高效液相色谱法测定左氧氟沙星滴耳剂中的主药含量

高效液相色谱法测定左氧氟沙星滴耳剂中的主药含量 高效液相色谱法测定左氧氟沙星滴耳剂中 的主药含量 安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2009Jun;13(6)?609? 高效液相色谱法测定左氧氟沙星滴耳剂中的主药含量 郭润勤 (河南省洛阳市药品检验所,河南洛阳471003) 摘要:目的采用高效液相色谱法测定左氧氟沙星滴耳剂中左氧氟沙星的含量.方法采用美国 Waters高效液相色谱仪,以 枸橼酸(0.05tool?L枸橼酸溶液用三乙胺调节pH值至4.0)一乙腈(72:28),流速1.0ml?min,, 检测波长293nm,柱温: 35?.结果左氧氟沙星的线性范围为30.1,301.0mg?L,,(r:0.9997),平均回收率(n=6)为 99.6%.结论本法可准 确测定左氧氟沙星滴耳剂中左氧氟沙星的含量,适用于产品的质量控制. 关键词:左氧氟沙星;高效液相色谱;含量 Determinationoflevo-ofloxacininlevo.ofloxacineardropsbyHPLC GU0Runqin (LuoyangInstitute-厂0rDrugControl,Luoyang,Henan471003China) Abstract:AimToestablishanHPLCmethodfordeterminingthecontentoflevo.ofloxacininlevo—nnox acincardtops.MethodUsing USWatersHighPerformanceLiquidChromatographinstrumentwasusedwithcedratacidf0.05mol?Lc edratacidsolutionadjusted withtriethylaminetopH4.0)一 acetonitrile(72:28)asthemobilephasewhoseflowvelocitywas1.0ml?minandtestwavelength was293nm.Thetemperaturewas35?.ResultThelinearrangewasfrom30.1to301.0mg?L(r=0.9997)andtheaveragere— coverywas99.6%(n=6)forlevo—ofloxacin.ConclusionThismethodcanbeusedasameasuretodeterminetheexactcontentofle— VO—ofloxacininlevo—ofloxacineardropsandasacontroloverproductqualityaswel1. Keywords:levo一0noxaein:HPLC;content 左氧氟沙星滴耳剂主要成分为左氧氟沙星(3g?L)以 水作为溶剂.用于外耳道炎,鼓膜炎,化脓性中耳炎及中耳手 术后感染的治疗0.左氧氟沙星是氧氟沙星的左旋异构 体,抗菌活性为氧氟沙星的2倍,作用机制为抑制细菌DNA 转移酶(细菌拓扑异构酶)的活性,阻碍细菌DNA的复制. 本文采用高效液相色谱法测定左氧氟沙星滴耳剂中左氧氟沙 星的含量,方法准确,简便,重复性好,可作为控制左氧氟 沙星滴耳剂质量的方法. 1仪器与试药 美国Waters2695高效液相色谱仪,Waters2996二极管 阵列检测器;EmpowerPro色谱工作站;AEG一120G电子天 平(日本岛津公司);左氧氟沙星对照品(中国药品生物制品 检验所),枸橼酸,三乙胺为分析纯,甲醇,乙腈为色谱纯.左 氧氟沙星滴耳剂由河南科技大学第一附属医院制剂室提供. 表1黄芩苷加样回收率试验结果 3讨论 本品处方中黄芩为君药,其主要有效成分为黄芩苷,黄芩 苷元,汉黄芩素,汉黄芩苷等黄酮类化合物,黄芩中黄芩苷是 其最主要的有效成分,黄芩苷具有广泛的药理活性,如抗菌, 抗病毒,抗氧化,抗炎,抗变态’.体外培养证实,黄芩苷能 抑制金黄色葡萄球菌外毒素诱发的T淋巴细胞的增殖,降低 炎症介质IL一1,IL一6,TNF和巨嗜细胞炎症蛋白的水平; Krakauer等认为黄芩苷减轻金黄色葡萄球菌外毒素诱发的病 理损害可能是通过阻断细胞的信号通讯通路而发挥作用; 另外,黄芩苷与B一内酰胺类青酶素合用能有效提高对耐青 霉素金黄色葡萄球菌的抗菌效价.以上结论可能提示烧 伤酊的作用机理. 由于黄芩苷药理活性与临床作用相一致,因此选择黄芩 苷作为烧伤酊质量控制中含量测定的指标,黄芩苷的含量测 定方法报道较多’.,但本品中黄芩苷的HPLC含量测定未见 报道,建立的HPLC测定方法简便,准确,重现性好,可作为烧 伤酊的质量控制方法. 参考文献: [1]李彤彤,李宏,侯茂君等.黄芩化学成分及黄芩苷提取方法研究 进展[J].天津药学,2002,(3):7. 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(收稿日期:2009—02—24) ? 610?