第二信使介导模拟低氧下丘脑CRF分泌

第二信使介导模拟低氧下丘脑CRF分泌 3第二信使介导模拟低氧下丘脑 分泌 CRF 1. 211 吴杜继曾雁邝霞 1 2 ( ) 中国科学院西北高原生物研究所, 西宁 810001; 浙江大学生物科学与技术系, 杭州 310027 (摘要 用模拟高原低氧的方法研究急性低氧条件下促肾上腺皮质激素释放因子 2, co r t ico t rop inre lea sing fac to r ) ( () ) 分泌的变化及第二信使参与 分泌的作用。 低氧 海拔 7 1 后, 正中隆起 ,处 CR F CR F km h m ed ian em inenceM E (() ( ) ) 含量明显下降 < 0. 05, 下丘脑 , 不含含量无明显变化, 而 内 含量 CR F P h ypo th a lam u sH yCR F M E H y cAM P ((()) 明 显增加 < 0. 01。 脑室注射 、后低氧暴露 海拔 5 1 ,含量下降 < 0. 05; < 0.P Fo r sk linT PA km h M E CR F P P ) ()05, 无明显变化。脑室注射 后 含量升高 < 0. 05。脑室注射 和 抑制剂,H y CR F Fo r sk lin H y cAM P P H 7 P KA M E () 升高 < 0. 05; < 0. 01, 和 均无显著变化。 上述结果明急性低氧应激中 分泌显CR F P P H y CR F H y cAM P CR F 著增加, 第二信使通路 P KA 和 P KC 通路均参与 CR F 分泌。 关键词 低氧 第二信使CR F () ()下丘脑2垂体2肾上腺皮质轴 在机体 。 H PA ax isR IA 113 对环境刺激的反应中具有十分重要的作用, 其对外 测定 CR F 1 3 界刺激的应激表现在下丘脑释放 , 进而促进采用本室已建立的 法。CR F R IA 14 1腺垂体 分泌的功能, 最终导致肾上腺皮质功实验试剂A C T H 抗原及抗血清购自 公司; ,能的增强。作为应激反应中主要的下丘脑应激 CR F P en n isu la T PA CR F 激 素 其 合 成 和 分 泌 受 许 多 因 素 的 影 响, 如 低 氧 应 , 及 抑制剂均 购 自 公 司; Fo r sko lin H 7 P KA S igm a 2 125 125 2由北京原子能所生产; 2药盒 激、心理应激等。同时也受神经递质和神经肽的调 IN a I IcAM P R IA 控。 研究表明, 低氧应激不仅改变 的分泌, 对购自上海中医药大学。 CR F 2 115 数据处理的合成也有时相性作用。神经肽和神经递质 CR F ( ) 采用均数差异性检验 2。可直接或间接作用于 胞体膜上受体, 激活第二 tte stCR F 信使通路产生一系列细胞内的变化从而影响 CR F 2 结果(合成和分泌。 常氧条件下第二信使系统 P KA p ro 2 急性低氧下 分泌的变化CR F ) () 和 通路均参211 te in k in a se A P KC p ro te in k in a se C 3, 4 () 模拟 1 急性低氧, 与对照组 海拔 2. 3 相h km 与调节 分泌和 基因表达。本文研究急 CR F CR F 性低氧条件下 的分泌变化及在低氧应激中第 比, 海拔 5 和 7 组 分别 降 低 18. CR F km km M E CR F () 二信使 和 通路参与 分泌的调节。0. 44% 和 44.41% < 05; 无显著变化; P KA P KC CR F P H y CR F ( 分 别 增 加 32. 54% 和 214. 81% < 0. H y cAM P P 1 材料与方法) () 01图 1。 212 111 实验动物 、抑制剂对低氧引起 分泌 For sko l inPKA CRF ( ) 的影响雄 性 大鼠 200 ?30 , 由本所实验动 W ista r g 脑室注射 通路激动剂 和 物室提供, 随机分组用于实验。 P KA Fo r sko lin P KA ( ) 抑 制 剂 后 模 拟 低 氧 海 拔 5 1 。 脑 室 给 112 低氧模拟km h 模拟低氧在人工低 气 压 舱 内 进 行, 以 140 ƒ m ) ( 0. 05 , 后, 下 降 28. 18% < Fo r sko lin M E CR F P 的速度升至预定海拔高度。 动物在舱内自由进 m in 无显著变化。 脑室给 抑制剂后 H y CR F P KA M E( ) 食、饮水。 实验动物在戊巴比妥钠 40 腹腔 ƒm g k g () 升高 132. 68% < 0. 01, 无显著变 CR F P H y CR F 麻醉下进行脑室注射, 注射容量 2 。 对照组 注射 Λl 等容量的生理盐水。 脑室给药后在模拟海拔 5 暴()km 化 图 2。 露 1 , 之后迅速断头取出 和下丘脑。 用 0.h M E 01匀浆, 抽提, 10. 000×?, 离心 20 ,, 4N H C l gm in 取 上 清 液 冷 冻 干 燥 后 用 于 的 放 射 免 疫 测 定()CR F 3 国家自然科学基金项目 . 39170332 N o1997209201 收稿 1998205229 修回 处 末 梢 中 的 未 影 响 到 胞 体 的 水 , CR F CR F CR F 平。急性低氧也未影响到胞体 的生物合成。杜 CR F 2 继曾等研究表明 10%急性低氧 0. 5 和 2 下 O 2 h 丘脑 区 表达无显著变化, 也支持 PV N CR F m RN A 了这一点。因为应激时 区 表达要PV N CR F m RN A 3 到应激 6 后才会出现。等 , 常氧下h W idm a ir 、通路参与 分泌的调节。 本实验表 P KA P KC CR F 明, 、均对低氧引起的 分泌有明 Fo r sk linT PA CR F 显的刺激作用, 而 抑制剂和 则对低氧引起 P KA H 7 的 分泌活动有明显的抑制作用。