茶树菇、红菇两种真菌多糖

茶树菇、红菇两种真菌多糖 抑制肿瘤活性的研究 福州四中 施含 柯衍 指导老师 杨 帆 【摘要】本文旨在寻找自然界中安全有效的抗癌食物～以辅助癌症患者进行更有效的治疗～为此进行了初步地尝试。由于多数化学药物在抑制肿瘤生长的同时～也对机体产生免疫抑制作用～其副作用是显而易见的。本文通过茶树菇和红菇两种真菌多糖抗肿瘤活性的研究～力求寻找一种既能恢复和提高机体免疫能力～又具有抗肿瘤活性的免疫药物～因此～该研究具有重要的价值。 研究思路是:初步选择了两种少有人研究的食用菌类～提取出有效的抗癌成分多糖～将多糖经腹腔注射给药～测定实验样本小鼠的胸腺指数、脾指数、巨噬细胞吞噬功能及抗癌效应。试验结果红菇多糖和茶树菇多糖均可明显增加小鼠脾指数,P,0.01,～但对小鼠的胸腺指数却没有增加作用,与对照组相比其吞噬百分率、吞噬指数均有明显提高～差异显著,P,0.01,,对荷瘤小鼠的S实体瘤的180生长有一定的抑制作用～说明红菇多糖、茶树菇多糖能提高免疫功能并具有一定的抗肿瘤活性。研究还发现～茶树菇多糖在75mg/kg剂量下抑瘤效果高于环磷酰胺～并且对小鼠的免疫器官脾脏有增重作用。本试验可以为真菌多糖的开发利用提供了新的材料和数据,为临床治疗肿瘤方面提供一些科学依据。通过这次的锻炼～我们学到了不少生物科学实验的方法和技能～为继续寻找更合适的生物抗癌物质打下基础～培养了必备的科研素质。 【关键词】 多糖;红菇;茶树菇;免疫;抗肿瘤 1背景和研究意义 [9]1(1 癌医学现状和目前癌症治疗的局限性 传统的手术，放射疗法和化学细胞毒疗法仍是当今世界治疗癌症的三大支柱，目前的治愈率(指手术后五年内不复发)已达到50%。但它们都是以杀伤癌细胞为理论基础，这些疗法既费钱、又给病人带来极大的痛苦;化疗和放射疗法的限制是不能对机体癌靶细胞作出选择识别，对癌细胞杀伤的同时对人体正常细胞与脏器也造成损害。至于手术，只能对肉眼可见的实体肿瘤给以切除，减少肿瘤负荷，而对“癌巢”是不起作用的，其后果还有促进癌的转移和扩散，对所剩瘤块有促生长的副作用。另外，对于全身性疾患的癌症患者、晚期癌症患者、年龄较大的癌症患者来说，是无法使用手术疗法进行治疗。显而易见，这三种治疗都带有局限性。 近代科学家们终于发现癌症的一百多种表现形式都有一个共同的线索——癌基因和抑癌基因。迄今已在所有动物的遗传物质中，发现了癌基因和抑癌基因在癌症的发生过程中起到至关重要的作用。生物体自身免疫力的提高，在一定范围内有助于预防癌症的发生，甚至在一定程度上可以逆转癌变。在体内发生癌时，首先跑出来攻击的是白血球中的免疫细胞，NK细胞、巨噬细胞、中性白细胞。它们未能杀死的，剩下的癌细胞，由T细胞和B细胞连合起来杀死。那些易患癌症的人群，是因为机体免疫功能明 1 显降低或丧失，使癌症乘虚而入的;而且患者的免疫功能的强弱直接决定了患者的康复程度。 1(2 研究目标和选择本课题的意义 目前，绝大多数癌症，大量的钱花在诊断和治疗上，实际上，如果从第一个癌细胞发生时就开始预防癌症，利用人本身的免疫力，是不是可以达到完全治愈癌症，战胜癌症的目的呢,基于这样的思考， 我们致力于寻找一种新的途径，在日常的饮食中，通过增强机体自身的免疫功能，很好地进行癌症预防;在临床的治疗中，不采取化疗等干扰和紊乱机体功能的办法，通过调动体内免疫系统功能，来达到抑癌效果。这次的实践活动仅仅是迈出了第一步。 1(3 研究前景调查 ?我省有丰富的食用菌资源:我省近年来年生产食用菌约150多万吨，占世界食用菌总产量的1/6，占全国食用菌产量的1/5，出口量占全球食用菌交易量的40,，占全国出口量的1/2。如此丰富的食用菌资源，为研究工作和日后的产业化奠定了丰富的资源基础;同时，发展食用菌生产也是脱贫致富的重要途径，解决食用菌的深加工，提升食用菌的附加值，可以为解决“三农”问题尽一份力。 ?红菇和茶树菇抗癌研究近况:真菌多糖抗癌研究有悠久历史和诸多可借鉴的经验，而同属真菌的红菇和茶树菇多糖是否具有抗肿瘤活性，至今尚少报道。