HPLC法测定糖并消丸中甘草酸的含量

HPLC法测定糖并消丸中甘草酸的含量 实用药物与临床2008年第11卷第1期 PracticalPharmacyAndClinicalRemedies.2008,Vo1.11,No.1?51? 2005年版二部附录XC第三法【]),以盐酸溶液(取稀盐酸 24mLJE水稀释至1000mL)为溶剂,转速为75dmin,依 法操作,45min时,取溶液滤过,取续滤液作为供试品溶 蔷 莛 t/(min) 图1氢氯噻嗪溶出度曲线 4讨论 液.另精密称取氢氯噻嗪对照品,用乙腈稀释制成每1mL 中含20/zg的溶液作为对照品溶液.照上述色谱条件测 定,按外标法计算每片的溶出量. 导 In ? - ?_, 1.0o 图2 3.005.007.0000 氢氯噻嗪HPLC色谱图图3氢氯噻嗪光谱图 他成份的色谱峰干扰主峰的测定. 检测波长的选择:国家标准…中,含量测定项检测波长 为258nm.经二极管阵列检测器检测,氢氯噻嗪在 225nm,271nm附近有最大吸收,见图2,图3.因为 225nm附近有其他成分色谱峰干扰测定,故选择检测波长 为271nm. 美国药典中收载的氢氯噻嗪片【3】溶出度检测方法,流 动相为磷酸盐缓冲液.乙腈,但经试验,在该色谱条件下其 因本品每片仅含氢氯噻嗪2mg.所以溶出度采用小杯 法,溶剂为100mL,以提高溶液的浓度,满足高效液相测定 的需要. 参考文献: [1]国家药典委员会.国家药品标准:化学药品地方标准上升国 家标准第十国册.172.175. [2]中国药典[S].二部.2005:406—407. [3]美国药典XXIX版.1062. HPLC法测定糖并消丸中甘草酸的含量 全艳晖,冯川 [摘要】目的建立糖并消丸的含量测定方法.方法采用HPLC法对处方中甘草主要成分甘草酸的含 量进行测定以十八烷基硅烷键合相硅胶为填充剂,以甲醇一0.2mol/L醋酸铵溶液一冰醋酸(68:32:1)为流动相,检 测波长为252nm[2一,理论塔板数按甘草酸峰计算应不低于2000.结果甘草酸的平均回收率为99.2%,RSD 为1.4O%.结论本方法简便易行.适用于糖并消丸中甘草酸的含量测定. [关键词】糖并消丸;甘草酸;含量测定 DeterminationofacidoflicoricerootofTangbingxiaowalIQUANYan-hui.FENGChuan(1.Shenyang Children WelfareInstitute,Shenyang110048.China;2.HigherTechnical&VocationalEducationCo?egeofShenyangPharma- ceuticalUniversity,Shenyang110026,China) LAbstract]ObjectiveTodeterminetheacidoflicoricerootofTangbingxiaowan.MethodsThecontentof acidoflicoricerootwaSdeterminedbyHPLC.ResultsTheaveragerecoveryofacidoflicoricerootwas99 .2%,RSD WEtS1.4O%.ConclusionThemethodissimple,sensitive,accurateandwithagoodreproducibility.Itca nbeusedaSa qualitycontrolstandardforthedrug. Keywords:TangbingxiaoWan;Acidof1icoriceroot;Determination 糖并消丸由罂粟壳,乳香,没药,西红花,穿山甲等中药 组成,用于血瘀气滞,脉络瘀阻所致糖尿病及其并发症.笔 者建立糖并消丸的含量测定方法,参照文献方法l】],采用 HPLC法对处方中甘草主要成分甘草酸的含量进行测定. 1仪器与试药 Agilent1100Series高效液相色谱仪,AgilentG1310 VWD检测器,Agilent色谱工作站.糖并消丸(本院自制, 批号:20060326,20060327,20060328),甘草酸单铵盐(中国 药品生物制品检定所,供含量测定用,批号:731—9203),甲 收稿日期:2007—05—20 作者单位:1.沈阳市儿童福利院,沈阳110048;2.沈阳药科 大学高等职业技术学院,沈阳110026. 醇为色谱纯(中国医学科学院天津协和科技公司),醋酸铵, 甲醇,冰醋酸等试剂均为纯. 2方法与结果 2.1溶液配制 2.1.1对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约 10mg,精密称定,置100mL量瓶中,用流动相溶解并稀释 至刻度,即得(每1mL含甘草酸单铵盐对照品0.1mg,相 当于每1mL含甘草酸0.0980mg). 