双侧肾上腺切除大鼠脑缺血后血脑屏障破坏的研究

双侧肾上腺切除大鼠脑缺血后血脑屏障破坏的研究 双侧肾上腺切除大鼠脑缺血后血脑屏障破 坏的研究 2z. ? 202?ClinNeuroI,August1999.Vo1.12,N 双侧肾上腺切除大鼠脑缺血后 血脑屏障破坏的研究 任明朱/黄旭升张风英刘洁晓7弓,_L, 【摘要】目的观察脑缺血时体内自身的糖皮质激素变化对血脑屏障(BBB)的影响.方法采用线挂法 造成脑缺血模型,用辣根过氧化物薛组织化学染色的方法,观察双侧肾上腺切除大鼠局灶脑缺血后血脑屏障 的改变.结果双侧肾上腺切除后脑缺血组(A组)大鼠BBB破坏的范围为10.101士1.411mm.'单纯脑缺血 组(B组)大鼠BBB破坏范围为6.191士1.045mm.,A组大鼠BBB破坏的范围大于B组大鼠BBB破坏的范 围(P<001).结论脑缺血时体内自身的糖皮质激素升高对BBB具有保护作用. 【关键词】大鼠肾上腺切除脑缺血血脑屏障 —一 ——— ——一 r——,._————一 Bloodbrainbarrierdamagedinthecerebralischemiaratafterbilateraladrenalectomy RenMin,ZhuKe,l-luangXusheng,eta1.DepartmentofNeurology,ChangZhengHospital, Shanghai200003 [Abstract]ObjectiveToobservetheeffectofincreasedglucocorticoidwithincircu, lationonbloodbrainbarrier(BBB)inthecerebraIischemicrataherbilateraladrenalectomy. MethodsProducingfocalcerebraliSChe-miamodelusingthreadocclusionmethodi12bilate ral adrenalectomicrat,detectingthechangesofBBBdestroyedwithhorse— radishperoxidasehis, tochemicalstaining.ResultsTheareaofBBBdamagedofgroupAwas10.101?1.411 mm(bilateraladrenalectomypluscerebralischemia).ItwaslargerthanthatofgroupB(P< 0.01),theareaofBBBdamagedinmerelycerebralischemiagroupwas6.191士1.045mm. ConclusionDuringcerebralischemia,theincreasedglucocorticoidmightplayaprotective roleonischemiccerebraltissuethroughdecreasingBBBpermeability. [Keywords]RatAdrenalectomyCerebralischemia.Bloodbrainbarrier 脑梗塞发生时血循环中糖皮质激素升高,升高 的糖皮质激索对免疫功能具有抑制作用,过度的免 疫抑制使机体容易招致感染,这已为许多实验所证 实.但血循环中糖皮质激素升高对机体是否有有 利的一面,目前尚缺乏实验依据].本实验采用双侧 肾上腺切除后大鼠局灶脑缺血模型,观察了脑缺血 时血循环中升高的糖皮质激素对缺血部位BBB的 影响,目的在于探讨血循环中升高的糖皮质激素对 BBB是否具有保护作甩 l材料与方法 1.1动物分组选用SD大鼠l6只,体重200g, 分为A和B组,每组8只A组为双侧肾上腺切除 加脑缺血组,B组为对照组,即单纯脑缺血组. 1.2方法 1_2.1双侧肾上腺切除用10水合氯醛麻醉A 组大鼠(370mg/kg)后,把大鼠仰卧固定,经上腹部 切口暴露双倒肾上腺并摘除之.术后经腹腔给予地 塞米松(1mg/kg,bid),均饮用生理盐水,96小时后 行大脑中动脉栓堵. 1.2.2脑缺血模型的建立采用线栓法,即经右侧 颈动脉插入直径为0.165film的尼龙单丝,经 Willis环堵住该侧大脑中动脉入口,栓堵后拔出尼 龙单丝,形成缺血脑组织再灌注. 1.2.3组化染色瞄缺血1小时,再灌注2小时 后,经尾静脉注入辣根过氧化物酶(20/只),20 分钟后经心灌注生理盐水500ml,4多聚甲醛500 rIll,之后取脑入20蔗糖过夜,在冰冻切片机上冠 状切成50m的厚片,每2mrn保留一张脑片共6 作者单位:200003第二军医大学附属长征医院神经内科(任 明){解放军总医院神经内科(朱克黄旭升张凤英村洁晓) 张,所保留的脑片在0.05mol/LTBS中浸泡lO分 钟.