安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2009Jun;13(6) 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:C柱(4.6mmx250mm,5um),柱 温:35~C,流动相:枸橼酸(0.05mol?L枸橼酸溶液用三乙 胺调节pH值至4.0)一乙腈(72:28),流速1.0ml?rain,; 检测波长293nm;进样量10l. 2.2线-陛关系精密称取经105~C干燥至恒重的左氧氟沙 星对照品75.25mg,置50ml量瓶中,用0.1tool?L的盐酸 溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液.精密吸取对照 品储备液0.2,0.5,1.0,1.5,2.0ml,分别置10ml量瓶中,用 0.1tool?L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,在2.1色谱条件下 测定,以峰面积A与浓度c绘制曲线,得线性回归方程: A=5.326×10+4.950×10C,r:0.9997,线性范围为30.1 , 301.0mg.L, 2.3精密度试验取2.8项下对照品溶液l0l注入液相色 谱仪,连续进样5次,平均峰面积为1.12×10,RSD为0.28%. 2.4稳定-性试验取2.8项下供试品溶液,室温下放置,保 持色谱系统稳定,分别于0,2,6,10,12h进样测定,考察溶液 的稳定性,测得平均峰面积为1.08×10,RSD为0.46%.表 明供试品溶液12h内稳定. 2.5重复性试验取批号为080526的样品5份,按2.8项 下测定方法操作,测得左氧氟沙星的平均含量为3.102g? L,,RSD=0.34%. 2.6回收率试验精密量取已知含量(3.092g-L)的左 氧氟沙星滴耳剂2.0ml,共6份,分别置25ml的量瓶中,分别 精密加入左氧氟沙星对照品储备液3.0,4.0,5.0ml,每一浓 度各2份,加0.ttool?L的盐酸溶液稀释至刻度,摇匀.精 密量取3ml,置10ml量瓶中,用0.1tool?L盐酸溶液稀释 至刻度,摇匀.按2.8项下样品测定方法测定,结果见表1. 表1回收率测定结果(n=3) 2.7阴性干扰试验取不含左氧氟沙星的空白溶液照2.8 项下供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液.分别取2.8 项下对照品溶液,供试品溶液,及上述阴性对照溶液,在2.1 色谱条件下进行测试,在供试品谱图中,与对照品谱图相同保 留时间处有吸收峰,而阴性对照溶液在此保留时间处无干扰 峰见图1 abC 图1左氧氟沙星含量测定色谱图A.对照品溶液;B.供试品溶液;c.阴性对照溶液 2.8样品测定取对照品储备液1ml置10m1量瓶中,用 0.1tool?L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液. 精密量取样品溶液5.0ml(约相当于左氧氟沙星15mg),置 100ml的量瓶中,加0.1tool?L的盐酸溶液稀释至刻度,摇 匀,作为供试品溶液.在2.1色谱条件下测定,记录色谱图, 按外标法以峰面积计算其含量.结果见表2. 表2含量测定结果(n=3) 3讨论 3.1检测波长的选择左氧氟沙星滴耳剂是由左氧氟沙星, 尼泊金,甘油和纯化水配制而成,分别取一定浓度的左氧氟沙 星对照品,左氧氟沙星滴耳剂样品以及不含左氧氟沙星的辅 料在200,400nm波长内扫描,结果对照品与样品在293nm 波长处有最大吸收,而辅料在此波长处无吸收,表明辅料无干 扰,故选择293nm作为测定波长. 3.2检测方法的选择左氧氟沙星的含量测定有高效液 相色谱法,紫外分光法,荧光光度法,差示紫外分 光法.高效液相色谱法是现代分离测定的重要手段, 鉴于其简便,快速,灵敏,准确,在医药卫生,食品,环保等 各个领域得到广泛的应用.我国已将该法收于药典. 本文采用高效液相色谱法测定左氧氟沙星滴耳剂中左氧 氟沙星的含量,测定准确,重现性好.适合于该制剂的药 品质量控制. 3.3流动相的选择本法主要参考中国药典对氧氟沙星注 射液的含量测定,三乙胺调节pH并作为扫尾剂,流动相比例 稍微做了调整,柱效和峰形均达到了最好. 参考文献: [1]薛卫国,孙洁,金铮,等.盐酸左氧氟沙星滴耳液治疗中耳炎 的疗效观察[J].山东大学耳鼻喉眼学报,2006,20(4):300—6. 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[6]国家药典委员会.中国药典(二部)[s].北京:化学工业出版社, 20oO:7l2. 安徽医药AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal2009Jun;13(6)?611? 固相萃取一高效液相色谱法测定水中残留嘧菌酯 王茜,钟文英,黄山 (1.中国药科大学,江苏南京210038;2.上海中科合臣股份有限公司,上海200010) 摘要:目的建立固相萃取-高效液相色谱法分析测定水中残留甲氧丙烯酸酯类抗菌剂嘧菌酯 的含量.方法样品经过固相萃 取小柱净化富集后,采用Ine~silODS?3色谱柱,乙腈一水(60:40)为流动相,在250nm紫外检测 波长下进行高效液相色谱分析. 结果嘧菌酯在0.01—1.0mg?L范围内呈现良好线性(r=0.9992).