RP比率即开始明显增高.I例急 ?46? 性白血病骨髓移植后,也是在血小板数增加之前4 , 5天,其比率开始上升,可见RP检测对了解骨髓 被抑制后恢复血小板生成功能具有一定的意义 Peterec等观察到孕龄<30周的新生儿RP 为8.81?j.1.而3O,35周或>36周新生儿的 RP分别为4.6?1.7和4.012.4,与成年 人相近似.1名血小板生成减低的新生儿的RP仅 为1.5,绝对值也明显减低,而在6例患免疫性血 小板减少症的新生儿RP高达38.3=23.1.明 显高于无血小板减少症的新生儿(P?0.01).可 见,RP控制有助于新生儿血小板减少的病因分析. Himmelfarb等观察血液透析和腹膜透析患 者的血小板总数和RP,结果血小板总数无变化,而 RP却明显增加,提示血小板的更新加速可提供血 小板的消耗.小池由佳子了2例原发性血小 板增多症(Essentialthrombocythemia,ET),其血 小板总数和RP绝对值高达正常人3倍以上,但RP 比率接近正常.Rinder等观察了14例ET并发 血栓形成时的RP为14.7?1O.1,而23例无血 栓形成并发症的ET的RP仅为3,4?1,8,与 83例健康者RP的3.4?1_3基本相同,说明在 ET时检测RP对并发血栓形成有一定临床意义. [参考文献] 1渡道清明,IlJI告榜子,武内惠.阚血小板Auramine0牵 用自勒撩出法E瞳床臆用.瞧床血液,l995,36(4): 267,271. 2RichardsEM.BaglinTP.Quantitationofreticulated plate[ets:methodologyandclinicalapplication.BrJ Haematol,1995.91445451. 3KienastJ—SchmitzG.Flowcytometricanalysisof thiazoleOrangeuptakebyp[ateletsradiagnosticaidin theevaluationofthrombocytopenicdisorders.Blood, 199075:116一l20 4林悟,押田真知予.清井映男,等.阿状血小板测定法 基础的检讨扫土各种血小板减少症c二拈{于丙阿状血 小板测定.临床血液,1999.40(3);205—21l_ 6小池由佳予.阿血小板.临床医,1999,25(1)r9292. 6PeterecSM.BrennanSA.RinderHM.etaI ReticulatedPlateletvaluesinnormaland thrombocytopenicneonates.JournalofPediatrics. 1996,l89(2):269274. 7HimmelfarbJtHolbrookD,McmonagleE,eta【 Increasedreticulatedplateletsindialysispatients KidneyInt,1997,5l1834837 8RinderHM,ScbusterJE.RinderCS,eta[.Correlation ofthrombosiswithincreasedPlate[etturno~erin thrombocytosis.B1ood,1998gl(4):l288一】294 (收稿日期 (责任蝙辑 20000920j 王挂) 小儿多发性骨髓瘤1例 空艳张曼张春和 [关键词:多发性骨髓瘤;浆细胞 [中图分类号]R733.3[文献标识码]D[文章编号]1004—2806(2001)0l0046—0l 患者.女,12岁.因头晕,乏力,骨痛3个月,于 2000年1月8日人院.体检:贫血貌,神志清楚,精 神差,粘膜无黄染及出血点,浅表淋巴结无肿大.胸 骨,肋骨压痛.心,肺听诊无异常,腹软,肝脾肋下未 触及.实验室检查血红蛋白81g/l,白细胞7.3× 10.儿,血小板320×10/i,血沉125mm/h:尿素 氨9,7mmo/L,肌酐632#mol/L,血清总蛋白 132,0g/l,自蛋白32,1g/L;尿本周蛋白一,血清 蛋白电泳出现异常M蛋白带,血清lgG104g/I, IgA0.39gtT,IgM051g/L;血钙4.10mmd./L, 骨髓活检异常浆细胞占30.组织化学检查:过氧 苏丹黑B脂类染色,特异性酯酶染色 化物酶染色, 均阴性;非特异脂酶染色法阳性率为86.积分 128分;NAE加氟化钠抑制试验抑制,糖原染色 淹州市人民医院捡验科(河北淹州,06t000) 白求恩医科大学第一壮床学院捡验科 法阳性率为16,积分16分;a丁酸萘酚酯酶染色 阴性,酸性磷酸酶染色阳性率为10O,积分176 分,ACP加酒石酸试验阴性.x线检查见双侧肋骨 骨质疏橙,可见大小不等的溶骨性缺损.肋骨病理 活检见异常浆细胞,诊断为多发性骨髓瘤.经M.方 案化疗1个疗程,骨痛等症状明显减轻.贫血症状 有所改善,血清蛋白电泳Y区M蛋白带消失,骨髓 中浆细胞占1.血钙2.13mmol/I,血尿素氮7.8 mmol/I,肌酐137#mol/I,患者出院. 讨论多发性骨髓癌是浆细胞恶性增生引起 的肿瘤性疾病,多发生于50,70岁之间,男女之比 约为3:1.国外报告最小发病年龄为18个月,国 内报告最小发病年龄为14岁.本文为12岁,实为 罕见 (收稿日期{2000—0404) (责任蝙辑:王挂)