再在含0.05DAB及2.5硫酸镍铵的TBS 中提泡30分钟,然后加3O过氧化氯(50>l/100 用0.05mol/LTBS中止 mlTBs),待染色满意后, 反应. 1.2.4血脑屏障破坏范围的测量在IBM一2000 通用图象工作站上测量血脑屏障破坏的范围,血脑 屏障破坏范围(均数?差)一各层血脑屏障破坏 的面积之和. 1.2.5统计方法选用Studentt检验,概率小于 0.05为差别有意义. 2结果 2.1两组大鼠血脑屏障破坏范围比较A组大鼠 血脑屏障破坏范围为10.101?1.411mm,B组大 鼠血脑屏障破坏范围为6.191士1.045mm..A组大 鼠血脑屏障的破坏范围显着大于B组大鼠血脑屏 障的破坏范围(P<0.o1). 2.2在制作脑缺血模型及注入辣根过氧化物酶的 过程中,A,B两组大鼠的表现未见明显差别.灌注 取脑时发现两组大鼠脑缺血模型的制作均成功. 3讨论 机体在正常应激时下丘脑一垂体一肾上腺轴 (HPA)被激活,血循环中升高的糖皮质激素可以动 员能量储备及提高心血管张力.HPA是机体免疫调 节的负反馈环路,HPA功能低下时机体易患自身免 疫性疾病.许多疾病情况下HPA亦被激活,血 循环中升高的糖皮质激素是否能在某种程度阻止病 情尚未得到证实,但糖皮质激素过度的升高对免疫 功能的抑制已被证实:.脑梗塞时HPA被激活, 血循环中的糖皮质激素升高,升高的糖皮质激 素对缺血脑组织是否具有保护作用目前尚无实验依 据. 本研究采用切除大鼠双侧肾上腺后建立局灶脑 )的方法,观察了BBB破坏的范围, 缺血模型(A组 并与单纯脑缺血大鼠(B组)BBB的破坏范围进行比 较切除大鼠双侧肾上腺后,虽给以基础量的糖皮质 ? 203? 激素维持(地塞米松,1mg/kg,bid),但在后续的脑 缺血情况下,因为已切除了HPA的靶腺即肾上腺, 所以循环中糖皮质激素不能再升高.单纯脑缺血大 鼠循环中糖皮质激素升高.通过对A,B两组BBB 破坏的范围比较,就可以了解脑缺血情况下循环中 升高的糖皮质激素对BBB的作用.结果发现,A组 BBB的破坏范围较B组的大,推测此时循环中升高 的糖皮质激素可能是通过降低BBB的通透性来发 挥作用的.本研究结论认为,脑缺血情况下循环糖皮 质激素的升高对BBB有保护作用,即脑缺血时血循 环中升高的糖皮质激素对机体有有利的一面.因此 在临床工作中,应该知道脑梗塞病人其体内HPA 激活,这一变化对机体具有保护作用,一般不进行干 预 参考文献 1CohenS,Tyrre1]DAd".SmithAP.Psycholtgica]stTeesandsuseep tibi]itytothecorfl~ncold.Eng[JMed,1991,825:606 2TecomaES,HueyLYPsychicdistressandtheimmuneresponse LLfescl,1985,弘:1799 3Whima]]MHRegulationofthehypothalamiccotticotropinre leasinghormotteneurosecretorysystem.progressinNenrobiolo— gY-1998,401573 4SternhergEM.WilderRL,GoldPW,eta1Ade{cotinthecentral componentoftheimmunesystem—hypoth~t]amic—pituitary—adrenal axisfeedbackloopisassociat.dwithsusceptibi]itytoexperimen talarthritisandotherinflammatorydiseasesAnnNYAcadSei, 1990.884:289 5TakasuH.KomiyaI,NagasawaYteta1.E~cerbationofautoim— munethyroiddysfunctionafterunilateraladrena[eetomyinpa dentswithCushingsyadromduetoaft.ad~nocortica】adenoma NewEnglJMed,1990,332:1708 8FssbenderK,SchmidtRMoberR,eta】Patternofaetiveationof thehypotha]amic—phuitaryad~na]axisinacutestroke.Stroke, l99425:1108 7FranceschiniR,GaadolfoC,CataldiA,el-aI_Twenty…fo—hour endorphinsecretorypatteraLnstrokepatientsStroke.1994,881 2l42 8AstronM,Olsso~T.AsplundK.Differentlinkageofdepressioa tohype~ortisofismearlyve~s~slateafterstrokeA3-yearLongi— tudina[study.StrokeI993,2489 (收稿1998—0fi29修回199810—14)