45X-46XY,Yqh-嵌合体伴Y染色体AZFbc区缺失1例_17823
45X/46XY,Yqh-嵌合体伴Y染色体AZFbc区缺失1例
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作者:郑毅春 张畅斌 王游声 周庆葵
【关键词】 45X/46XY Yqh-嵌合体 Y染色体 AZFbc区缺失
临床资料
患者,男,28岁,因婚后未避孕未育3年而就诊,查体:第二性征正常,身高173 cm,生殖器官发育正常,睾丸大小形态正常,附睾头、体、尾未及明显增粗增厚,精索静脉未见曲张;3次精液常规及沉渣图片镜检均未见精子及生精细胞,内分泌6项(泌乳素、促卵泡生成素、促黄体生成素、孕酮、雌二醇和睾酮)检查结果均正常。患者父母非近亲结婚,育2子1女,患者在兄弟中排行第二,其兄及妹妹均已婚已育,小孩均健康。
方法
1.细胞遗传学和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测:按常规技术行外周血淋巴细胞染色体GCG100个淋巴细胞, C10个淋巴细胞。用X染色体和Y染色体着丝粒探针(CEP X with spectrum green,
CEP Y with spectrum orange,vysis,downers grove,IL;item no.32111051)进行FISH检测,
10个中期分裂相和50个间期细胞。Olympus BX 51荧光显微镜采集信号,Cytovision 3.0(applied imaging)软件分析图像。
2.PCRSTSs检测AZF区域的缺失:从外周血中提取基因组DNA,用多重PCR检测Yq11.2上的无精子因子(azoospermia factor,AZF),选择6个STS位点,分别是位于AZFa的sY86和sY84,位于AZFb的sY127和sY134,位于AZFc的sY254和sY255。SRY和ZFX/ZFY作为试验的内对照同时进行扩增。除ZFX/ZFY引物外,其他引物和扩增条件按照EAA/EMQN试验指南进行[1]。ZFX/ZFY引物为正向:5ACTGCCCGCCTGTCACTGC3,反向:5ACGTCGGTAGTCAGAGGAT3,PCR产物为690 bp。 结果
患者外周血淋巴细胞染色体核型为45,X/46,XY,Yqh40?60。CY染色体长臂的异染色质部分丢失。多重PCR显示AZFa区域的sY86和sY84位点存在,但AZFb和AZFc区域的位点sY127、sY134、sY254和sY255均丢失。
讨论
精子发生(sperm alogenesis)是指生精上皮的干细胞发生到成熟精子的一系列变化过程,
其中任何一个环节异常均可导致男性不育。近年来越来越多的证据
明,男性不育尤其是无
精症或少精症的发生与遗传因素有关,与染色体异常有关。在男性不育患者中染色体异常发
生率为2 %,5 %,在无精症中更高达15 %[2]。
图1 染色体核型46,XY图2 染色体核型45,X图3 多重PCR分析Y染色体缺失的区域
近年来的研究表明,控制精子生成的基因主要位于Y染色体的q11上,称为AZF,AZF由
4个互不重叠的AZFa、AZFb、AZFc和AZFd区域组成[3]。大约15 %无精症患者和5 %,10 %
少精症患者有Y染色体的微缺失[4]。目前认为AZF4个功能区在男性生殖细胞发育的不同时
期起着重要作用,不同区域的缺失可有不同的临床表现[5],其中AZFa区缺失,可导致青春
期精子发生阻滞,与严重少精有关;若AZFb区缺失,减数分裂前的生精上皮细胞正常,而减
数分裂后细胞缺乏,与无精子、严重少精相关。AZFc区域缺失,睾丸组织学表现为多样化,
有与“唯支持综合征”相似的表现,也可以有精子发生停滞于不同阶段生精上皮细胞的表现,
出现无精子症和少精子症的不同临床表现。
本例患者染色核型为45,X/46,XY,为嵌合体,虽然性染色体嵌合比例不同,也可能产
生不同数量的精子,但本例患者还有Y染色体AZFb、c区域微缺失,最终导致无精子症,造成
不育。因此,对于男性不育的诊断,除了进行常规的临床检查、实验室检查及细胞遗传学检
查外,还需要进行Y染色体的微缺失检查,以进一步明确诊断。
【参考文献】
1Simoni M,Bakker E,Krausz C.EAA/EMQN best practice guidelines for molecular
diagnosis of Ychromosomal microdeletions.State of the art[J].Int J Androl,2004,27(4):240249.
2Dada R, Gupta NP, Kucheria K. AZF microdelet ions associated with idiopathic
and nonidiopathic cases with cryptorchidism and varicocele. Asian J Androl, 2002,4(4):259263.
3KentFirst M,Muallem A,Schultz J,et al.Defining regions of the Ychromosome
responsible for male infertility and identification of a fourth AZF rejoin(AZFd) by
Ychromosome microdeletion detection[J].Mol Reprod Dev,1999,53:2741.
4Foresta C,Ferlin A,Giaroll A,et al.Hing frequency of welldefined Y
chromosome in idiopathic sertoli cellonly syndrome[J].Hum Reprod,1998,13:302307.
5Krausz C,Quintana Murci L,McElreavey K.Prognostic value of Y deletion analysis:what is the clinical value of Ychromosome microdeletion analysis[J]? Hum Reprod,2000,15(7):1431.