[doc] 从沙蝇唾液中提取的DNA疫苗可保护鼠免得利什曼病

[doc] 从沙蝇唾液中提取的DNA疫苗可保护鼠免得利什曼病 从沙蝇唾液中提取的DNA疫苗可保护鼠免 得利什曼病 2002年2月第29卷第l 各州流行.而近年,即1997.1999年田纳西州和北卡 罗来纳州病例不断上升,东南部新流行区扩大;西弗 吉尼亚州病例数也明显增加.因而LAC脑炎已成 为田纳西州,西弗吉尼亚州和北卡罗来纳州的一种 新发传染病(EnHgi玎gDiBeaBe).本文报道1997, 1999年期间田纳西州和北卡罗来纳州LAC脑炎患 者住宅附近蚊媒监渊结果. 白纹伊蚊在美国为外来蚊种,1985年在德克萨 斯州休斯顿被发现,此后其分布范围不断扩大,遍及 美国太部分地区,包括田纳西州和北卡罗来纳州各 县.该蚊能传播登革热,黄热病和多种虫媒病毒. 白纹伊蚊是实验室LAC的理想传播媒介,并能垂直 传播. 研究中分别以田纳西州的6例LAC脑炎患者住 宅为蚊媒采样点;在北卡罗来纳州选择19个采样 点.每一采样点放置10—3O个标准产卵诱阱,每周 观察住宅周围人工容器内蚊子的孳生情况.将产卵 条置2LI-hO中,加2.5g肝粉或肝粉+酵母粉(1:2), 孵育艚小时,幼虫在28?2?连续光照条件下饲 养,成虫羽化后按蚊种,性别分置,每群蚊数不超过 50只,7O?保存备用. 每群蚊子置5mLFahxm管中,加2mLBA-1稀释 液和4颗4.5nun钢珠,研磨2o一30秒钟制成匀浆, 离心沉淀.上清液用Veto细胞培养空斑形成试验 检测活病毒,用RT-PCR和基因组测序鉴定病毒. 从分离到病毒的蚊群匀浆中提取蚊子基因组DNA, 设计合成蚊种特异引物,扩增白纹伊蚊和 Oe.strisefiatus核糖体大亚基DNA序列,PCR产物用 2%琼脂糖凝胶电泳分析鉴定. 结果,田纳西州于1999年8月16日在Anderson 县Clinton采样点采集的14只雌性白纹伊蚊中分离 到LAC.病毒的120bpL-片段,775bpM.片段和 251bpS-片段碱基序列与已知的LAC基因组比较,同 源性分别为98%,95%和100%,可以确定为LAC. PCR鉴定蚊种结果证明,14只雌蚊均是白纹伊蚊. 北卡罗来纳州于1999年9月6日采集的44只雌性 白纹伊蚊和50只雄性Oe.striscriatus中分离到病毒, 其L广片段,M.片段和s_片段的碱基序列与已知LAC 基因组的同源性分别为96%,95%和100%,可以确 定分离的病毒为LAC.PCR蚊种鉴定和扩增子序列 分析结果证明,44只白纹伊蚊中污染了Oe.8tl’i$e. flatus组织,但量很少,还不到一只蚊子,可以认为 LAC来自白纹伊蚊. 本文报道了在野外自然感染的白纹伊蚊中首次 分离到LAc,从其可垂直传播及近年来该伊蚊遍布 田纳西州东部和北卡罗来纳州西部提示,白纹伊蚊 可能是LAC脑炎的一种重要中间传播媒介.本文 认为,随着白纹伊蚊分布范围的不断扩大,田纳西州 和北卡罗来纳州以及整个美国东南部的LAC感染 将会继续上升. (干小仙摘闻怡校) 004从沙蝇唾液中提取的D卜lA疫苗可保护鼠免得 利什曼病[英]/ChandeM//..2001.358 (9280).477 据美国研究明,一种含沙蝇唾液蛋白的DNA 疫苗可以使鼠类免得利什曼病.他们发现,如果先 用沙蝇唾液给鼠免疫,则一旦遭到携带利什曼原虫 的寄生虫袭击,鼠也不会被感染.研究人员应用这 一 理论,开发了一种能对抗利什曼病的疫苗.他们 首先检查了携带利什曼病原虫的沙蝇中的唾液,确 定了主要唾液腺蛋白之后,提取该蛋白并命名为 SP15.这种蛋白被认为是鼠自然免疫的靶体.尽管 已知对沙蝇唾液的免疫反应可阻止疾病的发生,但 对其免疫基因的确定还是首次.虽然每个唾液腺仅 含有1/zg的蛋白,但应用重组技术还是可以对其进 行分析.研究人员从蛋白中分离纯化了SP15基因, 井用它构造了DNA疫苗.鼠一旦应用这种疫苗后, 即使遭到寄生虫的攻击,也不会发病.SP15被认为 是一种有效的免疫基因,因为被免疫的鼠感染后只 有很小面积的皮肤损伤,且6个月内症状会消失;而 未免疫的鼠,则有很大的皮肤溃疡发生.研究人员 给经处理后不能产生抗体的鼠注射该疫苗后,发现 该鼠仍能得到保护,这足以说明该疫苗能引发免疫 反应.利什曼病流行于热带,亚热带与南欧,据 WHO估计,全球有120O万人受到该病的困扰.因 此,寻找安全,有效,经济的疫苗,对于预防该病就更 显得重要.这项研究的意义在于.使人们对研发利 什曼病疫苗有了全新的认识:郾应开发抗沙蝇唾液 疫苗,而不是寻找抗利什曼原虫疫苗.研究人员目 前正打算研制一种能免疫狗的疫苗,因为狗是利什 曼病原虫的储存宿主,它们可以把疾病传给蝇类,而 后者能传染人类. (狄柯坪摘杜军英校) 005SEN病毒感染与输血相关性肝炎[英]/ ? 57?