红菇、茶树菇分属真菌的粪草生和木生两类。红菇属伞菌目红菇科，为菌根菌，生长于原始天然林中，同壳斗科木本植物的根系共生，目前较难进行人工栽培。茶树菇属伞菌目粪伞科，田蘑属，又名茶菇、油茶菇、神菇。长在茶科或其他杂木的朽木树干上。两者均有很高的营养价值及药用价值。 我们初步选择红菇和茶树菇两种材料进行抑癌性研究，一方面，通过实践，探求能找到这两种菇类与其它真菌抗癌功能的异同点，为真菌多糖的开发利用提供新的材料和数据，另一方面，希望能从该课题的研究中发现这两种生物材料的独特性和优越性。 1(4 研究内容 本试验研究探讨茶树菇多糖、红菇多糖的提取分离，经腹腔注射后对小鼠免疫器官的作用表现，对小鼠肿瘤生长的抑制作用及其对巨噬细胞吞噬机能活性的影响。试验还选择了环磷酰胺作为阳性对照组，环磷酰胺是一种临床抗癌药物。但在浓度过高或剂量过大的情况下会降低免疫功能，如本次试验中利用环磷酰胺使小鼠免疫功能低下。试验研究两种真菌多糖对小鼠的有效作用和安全性是否比环磷酰胺好。 2材料与方法 2(1试验材料 真菌:正红菇(Russula vinosa lindbl)、茶树菇(Agrocybe cylindracea(DC. Fr.)R. Maire)，购自福建三明市， 自制红菇多糖、茶树菇多糖。 动物:昆明种小鼠，体重20?2g,由福建医科大学动物中心提供。S腹水瘤种鼠由福建医科大学药理180 研究所提供。 试剂:环磷酰胺(C)为上海华联制药有限公司产品(批号:040803)，其他试剂均为国产生化试剂或 分析纯试剂。鸡红细胞采自健康成年公鸡。 仪器:岛津LC,6A高效液相色谱仪，HANG,PING FA1104电子天平，XSP,188光学显微镜。 2(2试验方法 [11-12]2.2.1 红菇多糖～茶树菇多糖的提取、分离、纯度测定及分子量测定 红菇多糖，茶树菇多糖的提取过程:分别称取新鲜干品红菇、茶树菇子实体各100g、各加水0.5L、水浴加热浸提2.5h，重复浸提2次,冷却后用布氏漏斗过滤，弃去滤渣，合并提取液，用Sevage法(氯仿:正丁醇,4:1)脱蛋白6次，得到的多糖水溶液加3倍体积的95,乙醇(AR级)进行沉淀，得到乙 2 醇沉淀物。收集沉淀物，用无水乙醇洗入G-5号玻璃芯漏斗中，依次用无水乙醇、丙酮、乙醚浸洗片刻后抽干，在45?干燥后得红菇多糖与茶树菇多糖半纯品，得率分别为3.45,和3.25, 红菇多糖，茶树菇多糖的分离过程:准确称取红菇多糖0.1082g,加蒸馏水10ml溶解，离心后上DEAE—SephadexA,25层析柱(直径1.6cm×长30cm)，以0.1-1.0molNaCl洗脱液进行柱层析纯化，苯酚,硫酸法检测多糖的含糖部分，收集含糖部分，装入透析袋中，在盛有蒸馏水的烧杯中进行透析，将透析后的多糖水溶液进行冷冻干燥，得到纯红菇多糖0.0792g。另准确称取茶树菇多糖0.1072g，加蒸馏水10ml溶解，离心后上柱，其余分离方法同红菇多糖，得到纯茶树菇多糖0.0835g。经高效液相色谱分析得单一峰，说明该多糖具有相当纯度。 分子量测定及纯度鉴定:经高效液相色谱仪测定。柱型:Shim-pack DIOL-300IY，流动相:HO，2流速:1.0ml/min, 进样量:100微升。用RID,5A示差折射检测器检测。葡聚糖分子量为:60万，50万，30万，13万，6.5万，4.0万，2.7万，1.5万，0.96万，0.58万 [7-8]2.2.2 红菇多糖～茶树菇多糖对正常小鼠免疫器官重量的影响 将49只小鼠分成7组每组7只。分别为正常组、生理盐水组(浓度为0.9%)、环磷酰胺组(阳性对照组)、红菇1组、红菇2组、茶树菇1组、茶树菇2组。其中正常组不打药。打药组每只小鼠每天注射药物0.2ml,采取腹腔注射。连续给药5天后第6天眼眶取血后处死小鼠，摘取胸腺、脾，分别计算胸腺指数(mg胸腺重/10g体重)、脾指数(mg脾重/10g体重)。 药品用量:注射的环磷酰胺的浓度为20mg/kg,红菇1组和茶树菇1组的浓度均为25mg/kg,红菇2组和茶树菇2组的浓度均为50mg/kg。 [3]2.2.3红菇多糖～茶树菇多糖对免疫功能低下的小鼠免疫器官重量的影响 ?将42只小鼠分为6组，分别为正常组(不打药)、生理盐水组、红菇1组、红菇2组、茶树菇1组、茶树菇2组。打药组注射浓度为50mg/kg的环磷酰胺三次(隔天注射一次)，每只小鼠每天注射药物0.2ml,采取腹腔注射，造成小鼠免疫功能低下。 ?第七天开始给药，连续给药8天，第9天眼眶放血后处死小鼠，摘取胸腺、脾，分别计算胸腺指数(mg胸腺重/10g体重)、脾指数(mg脾重/10g体重)。 (3)药品用量:红菇1组和茶树菇1组的浓度均为50mg/kg,红菇2组和茶树菇2组的浓度均为75mg/kg。 [4,12]2.2.4 巨噬细胞吞噬试验 试验原理:一些颗粒状异物(本试验用鸡红细胞)注入小鼠腹腔，会迅速被腹腔中的吞噬细胞所清除。若将异物量恒定，则在显微镜下观察吞噬红细胞的百分率，可以反映出巨噬细胞的吞噬功能。给小鼠分别注射不同的药物，通过吞噬百分率(吞噬红细胞的巨噬细胞数量)和吞噬指数(每个巨噬细胞吞噬的红细胞数目)的观察，看两种真菌多糖是否能增强巨噬细胞的免疫功能，并得到增强免疫功能的最有效浓度。 试验步骤:将49只小鼠分成7组每组7只。分别为正常组、生理盐水组、环磷酰胺组、红菇1组、红菇2组、茶树菇1组、茶树菇2组。其中正常组不打药。打药组每只小鼠每天注射药物0.2ml,采取腹腔注射。连续给药5天后第6天停止给药。第7天腹腔注射2%鸡红细胞悬液(每只0.5ml)，1小时后 腹腔注射生理盐水(每只1ml),轻揉小鼠腹部1分钟，然后剪开小鼠腹壁表皮肤，眼眶取血后处死小鼠, 吸出腹腔液0.5ml平均分滴于两片载玻片上，制成薄片(使巨噬细胞单层均匀分布)，用1:1丙酮,甲醇溶液固定。4%(v/v)Giemsa,磷酸缓冲液染色3min.用蒸馏水漂洁，晾干。按下式计算吞噬百分率和吞噬指数(用倒置显微镜直接计数)。 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞吞噬百分率,×100% 100个巨噬细胞 3 被吞噬的鸡红细胞总数吞噬指数, 100个巨噬细胞 药品用量:注射的环磷酰胺的浓度为20mg/kg,红菇1组和茶树菇1组的浓度均为25mg/kg,红菇2组和茶树菇2组的浓度均为50mg/kg。 [5-6]2.2.5 红菇多糖、茶树菇多糖对S小鼠的抑瘤作用 180 取肿瘤鼠的癌细胞，用生理盐水配成25%(V/V)的细胞悬液，以每鼠0.2ml接种于小鼠右腋皮下。24小时后分组每组10只，雌雄各半。共分9组分别为正常组、生理盐水组、环磷酰胺组、红菇1组、红菇2组、红菇3组;茶树菇1组、茶树菇2组、茶树菇3组。 正常组不打药，其他组按每鼠0.2ml给药，采取腹腔注射。连续给药9天，第10天眼眶取血后处死小鼠，摘取瘤块、胸腺、脾，分别计算肿瘤抑制率，胸腺指数(mg胸腺重/10g体重)，脾指数(mg脾重/10g体重)。 对照组平均瘤重,实验组平均瘤重抑瘤率(%),×100% 对照组平均瘤重 药品用量:注射的环磷酰胺的浓度为20mg/kg,红菇1组和茶树菇1组的浓度均为25mg/kg,红菇2组和茶树菇2组的浓度均为50mg/kg。红菇3组和茶树菇3组的浓度均为75mg/kg。 2.3 数据处理 以表示，组间差异用t检验。 x,s 3结果与分析 3.1红菇多糖、茶树菇多糖的纯度测定和分子量测定 红菇多糖，茶树菇多糖经DEAE,Sephadex A-25纯化后在高效液相色谱柱上呈现一个对称峰，说明样品具有相当纯度，与标准葡聚糖对照，得出红菇多糖的重均分子量为18122，茶树菇多糖的重均分子量为11863。(见图2-1，图2-2) 图2-1 红菇多糖的高效液相色谱图 出峰时间(min)9.287 数均分子量Mn4031 重均分子量Mw18122 分子量分布宽度D4.50 4 图2-2 茶树菇多糖的高效液相色谱图 出峰时间(min)9.189 数均分子量Mn4376 重均分子量Mw11863 分子量分布宽度D2.71 3.2红菇多糖、茶树菇多糖对小鼠免疫器官重量的影响 正常小鼠经红菇多糖，茶树菇多糖注射后对脾脏和胸腺的影响结果见表2-1。