【doc】EB病毒感染与涎腺良性淋巴上皮病损恶变的关系

【doc】EB病毒感染与涎腺良性淋巴上皮病损恶变的关系 EB病毒感染与涎腺良性淋巴上皮病损恶变 的关系 中华口腔医学杂志2004年7月第39卷第4期ChinJStomatol,July2004…Vol39No.4?29l? ? 口腔组织病理学研究? EB病毒感染与涎腺良性淋巴上皮病损 恶变的关系 吴兰雁程琚卢勇周志瑜朔敬 【摘要】目的了解Epstein—Barr病毒(EBV)感染与涎腺良性淋巴上皮病损恶变的关系.方法 采用针对EB病毒编码的小分子RNA(EBER-1)的寡核苷酸探针对2例涎腺良性淋巴上皮病损灶性 恶变,14例恶性淋巴上皮病损(MLEL),4例良性淋巴上皮病损(BLEL),4例非特异性慢性涎腺炎石 蜡包埋组织进行原位杂交;采用聚合酶链反应(PCR)进行EBVBamHI—W片段检测.结果2 例良性淋巴上皮病损灶性恶变形态学上良性区域或恶性区域,EBER-1及EBVBamHI.W片段均为阳 性,14例MLEL的癌细胞核均可见EBER一1强阳性信号,其中12例EBVBamHI—W片段阳性,4例 BLEL及4例非特异性慢性涎腺炎均为阴性.结论少数恶性淋巴上皮病损可能在BLEL基础上发 生,EB病毒感染与涎腺良性淋巴上皮病损癌变发生可能有密切关系,EBV感染可发生在BLEL癌变 形态学改变之前. 【关键词】疱疹病毒4型,人;涎腺肿瘤;原位杂交;聚合酶链反应 Epstein-Barrvirusinfectioninbenignlyraphoepitheliullesionswithmalignanttransformationof salivaryglandsWULan-yan',CHENGJun,Ly0,lg,Z册UZhi-yu,7=SaktaDepartmentof Pathology,tChinaSchoolofStomatology,SichuanUnwers,Chengdu610041,China Correspondingant~r:WULan-yan,Email:lanyanw@yahoacorrL~rg 【Abstract】ObjectiveToexaminetheroleofEpstein—Barrvirus(EBV)infectioninbenign lymphoepitheliallesionswithmalignanttransformationofsalivaryglands.Methods2casesbenign lymphoepitheliallesionswithfocalmalignanttransformation(BLEL.FMT),14casesofmalignant lymphoepitheliallesion(MLEL)and4casesofbenignlymphoepitheliallesion(BLEL)ofsalivaryglands,4 casesofnonspecificchronicsialadenitiswereexamined.Sectionswerecutfromtheparaffinblocksand performedinsituhybridization(ISH)forEBVencodedsmallRNA一1(EBER一 1)using30.basesyntllesized oligonucleotideprobeandpolymerasechainreaction(PCR)forBamHI— WregeinofEBVDNA(123bp). ResultsInISH.strongsignalsforEBER一 1wereobtainedinmostofepithelialcellnucleiinexamined specimensofBLEL— FMT,nomatterinbenignormalignantareasandinallspecimensofMLEL(14/14), PCRdemonstratedaDNAfragmentof123kbpin2casesofBLEL.FMTand12casesofMLEL(12/14).In contrast,therewerenosignificantIS}L/PCRsignalsinexaminedBLELandnonspecificchronicsialadenitis. CondnsionsAfewcasesofMLELmayarisefromBLELandEBVmayplaysanimportantroleinthe pathogenesisofBLEL—FMTofsalivaryglands. 【Keywords】Herpesvirus4,human;Salivaryglandneoplasms;Insituhybridization; Polymerasechainreaction 涎腺恶性淋巴上皮病损(malignantlymphoepi— theliallesions,MLEL)又称为未分化癌伴淋巴样间 质,是一种罕见的涎腺恶性肿瘤,好发于北美的爱斯 基摩人,格陵兰人及南部中国人.MLEL与Epstein— Barr病毒(EBV)感染关系密切,它是否由良性淋巴 上皮病损(benignlymphoepitheliallesions,BLEL)恶 基金项目:中日合作科研基金资助项目 作者单位:610041成都,四川大学华西口腔医学院病理科 (吴兰雁,卢勇,周志瑜);日本新漏大翠齿翠部病理室(程瑁,朔敬) 通讯作者:吴兰雁.Email:lanyanw@yahoo.corn.cn 变而来是有争议的.