在低,中,高三个添加水平,嘧 菌酯的回收率为91.5% 一 105.2%,相对标准偏差3.7%一8.2%.结论本法操作简便快速,可作为水中嘧菌酯含量监测的 控制方法. 关键词:固相萃取;高效液相色谱法;嘧菌酯;残留分析 Determinationofazoxystrobinresiduesinsurfacewater byHPLCwithsolid.phaseextraction wANGQian,zHONGwen.ying.HUANGShan (1.ChinaPharmaceuticalUniversityNanijng210038;2.ShanghaiSynicaCorporationLid.,Shanghai2 00010) Abstract:AimAhighperformanceliquidchromatographicmethodwithsolid—phaseextractionwasusedforthedeterminationofazoxys— trobininsurfaeewater.MethodThemethodologyconsistedofapreconcentration/SPE(solidphaseextra ction)stepandHPLC—UVa— nalysis(InertsilODS-3chromatographiccolumn;acetonitrile—water(60:40);250nmdetectionwavelength).ResultGoodlinearityof azoxystrobinwasobtainedovertherangeof0.0l一 1.0mg?L(r=0.9992).Theaveragerecoveriesatthreeconcentrationsof0.O1. 0.1.1.0mg?L,rangedfrom91.5%,105.2%withrelativestandarddeviation3.7%一 8.2%.ConclusionThemethodisfastand simplefortheresiduedetectionandanalysisofazoxystrobininaquaticsystems. Keywords:solid—phaseextraction;HPLC?UV;azoxystrobin;residueanalysis 当前世界各地,农药被广泛应用于各类农作物的种植生 产中.农药特别是具有一定极性的农药通过喷洒等方式经由 土壤很容易进入到地表水中,从而造成对周围水质的污染. 嘧菌酯是以天然抗菌素为模板,通过人工仿生合成的一 种全新B一甲氧基炳烯酸脂类杀菌剂….它通过抑制病菌的 呼吸作用来破坏病菌的能量合成使其丧失生命力.目前,此 种农药以其良好的作物安全性和非常突出的环境相容性,已 在全球72个国家80多种作物病害上获得登记,成为全球病 害管理的首选.对嘧菌酯残留进行准确有效的测定是当前世 界各国研究的热点.美国,加拿大,欧盟等均规定了多类农产 品中的残留限量.目前国内外关于嘧菌酯残留检测的方法主 要有气相色谱一氮磷检测(法Gc—NP),气相色谱一电子捕获 检测法(GC—ECD),气相色谱一质谱检测法(GC—MS)和液 相色谱-质谱检测法(HPLC.MS)等.有关嘧菌酯残留测定的 研究对象多为蔬菜,水果等农作物产品’,而对水中嘧菌酯 的残留检测研究尚未见报道.本文采用固相萃取作为样品处 理技术,富集样品中的嘧菌酯,并利用高效液相色谱对其进行 通讯作者:钟文英,女,副教授,硕士生导师,研究方向:光谱分析,E. mail:wenyingzhongnj@163.corn 分析测定.该方法简便,快速,可作为环境监测的有效检测方 法之一在实践中加以应用. 1仪器与试药 1.1仪器Agilent1100Sefise高效液相色谱仪配G1312ABin Pump液相泵,G1316AColcomp柱温箱,G1314AVWD检测器, G1322ADegasser在线真空脱气机,GI313AALs自动进样器(美 国Agilent公司);Oasis}Il出200rag,6ml固相萃取小柱(Waters公 司);SilicaSPE小柱500mg(美国PEPUCOCompany). 1.2试药嘧菌酯标准品(纯度99.5%,德国Dr.Ehrenstorf- er公司);乙腈(色谱纯);屈臣氏蒸馏水;污染水样于2008年 9月采自上海中科合臣股份有限公司附近河水中. 2方法与结果 2.1色谱条件InertsilODS-3色谱柱(5m,4.6mm×250 mm),流动相:乙腈一水(60:40);紫外检测波长250nm;流速 0.5ml?min,;进样量2Otzl;柱温25?. 2.2样品溶液的制备将污染水样经0.45m的过滤膜过 滤,取其中500ml作为样品.依次用4.0ml乙腈和4.0ml蒸 馏水润湿活化小柱,将500ml水样上柱,抽干,再用2ml乙腈 分3次洗脱小柱,抽干并收集全部洗脱液,控制萃取和洗脱速 [7]邹鲜红,彭韪,肖拥军,等.高效液相色谱法测定盐酸左氧氟 沙星软膏中主药的含量[J]中国药房,2005,16(12):946—7. 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