分析表2-1得出:在试验剂量下，两种多糖对小鼠的免疫器官的重量有增重作用。环磷酰胺对小鼠的脾脏重量有减少作用差异有显著的意义(P,0.05)。红菇1组、茶树菇2组，能显著增加小鼠的脾脏重量，与对照组相比，差异有非常显著的意义(P,0.01)。红菇2组、茶树菇1组能很显著增加小鼠的脾脏重量，与对照组相比，差异有非常非常显著的意义(P,0.001)。但是，小鼠的胸腺结果与脾脏相反，这两种多糖对小鼠的胸腺的重量没有增加。其原因有可能是给药(多糖)剂量不足。 -1 红菇多糖、茶树菇多糖对小鼠免疫器官重量的影响 表2 药物剂量动物数 处理 脾指数() 胸腺指数() x,sx,s mg/kg×d 7 正常组 34.92?5.24 34.08?8.05 7 生理盐水 34.51?7.45 34.87?12.3 7 环磷酰胺 20×5 24.81?6.69? 20.68?5.00 7 红菇1 25×5 78.24?19.5, 21.28?5.17 7 红菇2 50×5 87.89?17.3? 22.33?6.70 7 茶树菇1 25×5 58.60?9.30? 21.02?6.81 7 茶树菇2 50×5 70.54?20.4, 19.73?7.80 ,P,0.01，?P,0.001，?P,0.05(和生理盐水组相比) 3.3红菇多糖，茶树菇多糖对免疫功能低下的小鼠免疫器官重量的影响 经试验，红菇多糖，茶树菇多糖对免疫功能低下的小鼠免疫器官重量的影响见表2,2。表2,2试验结果表明:两种多糖对小鼠的脾脏有明显的增重作用，红菇1，红菇2，茶树菇2与对照组相比差异有非常显著意义(P,0.01)。茶树菇1与对照组相比差异有非常非常显著意义(P,0.001)。但两种多糖对小鼠的胸腺却没有增重作用。 表2,2 红菇多糖，茶树菇多糖对免疫功能低下的小鼠免疫器官重量的影响 动物数 脾指数 胸腺指数 药物剂量mg/kg处理 ×d x,sx,s 7 正常组 35.58?7.71 34.68?9.56 7 生理盐水 50.77?13.82 36.87?13.56 7 红菇1 50×8 124.49?28.05, 16.26?7.75 7 红菇2 75×8 176.61?41.71, 6.42?2.00 7 茶树菇1 50×8 123.41?14.3? 13.62?14.3 7 茶树菇2 75×8 123.18?29.04, 20.50?15.79 ,P,0.01，?P,0.001(和生理盐水组相比) 5 3.4对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 正常小鼠经红菇多糖，茶树菇多糖注射后对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响见表2-3。表2-3试验结果表明:环磷酰胺组、红菇2组与对照组相比，巨噬细胞吞噬率差异没有显著意义(P,0.05)，红菇1组与茶树菇1、2组与对照组相比，差异有显著意义(P,0.05)。试验组的吞噬指数与对照组相比都有显著意义(P<0.05,P<0.001)。所以红菇1组(25mg/kg)与茶树菇1、2组(25mg/kg、 50mg/kg)能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数。 表2-3 红菇多糖、茶树菇多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 药物剂量 巨噬细胞吞噬率% 吞噬指数 处理 x,sx,smg/kg×d 正常组 30.7?1.28 0.597?0.154 生理盐水 32.1?2.09 0.680?0.124 环磷酰胺 20 × 5 36.4?10.4 0.729?0.203 红菇1 25 × 5 47.4?3.63? 