我们报道2例良性淋巴上皮病 损灶性恶变(benignlymphoepitheliallesionswith focalmalignanttransformation,BLEL—FMT)病例,并 采用原位杂交,PCR方法对其良,恶性组织进行 EBV编码的小分子RNA一1(EBER一1)及EBV BamHI—W片断检测,探讨EBV感染在良性淋巴上 皮病损癌变发生中的作用. 资料和方法 1.研究对象:2例BLEL—FMT,14例MLEL,4例 坚杂志2?土?盐塑益韭期I:1…c川L! 目l性J&性之良域.IJL止I岛cflie×103)目2僻J损"性腮?之" 1FIE×lfx),3n琳I搬灶性I鹰岛内?棒EBEItIm件(f.ISHxIJ BLEI,4例非特异性慢性诞嚓楚2例涎腺低分化腺 癌均来1'4川大学华西12腔医学院】98】,1995F 集资料.经重新复查切片(3名资深几腔病理医师 完成),病变符合WFIO有关涎腺疾病的诊晰标 准… 2h法: (1)原倚杂炎榆测(EHER1):探制:地岛辛 怀记的EBEI{?I寡苷暧探钊;主要步骓:切片 4…厚,蛋fl酶E化(37:.10rnin);加入杂交淮 4t)杂盘I5h;对照:已知蛐V性的ML.已 知EBV阿]的BLEll技来加搛引的为空白对照 (2)PCR扩增榆测刚,VBamlIIW片断:按宴骑 审常规步骤进行奉实验所用仪器试剂均El 本新溺大学指毕部病理窒提供. 结果 一 , 病例 l病例I:患肯奠.42岁,白腮腺肿块6叶,月,约 23iii走小,无口F恨干史.行部分腮腺切除 术光镜下.腺泡破坏消失被量增生的淋巴组织 替代,.1r细胞分化良好的上皮肌上皮岛.呈典型的 良性淋巴上皮病损政变(圈I),,j一区域见上皮肌 应岛度增生.不舰则,细胞体积大,核呈空泡 状.细胞M界限不清.低分化癌改娈,周围有密集 的淋巴"组织,BLEI与骶分化癌之川未她移什过 渡形态(图2),病理硷断为良性淋巴I皮病损性 恶变术后随游61个月,无复发,患卉健在 2病例2:患者男,45岁,tl颊部包土妊2个月I]己 口f,卜症状.包块约I(,illxI…×I(mk小.行 包址哪除术低俯镜下.组织学形态似良性淋巴1. 虚病扣,腺泡破叫,消失.上皮肌l皮岛体积大呈 孤立的舶状]增生的淋巴组织i高倍镜F.灶性区 域f.应岛中的细胞核人.1泡状,核仁叫显.柯的 为不规则深染的细胞棱.每岛倩MF可见I,2十核 舟裂象,病理诊断为良淋巴L皮病损灶性恶变 二EBER一1原位杂交 2洲BLFMT组织无沧形态学上良性或恶 区域均可见EBER1强阳佶f圈3).14剜 MLEl均呈EBER1刚忡眨麻.EBER一】定位于大多 数癌细胞桩内.痈巢周淋巴细胞技培旁正常涎腺 上皮为阴性4例BllEI,4例慢性缝炎的涎腺组织来 见性竹号均为羽PI-反应阳性x,ij!{{旱IIF]性阴 对照及空II刈照为阴性 一PER扩增检测EBVBam…WH断 2例l{llEL一MT及I4唰MI阱巾的12例在 J23hp址出现单一条带.4例BI.EI,4例非特异怍怛 性涎隙炎均来扩增景带.I辋性刘照为嗣陛,lr月忡对 照阴性(4) Mr"fm杯:I性对.2I:I, 3BLEI45:?I.?FMT6:. 7,9MI? 围4b.vIImnHl~W断J物 讨论 MLEI一始就是恶性,还是来自以前已经存 在的BlL足有争议的.至今.BLEL与M1E1的关 茉尚不清楚汁多学音认却BLEI.Lf】的上膻成 舒川以恶为痫.彤戚恶性淋巴上皮疴损.淋巴组织 中华口腔医学杂志2004年7月第39卷第4Chin』!o?巡ol,』Q,: 可恶变为恶性淋巴瘤.Kott等认为诊断MLEL重 要的是癌巢与BLEL同时存在,Krishnamurthy等 总结了14例MLEL,其中有6例可见BLEL与癌共 存,且预后较好,称之为低度恶性淋巴上皮病损,提 出良,恶性淋巴上皮病损可能代同一谱系的两极, 处于同一疾病过程的不同阶段,低度恶性淋巴上皮 病损介于BLEL与高度恶性淋巴上皮病损之间.另 外,的确有部分病例第1次手术后病理诊断为 BLEL,术后复发后再次手术,病理诊断为MLEL?. Kitazawa等还报道了1例腮腺BLEL恶变病例,光 镜下观察到上皮增生,异常增生和未分化癌之间的 组织学移行改变,这些学者提出MLEL与BLEL关 系密切,MLEL是在BLEL基础上恶变而来.反之, 有学者认为多数MLEL并不伴BLEL,即使少数病例 MLEL与BLEL并存,也未见二者间移行改变,不能 证明MLEL来自BLEL,BLEL样病变可能代表低度 恶性的MLEL中的癌灶,或对癌的一种反应性变化, BLEL样改变并不是MLEL中的必要成分.Sheen 等报道的l2例MLEL中,既无BLEL或舍格伦综 合征病史,镜下也未发现BLEL或上皮肌上皮岛与 MLEL共存,Nagao等报道的5例MLEL也未见 上皮肌上皮岛,基于EBERs,p53,Ki67在BLEL及 MLEL两组间表达存在明显差异,认为良,恶性淋巴 上皮病损有着不同的发病途径.吴兰雁等?报道 的27例MLEL中仅有2例可见良性上皮肌上皮岛, BLEL与MLEL共存,但二者间未见组织学移行表 现,我们认为少数MLEL可能在BLEL基础上发生, 大多数情况下,MLEL一开始就表现为恶性. 