实验三 蛋白质的沉淀反应

实验三 蛋白质的沉淀反应 一、实验目的:熟悉和掌握蛋白质沉淀的相关原理。 二、实验原理: 多数蛋白质是亲水胶体，当其稳定因素被破坏或与某些试剂结合成不溶解的盐后，即产生沉淀。 蛋白质盐析作用:向蛋白质溶液中加入中性盐至一定浓度，蛋白质即沉淀析出，这种作用称为盐析。 乙醇沉淀蛋白质:乙醇为脱水剂，能破坏蛋白质质点的水化层使其沉淀出来。 重金属盐沉淀蛋白质:蛋白质与重金属离子结合成不溶性盐类而沉淀。 三、实验仪器及用品 实验器材:试管、吸管、吸滤瓶、布式漏斗。 试剂:蛋白质试液、硫酸铵结晶体、饱和硫酸铵溶液、95%乙醇、结晶氯化钠、1%醋酸铅、5%鞣酸溶液、1%硫酸铜溶液、饱和苦味酸溶液、1%醋酸溶液。 四、实验内容及步骤 1(蛋白质盐析作用 (1)取蛋白质溶液5ml，加入等量饱和硫酸铵溶液，微微摇动试管，使溶液混合静置几分钟，球蛋白即析出。 (2)将上述混合液过滤，滤液中加硫酸铵粉末，至不再溶解，析出的即为清蛋白。再加水稀释，观察是否溶解。 2(乙醇沉淀蛋白质 取蛋白质溶液1ml，加晶体NaCl少许，待溶解后再加入95%乙醇2ml混匀。观察有无沉淀析出。 3(重金属盐沉淀蛋白质 取试管2支各加蛋白质2ml，一管内滴加1%醋酸铅溶液，另一管内滴加1%CuSO4溶液，至有沉淀生成。 4(生物碱试剂沉淀蛋白质 取2支试管各加2ml蛋白质溶液及1%醋酸溶液4-5滴，向一管中加5%鞣酸溶液数滴，另一管内加饱和苦味酸溶液数滴，观察结果了。 五、结果及分析 仔细观察实验现象变化，并记录。