上述结果说明 CR F () . 1 F igC h ange s o f CR F co n ten t s in h ypo th a lam u s H yand和 通路可能都作为第二信使系统参与了P KA P KC () m ed ian em inence M E and cAM P co n ten t in h ypo th a la2 33 低氧条件下 分泌的调控。CR F () 1 . = + , m u s H ydu r ing h ypo x ia fo r hV a lue sM SD P 3 < 0. 01, < 0. 05P . 3 F igE fffec t s o f T PA and H 7 o n th e CR F co n ten t s o f m e2 () () d ian em inence M E and h ypo th a lam u s H ydu r ing acu te F ig. 2 E ffec t s o f fo r sko lin and P KA inh ib ito r o n th e CR F 3 ()< 0. 05 1 . = + . h ypo x ia fo r hV a lue sM SD P () co n ten t s o f m ed ian em inence M E and h ypo th a lam u s 3 33 (). = + . < 0. 05, < 0. 01.H yV a lue sM SDP P 4 参考文献 1. D u J Z, Yo u Z B. A rad io imm uno a ssay o f co r t ico t rop in 213 、对 分泌的影响 TPAH7 CRF .re lea sing fac to r o f h ypo th a lam u s in O cho to na cu rzo n iae 脑室注射 通路激动剂 和抑制剂 P KA T PA H 7, 1992; 12: 2232229A c ta T h e r iolog ica S in ica ( )后再模拟 1 急性低氧 海拔 5 。 脑室给 h km T PA 2. , , , . D u J ZM a r sh e ll J Coo te J H L igh tm an SH ypo x ia in2 ( ) 后, 明 显 下 降 55. 23% < 0. 05 , M E CR F P H y f luence s CR F and A V P m RN A exp re ssio n in PV N o f ra t s 无显著变化; 脑室给 后,显著升高CR F H 7 M E CR F . h ypo th a lam u sT h e E igh th In te rna t io na l H ypo x ia Sym po 2 (() ) 19. 22% < 0. 05, 无变化 图 3。P H y CR F 213, 1993, , , . . 9siumF ebL ak e L o u iseA lbe r taC anada 3. , , . W idm a ie r E P L im A T V a le W Sec re t io n o f co r t i2 3 讨论2co t rop in re lea sing fac to r f rom cu ltu red ra t h ypo th a lam ic 低氧作为一种特殊的应激原, 激活丘脑- : . , 1989; 124:ce lleffec t s o f ca techo lam ine sE nd oc r inology 垂体 5832590 - 肾上腺皮质轴, 而且作用发生在细胞和分子水平 上。 低氧条件下 的分泌和合成体现了强度2效 4. Em anue l R L , G ira rd D M , T h u ll D L , M a jzo ub J A. CR F 应关系和效应2时程关系。当低氧 1 时明 h M E CR F Seco nd m e ssenge r s invo lved in th e regu la t io n o f co r t i2 显下降而 无显著变化。说明急性低氧条件 H y CR F 2co t rop in re lea sing ho rm o ne m RN A and p ep t ide in cu l2 下 的分泌增加, 当海拔升高时 的分泌量 CR F CR F . tu red ra t fe ta l h ypo th a lam ic p r im a ry cu ltu re sE n2 增加。 这可能是由于急性低氧只释放了储存于M E , 1990; 126: 301623021d oc r inology SECO ND M ESSENGERS M ED IA T CRF REL EA S ING UND ER S IM UL A TED HY PO X IA 1, 2 1 , , D u J izen gW u Y an K u an g X ia 1( , , 810001;N o r thw e st P la teau In st itu te o f B io lo gyC h ine se A cadem y o f Sc ience sX in ing 2), 310027D ep a r tm en t o f B io lo g ica l Sc ience and T ech no lo gy Zh e jiang U n ive r sityH angzho u A BSTRACT . . . U sing th e m e tho d o f sim u la ted h ypo x ia and icvadm in ist ra t io n w e stud ied th e effec t o f seco nd m e ssenge r p a thw ay s o n . 