1.116?0.179? 红菇2 50 × 5 40.9?4.71 0.798?0.199? 茶树菇1 25 × 5 47.5?3.75? 0.797?0.134? 茶树菇2 50 × 5 47.7?4.15? 0.871?0.176? ? P,0.05，?P,0.001，(与对照组相比)。 3.5红菇多糖、茶树菇多糖对S小鼠的抑瘤作用及对免疫器官重量的影响 180 经试验，红菇多糖、茶树菇多糖对S小鼠的抑瘤作用及对免疫器官重量的影响见表2-4，表2-5。180 表2-4抑瘤试验结果表明:红菇1，红菇2，茶树菇1组，抑瘤率远远小于环磷酰胺(41.5%)，说明该试验剂量下对抑瘤作用效果小，所以后来又增加了红菇3组和茶树菇3组的试验。试验表明:红菇3组的抑瘤率达到35.4%，茶树菇2组的抑瘤率达到36.5%，虽然抑瘤率小于环磷酰胺(41.5%)但经统计学处理有显著差异，说明在这两种多糖浓度下有抑瘤活性。而茶树菇3组的抑瘤率达到51.7%，高于环磷酰胺的抑瘤率(41.5%)，说明茶树菇多糖在该浓度下的抑瘤效果比环磷酰胺更明显。 表2-4 红菇多糖、茶树菇多糖对S小鼠的抑瘤作用 180 药物剂量mg/kg动物数 瘤重(g) 处理 抑瘤率% x,s×d 始/终 10 正常组 1.2843?0.52 10 6.3 生理盐水 1.2035?0.81 10 41.5 环磷酰胺 20×9 0.7509?0.42 10 13.5 红菇1 25×9 1.1101?0.33 10 6.7 红菇2 50×9 1.1975?0.32 10 35.4 红菇3 75×9 0.8293?0.39 10 18.2 茶树菇1 25×9 1.0511?0.36 10 36.5 茶树菇2 50×9 0.8157?0.28 10 51.7 茶树菇3 75×9 0.6202?0.29 分析表2-5得出:这两种多糖对荷瘤小鼠的脾脏有明显的增重作用，其中茶树菇2组与对照组相比差异有显著意义，红菇2组、茶树菇1组与对照组相比差异有非常显著意义。 6 表2-5 红菇多糖、茶树菇多糖对S小鼠的免疫器官重量的影响 180 药物剂量 脾指数 胸腺指数 动物数 处理 x,sx,smg/kg×d 10 正常 63.9?15.9 35.0?11.9 10 生理盐水 72.1?33.8 33.7?7.12 10 环磷酰胺 20×9 48.0?17.1 21.9?3.89 10 红菇1 25×9 83.6?18.6 14.9?3.89 10 红菇2 50×9 87.4?14.3, 16.6?4.54 10 红菇3 75×9 74.0?15.1 12.4?5.39 10 茶树菇1 25×9 85.4?15.1, 20.2?5.03 10 茶树菇2 50×9 88.8?21.4? 15.6?4.34 10 茶树菇3 75×9 81.8?20.9 12.0?5.45 ,P,0.01，?P,0.05(与正常组相比) 4讨论 为了便于分析研究，我们做了一张综合比较表(见表3-1)讨论得出:巨噬细胞既有非特异性免疫功能又有特异性免疫功能，作为机体抗肿瘤和杀灭入侵病原微生物的效应细胞，在抗体的免疫系统中处于特殊的地位。本试验发现，给药组和对照组比较，在一定浓度下吞噬百分率增加明显，吞噬指数有显著差异，既能提高有吞噬能力的巨噬细胞的吞噬功能，也能提高单个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数目。 通过试验发现，两种多糖对免疫器官的作用表现也不同。两种多糖均能提高脾指数，说明在一定剂量范围内具有一定的提高小鼠非特异性免疫功能的作用，但对胸腺指数效果不显著，说明在防止胸腺老化方面不起作用。胸腺指数为什么反而下降，有待进一步地探索。 两种多糖在一定剂量范围内对小鼠实体瘤S180有一定的抑制作用，以茶树菇多糖效果更显著，在75mg/kg剂量下抑瘤效果高于阳性对照组环磷酰胺。 