2.1.2供试品溶液的制备取本品2.5g,精密称定,置 50mL量瓶中加流动相约45mL,密塞,超声30min,放冷, 摇匀,滤过,取续滤液,经45m的微孔滤膜滤过,即得. 2.1.3阴性溶液的制备取缺甘草处方,按工艺制备缺甘 草的糖并消丸,并按”2.1.2”项下制备,即得. 舶舯m 《 加博H鸺,}? OOOOOOOOOOOOOOO ? 52?实用药物与临床2008第11卷第1期 Practic~PharmacyAndClinicalRemedies,2008,Vo1.1l’No.1 2.2色谱条件与系统适用性实验以十八烷基硅烷键合 相硅胶为填充剂.以甲醇.0.2mol/L醋酸铵溶液.冰醋酸 (68:32:1)为流动相,检测波长为252nm[2-3】,理论塔板数 按甘草酸峰计算应不低于2000. 2.3测定方法分别精密吸取对照品,供试品与阴性溶液 各10止,注入液相色谱仪中,测定,即得. 对照品,供试品及阴性溶液在此色谱条件下色谱图见 图1,图2,图3. 图1对照品溶液的高效液相色谱图 . J _ _ : ? - 一? L….图3阴性溶液的高效液相色谱图 2.4标准曲线制备精密称取甘草酸对照品5.0mg,置 于50mL容量瓶中,加入50%甲醇溶解并定容至刻度,摇 匀.分别精密吸取1.0,3.0,5.0,7.0,9.0mL溶液于 10mL容量瓶中,加入50%甲醇定容至刻度,按上述色谱条 件进样并进行测定.记录峰面积,对样品浓度作图,得直线 回归方程Y=5550.98X+17.69,r=0.9999.甘草酸在 0.01--0.09mg范围内呈良好的线性关系. 2.5稳定性试验取本品2.5g,精密称定,按”2.1.1”项 下制备供试品溶液,精密取同一供试品溶液,按0,2…46 8h时间间隔,分别进样分析,测定色谱峰面积.RSD为 1.90%.试验结果提示,供试品溶液制备8h内测定,色谱 峰面积无明显变化,在此时间内,待测组分化学性质稳定. 2.6精密度试验取本品2.5g,精密称定,按”2.1.2”项 下方法制备供试品溶液.分别精密吸取10止,连续进样5 次,按前述色谱条件进样分析,测定色谱峰面积,结果色谱 峰面积平均为678.0,RSD为1.23%.测定结果明,本 试验精密度良好. 2.7重复性试验取5份样品,各2.5g.精密称定,分别 按”2.1.2”项下方法操作,测定结果平均1.059mg/g,RSD 为1.48%., 2.8回收率试验取本品2.5g(含量1.059mg/g),精密 称定,精密加入甘草酸单铵盐对照品(2.681mg/mL,折合 甘草酸为2.626mg/mL)1.0mL,按上述方法操作,测定结 果见表1.由表1可见.本法对于本品的回收率为97.6%, 101.5%.RSD为1.40%.符合有关规定. 2.9样品含量测定和结果根据上述方法测定3批样品 中甘草酸的含量,结果见表2. 3结论 现代药理研究证实,乳香,没药,西红花,穿山甲等可改 善微循环,降低血小板的聚集性,增加局部组织的供血,供 氧,有的还具有直接降低血糖的作用.乳香,没药均含有树 脂和芳香的乳香酸,没药酸等挥发油,为散血止痛要药.米 表1回收率试验测定结果 表2含量结果测定结果Cmg/g) 壳具有良好的止痛作用. 本方君以罂粟壳止痛,臣以穿山甲辛散走窜,破瘀通络 散结,乳香,没药活血行气止痛,佐以西红花活血止痛.诸 药合用,重在攻瘀止痛,使瘀去而痛减,共奏化瘀通络,散结 止痛之功.总观全方具有血活气行,脉络通畅作用,用于血 瘀气滞,脉络瘀阻所致糖尿病及其并发症.因此,针对糖尿 病及其并发症的基本病因病机——瘀血,活血类药物能收 到较为理想的治疗效果【1】. 笔者采用HPLC法对处方中甘草主要成分甘草酸的含量 进行测定,甘草酸的平均回收率99.2%,RSD为1.40%,说明 本方法简便易行,适用于糖并消丸中甘草酸的含量测定. 参考文献: [1]中国药典[S].一部.2005:65. [2]陈发奎.常用中草药有效成分含量测定[M].北京:人民卫生 出版社,1997:620.621. [3]胡昌江,李烨,杨婷.等.高效液相色谱法测定理中汤配方颗 粒中甘草酸含量[J].中国药业.2006,4(6):1006.4931. [4]叶镇鹏,吴晓升.综合疗法治疗糖尿病足溃疡41例疗效观察 [J].北京中医药大学学报,2005,12(4):22. [5]贺艳锋,牛建生.糖尿病足及其防治[J].实用医技杂志,2006, 16:23. 【6]米热阿布都拉?买买提,艾则孜?阿布力米提.糖尿病并发糖 尿病足治验1例[J].中国民族医药杂志,2006,4(1):37. [7]谢桂权,王倩,冯天保,等.益气养阴,祛瘀生新疗法治疗临床 期糖尿病肾病的疗效观察及机理探讨[J].广州中医药大学学 报,2006,4(1):29.