70001 , CR F sec re t io n unde r th e co nd it io n o f h ypo x iaE xpo sing a t m a lt itude fo r ho u rCR F co n ten t in M E sign if ican t ly de2 () ()< 0. 05, , < 0. 01. c rea sed P bu t th a t in h ypo th a lam u s h ad no ch angea t th is t im e cAM P in h ypo th a la lm u s inc rea sed P W h en () . . . 5 000 1 < 0. 05; < 0. 05, icvin jec t io n o f Fo r sk lin o r T PA and expo sing a t m a lt itude fo r ho u r CR F in M E dec lined P P th a t 2in h ypo th a lam u s unch anged, and cAM P in h ypo th a lam u s inc rea sed. W h en i. c. v. in jec t io n o f H 7 o r P KA inh ib ito r and expo () 5 000 1 < 0. 05; < 0. 01, . sing a t m a lt itude fo r ho u r CR F in M E inc rea sed P P and cAM P in h ypo th a lam u s unch angedT h e se , re su lt s sugge st th a t du r ing acu te h ypo x ia CR F sec re t io n f rom h ypo th a lam u s inc rea se sseco nd m e ssenge r sy stem o f P KA and .P KC a re invo lved KEY W O RD S CR F; h ypo x ia; seco nd m e ssenge r 高原与平原训练期间竟走运动员的 值与比赛成绩相关关系的研究 Hb 陈俊民 ( )青海师范大学生物系, 西宁 810008 () 高原训练是提高运动员身体机能和运动能力的有效手段之一, 在评价高原训练的生理效应时, 血红蛋白 值是常用的 H b (() ) 反映运动员身体机能状况的指标。但是, 关于世居高原 海拔 2260 与居平原 海拔 10 竟走运动员高原训练期间 值的 m m H b ( 比较研究, 以及训练后 值与比赛成绩之间相关关系的研究, 至今为止尚未见报道。 本研究对中日竟走运动员在高原 海拔H b () ) 2366 m 和平原 海拔 10 m 训练期间的 H b 值进行了测定和比较。 另外, 对 H b 值与运动成绩的相关关系进行了初步探讨。 1 材料与方法 111 研究对象() 中国和日本竟走运动员共 20 人。 中国为世居高原 西宁, 海拔 2260 的男女队员各 5 人, 男队员平均年龄为 1912?214 m () 岁, 身高 17313?511 , 体重 5813?613 ; 女队员分别为 1714?016 岁, 16717?115 , 5019?215 。日本居平原 海拔 10 男cm k gcm k gm 女队员亦各 5 人。 男队员平均年龄为 2012?212 岁, 身高 17111?614 , 体重 5819?418 ; 女队员分别为 2112?213cm k g 岁, 16116?710 , 47. 0?4. 2 。中方队员中有健将 2 名、一级 5 名、二级 3 名。日方队员中有健将 1 名、一级 7 名、二级 2 名。cm k g 112 研究方法 采用美国产 2型血球计数仪, 受试者清晨起床后, 安静状态下取动脉化耳垂血对 进行测定。 日方队员上 400 C EL L D yn H b (() ) 高原前在东京 海拔 10 测一次作为平原对照值。中方队员中日高原合练前在高原 青海多巴高原训练基地, 海拔 2366测 m m (() ) 一次作为对照值。高原训练期间 93、8、14- 9、8, 每个训练小周期 6, 7 末测一次, 共测 4 次。按上述方法, 中日双方队员下 d() 平原后在青岛 海拔 10和东京又分别进行了 3, 4 次测试。 高原训练期间, 中方男队员的日平均训练量为 1516 ƒ女队 , m km d 员为 1113 ƒ日方男队员的日平均训练量为 1319 ƒ女队员为 912ƒ。 平原训练期间, 中方男队员的日平均训练量 ; , km dkm dkm d 为 1216 ƒ女队员为 918 ƒ。, km dkm d 2 结果 () ( ) 1高原与平原训练期间 值的测定与比较 中日高原合作训练前, 中方队员的 值 1411?116 略高于日方 ƒH b H b gd l ((()) ) 队员的平原值 1319?115 。 高原训练期间, 日方队员的 值 1417?115 高于中方队员 1318?114 亦高于 ƒƒƒ, gd lH b gd lgd l ()其平原值。但中日双方队员之间, 日方队员高原值与平原值之间进行比较, 均无显著性差异 > 0105。下平原后约 3, 4 周时 P () 间内, 日方队员的 值出现先降低, 后有所起伏的变化 平均为 1318?019 但一直低于其高原值, 与上高原前的平原值ƒ, H b gd l ((() ) ) 比较无明显变化。中方队员的平原值 1414?113 gd l与高原值 1318?114 gd l比较略有增加, 但差异亦不显著 P > 0105。ƒƒ ( ) () 2值与比赛成绩的关系 高原训练前后, 中日双方队员的 测试值与比赛成绩 指比赛时间的相关关系为: 男 H b H b () () 子 20 竟走运动员, 其 值与比赛成绩的相关系数 为- 0167 < 0. 05; 女子 10 竟走运动员, 上述二者间的相关系 km H b ΧP km () 下转第 288 页