我们本阶段的试验只是先了解有关的实验原理和方法，并掌握了可行的一般实验手段，但实验过程中还存在多糖的提取方法不理想，得率不高;实验工作繁琐，数据处理麻烦的问题，那么，有没有其它的实验标准和探究手段呢,怎样进一步改进实验手段，改善实验方法将是我们下一阶段的研究目标。 本阶段的试验结论是:通过对这两种多糖的生物活性比较，发现红菇多糖、茶树菇多糖均有抑制小鼠S180肉瘤生长的作用，且茶树菇多糖的抑瘤活性效果更好。同时这两种多糖能提高荷瘤小鼠免疫器官中脾的重量，提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬机能的活性。本试验为真菌多糖的开发利用提供了新的材料和数据,为临床治疗肿瘤方面提供了科学依据。 表3-1 红菇、茶树菇实验结果综合比较表 茶树菇 红菇 100g 100g 投料量 3.25% 3.45% 提取率 糖含量 83.06, 81.47, 7 11863 18122 重均分子量 脾脏 58.60?9.30? 脾脏 78.24?19.5, 茶树菇1组 红菇1组 对正常小鼠免胸腺 21.02?6.81 胸腺 21.28?5.17 疫器官重量的 脾脏 70.54?20.4, 脾脏 87.89?17.3? 影响 茶树菇2组 红菇2组 胸腺 19.73?7.80 胸腺 22.33?6.70 脾脏 123.41?14.3? 脾脏 124.49?28.05, 对免疫功能低茶树菇1组 红菇1组 胸腺 13.62?14.3 胸腺 16.26?7.75 下的小鼠免疫 器官重量的影脾脏 123.18?29.04, 脾脏 176.61?41.71, 茶树菇2组 红菇2组 响 胸腺 20.50?15.79 胸腺 6.42?2.00 巨噬细胞 巨噬细胞 47.5?3.75? 47.4?3.63? 吞噬率, 吞噬率, 茶树菇1组 红菇1组 对小鼠腹腔巨0.797?0.134? 1.116?0.179? 吞噬指数 吞噬指数 噬细胞吞噬功巨噬细胞 巨噬细胞 能的影响 47.7?4.15? 40.9?4.71 吞噬率, 吞噬率, 茶树菇2组 红菇2组 0.871?0.176? 0.798?0.199? 吞噬指数 吞噬指数 18.2 13.5 茶树菇1组 红菇1组 对S180小鼠的36.5 6.7 茶树菇2组 红菇2组 抑瘤率, 51.7 35.4 茶树菇3组 红菇3组 脾脏 85.4?15.1, 脾脏 83.6?18.6 茶树菇1组 红菇1组 胸腺 20.2?5.03 胸腺 14.9?3.89 对S180小鼠的脾脏 88.8?21.4? 脾脏 87.4?14.3, 免疫器官重量茶树菇2组 红菇2组 胸腺 15.6?4.34 胸腺 16.6?4.54 的影响 脾脏 81.8?20.9 脾脏 74.0?15.1 茶树菇3组 红菇3组 胸腺 12.0?5.45 胸腺 12.4?5.39 ,P,0.01，?P,0.001，?P,0.05 5收获和体会 这次试验，由于实验方法正确得当，实验态度严谨认真，得到了一系列试验数据，为我们继续进行下一阶段试验打下了基础，为下一阶段继续寻找更合适的生物抑癌材料，及多糖对其它动物的抑癌效果，抑制肿瘤生长和提高免疫活性的能力提供了一定的经验和依据。 同时，我们感受最深的是:要做好一个实验不容易，你必须专心致志，一丝不苟，而且遇到困难，不要退缩，勇于迎难而上，开动脑筋，争取独立思考，解决问题，还要善于去收集各方面有关的，去获取必要信息和一些背景知识，这是一个人自学能力的表现。通过实验，使我们学到了科学实验的方法和技能，我们认为以上的这些素质是作为科研工作者必备的，而且对我们的学习工作都大有裨益。 8 6参考文献 [1] 逯海燕，郭顺星，林晨.真菌多糖等代谢产物的抗肿瘤药理研究综述[J].天然产物研究与开发，2000,12 (6):74,78. 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