本组资料14例MLEL组织均可见EBER一1阳 性信号,EBVBamHI—W片断检测,14例MLEL中有 12例阳性,这与大多数文献报道相符.但BLEL 是否存在EBV感染尚有争议.有报道BLEL组织 中可检测到EB病毒抗原和EBV—DNA的存在?. 本研究BLEL组织中均未见EBER一1阳性信号,PCR 检测EBVBamHI—W片断也未见扩增带,与朔敬 报道结果一致,提示EBV感染与BLEL病因学上无 明显关系,BLEL与MLEL发病过程不同.本组资料 中2例BLEL—FMT组织无论其良性或恶性区域, EBER一1,EBVBamHI—W片断检测均为阳性.提示 EBV感染与BLEL中局灶性上皮成分的恶性转化有 关,而且病毒感染可能发生在MLEL发病的极早期, 即先于恶性肿瘤细胞的克隆性增生,发生在BLEL 形态学发生癌变之前,即使在BLEL—FMT组织中的 良性区域,EBV—DNA及其产物也能检出,这一结果 尚未见文献报道.同时也支持了Raab—Traub等? 的理论,Raab—Traub等采用EBV末端重复区探针对 2例美国爱斯基摩人的MLEL组织进行Southern印 迹杂交研究,2例均检测出1个单克隆游离基因带, 这一特殊杂交带的出现与病毒致病机制关系甚为密 切,提示肿瘤是单一EBV感染细胞的克隆增殖,而 不是在肿瘤形成后发生的继发感染. 综上所述,我们认为当BLEL存在EBV感染 时,MLEL可以在BLEL基础上发生,但大多数情况 下,MLEL一开始就表现为恶性.MLEL与BLEL有 不同的致病因素及发病过程,EBV感染与MLEL发 生有直接关系.EBV—DNA及EBER一1的检测有助 于鉴别良,恶性淋巴上皮病损,尤其是BLEL伴小灶 性恶变者.由于EBV感染可以出现在BLEL—FMT 组织中的良性区域,提示BLEL伴EBV感染时应多 处取材,并加强随访,密切观察,警惕BLEL发生恶 变. 参考文献 1SelferrG.WHOhistologicaltypingofsalivaryglandtumours.2nd ed.Springer—Verlag:L.H.Sobin,1991.30—31. 2朔敬.唾液腺癌EBV.最新医学,1994,49:73-80. 3ClearyKR,BatsakisJG.Undifferentiatedcarcinomawithlymphoid stromaofthemajorsalivaryglands.AnnOtolRhinolLaryngol, 1990,99(3pt1):236-238. 4NagaoT,IshidaY,SuganoI,eta1.Epstein—Barrvirus—associated undifferentiatedcarcinomawithlymphoidstromaofthesalivarydand inJapanesepatients.Comparisonwithbenignlymphoepithelial lesion.Cancer.1996.78:695-703. 5KottET,GoepfertH,AyalaAG,eta1.Lrmphoepithelialcarcinoma (malignantlymphoepitheliallesion)ofthesalivarygland.Arch Otolaryngol,1984,110:50-53. 6KrishnamurthyS,LanierAP,DohanP,eta1.Salivaryglandcancer inAlaskannatives.1966—1980.HamPathol,1987,18:986-996. 7GalloO,SantueciM,CMzolariA,eta1.Epstein—Barrvirus(EBV) infectionandundifferentiatedcarcinomaoftheparotidglandin Caucasianpatients.ActaOtolat3~go1.1994.114:572-575. 8KitaT.~waM.OhnishiY.NonomuraN.eta1.Malignant lymphoepitheliallesion.ActaPatholJpn,1987,37:515-526. 9Sheen"IS,TsaiCC,KoJY.eta1.Undifferentiatedcarcinomaofthe majorsalivaryglands.Cancer,1997,80:357-363. 10吴兰雁,周志瑜,卢勇.涎腺恶性淋巴上皮病损的临床病理研 究.华西口腔医学杂志,1996,14:13—15. 11KimKI,KimYS,KimHK.eta1.ThedetectionofEpstein—Barr virusinthelesionsofsalivaryglands.PatholResPraet,1999,195: 407-412. 12Raab—TmubN,RajaduraiP,FlynnK.eta1.Epstein.Barrvirus infectionincarcinomaofthesalivaryshnd.JVirol,1991,65:7032— 7036. (收稿日期:2003—11-27) (本文编辑:孔繁军)